桑溝灣微生物種群消長變化的調(diào)查及鹽度突變對櫛孔扇貝（Chlamys farreri）抗病力影響的研究.pdf

1、中國海洋大學碩士學位論文桑溝灣微生物種群消長變化的調(diào)查及鹽度突變對櫛孔扇貝（Chlamysfarreri）抗病力影響的研究姓名：劉曉偉申請學位級別：碩士專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖指導教師：麥康森20040601摘要qJ下旬，尤以高溫后期為甚。養(yǎng)殖海區(qū)水溫與海區(qū)和扇貝體內(nèi)的總異養(yǎng)苗數(shù)量、弧菌數(shù)量、扇貝的死亡率存在顯著的正相關(guān)關(guān)系。從2003年7月至10月，對桑溝灣櫛孔扇貝死亡情況以及扇貝感染急性病毒性壞死癥(AVND)病毒情況進行調(diào)查，同時記錄采樣期

2、間的水溫。將每次隨機采集的櫛孔扇貝分別進行組織勻漿、差速離心、超速離心等步驟，得到病毒粗提液。通過電鏡負染方法觀察，并利用多克隆抗體進行ELISA檢測。電鏡觀察結(jié)果表明，在所分析的六次樣品中，都發(fā)現(xiàn)了王崇明等(2002)報道的引起櫛孔扇貝大規(guī)模死亡的球形病毒，但不同日期采集的櫛孔扇貝樣品病毒感染強度不同，在7月6日和8月5日的樣品中，電鏡視野下病毒粒子量一致，認為病毒感染強度一致；以后病毒感染強度逐漸增加，9月7日的樣品病毒感染強度最強

3、，隨后逐漸減弱至7月6目的水平。ELISA檢測結(jié)果表明，各月病毒量變化的明顯趨勢是先上升后下降，在大規(guī)模死亡期間的9月7日，病毒感染量是最高的。ELISA檢測的病毒含量與電鏡觀察結(jié)果～致。室內(nèi)實驗研究鹽度突變對適溫(201℃)養(yǎng)殖的櫛孔扇貝存活率、幾種免疫力指標的影響。將正常海水暫養(yǎng)的櫛孔扇貝直接轉(zhuǎn)移到調(diào)好鹽度(20、25)的海水中，同時設正常海水對照組，每組30只扇貝。每隔一定時間取血，取樣時問為突變前(計為Oh)、突變后1h、4h、

4、12h、24h、48h、72h和攻毒后6h。攻毒所用的細菌系2002年8月25目從采集于桑溝灣的櫛孔扇貝組織中分離到的最優(yōu)勢菌株(554，未鑒定)。檢測指標包括血細胞數(shù)目、血清蛋白含量、SOD活力、ACP活力，同時記錄扇貝的死亡情況。結(jié)果表明，突變后，鹽度20組和鹽度25組櫛孔扇貝的抗病力指標表現(xiàn)了相似了的變化趨勢。血細胞數(shù)目和血清蛋白含量均是先下降后上升再下降，但時間上有很大差異。鹽度20組的櫛孔扇貝血細胞數(shù)日從突變后開始下降，在突變

5、后第24h顯著上升并維持在差異不顯著的水平；血清蛋白含量在突變后的第4h顯著上升并維持在差異不顯著的水平，直到突變后的第72h又顯著下降。而鹽度25組的櫛孔扇貝不同之處在于血細胞數(shù)目是在突變后第12h顯著上升，血清蛋白含量是在突變后的第48h顯著下降。同一取樣時問，兩個處理的血清蛋白含量均與血細胞數(shù)目的變化相反。鹽度20組的櫛孔扇貝血清SOD活力在突變后直到第48h仍然維持在一個與突變前差異不顯著的水平，在第72h顯著上升。而鹽度25組