擴展莫尼茨絳蟲三個差異基因在不同節(jié)片間的表達規(guī)律及序列分析.pdf

1、擴展莫尼茨絳蟲屬于扁形動物門絳蟲綱，多節(jié)絳蟲亞綱，圓葉目，裸頭科莫尼茨屬，擴展莫尼茨絳蟲和貝氏莫尼茨絳蟲為常見優(yōu)勢種，其廣泛分布于國內(nèi)外養(yǎng)羊區(qū)。擴展莫尼茨絳蟲其內(nèi)部器官從發(fā)育、成熟到凋亡呈現(xiàn)出一系列的變化規(guī)律。由于絳蟲每個節(jié)片又都可以看作是一個個體，因此，可以將節(jié)片間的比較視作一個個體不同后代間的比較，而且這些后代間的個體間遺傳差異很小，對于其基因功能的研究十分有利，具有其它模式生物無法比擬的優(yōu)勢。本文對擴展莫尼茨絳蟲三個差異基因全序列

2、進行了分析。主要研究內(nèi)容如下： ⑴bZIP是一類堿性亮氨酸拉鏈類型的轉(zhuǎn)錄因子。為了研究擴展莫尼茨絳蟲bZIP基因在其頭節(jié)、幼節(jié)、成節(jié)、孕節(jié)生長過程中的表達規(guī)律，我們從擴展莫尼茨絳蟲cDNA文庫克隆得到了擴展莫尼茨絳蟲bZIP的cDNA序列，該基因全長1898bp，包含一個ORF，編碼574個氨基酸，屬于bZIP蛋白家族，與果蠅同源性達53％，命名為kzbZIP，推測蛋白的理論分子量為62.78KDa，等電點為8.76。Real

3、 Time PCR結(jié)果表明kzbZIP在頭節(jié)呈低豐度表達，在幼節(jié)也呈低表達，在成節(jié)表達量最低，在孕節(jié)則呈高表達。這表明kzbZIP作為轉(zhuǎn)錄因子，推測其在孕節(jié)組織中對某類生成蟲卵的基因的表達調(diào)控起著非常重要的作用。 ⑵RAD51是一種DNA修復蛋白。我們通過cDNA文庫克隆得到了擴展莫尼茨絳RAD51的cDNA序列，該基因全長1615bp，包含一個ORF，編碼304個氨基酸，推測蛋白的理論分子量為33KDa，等電點為4.51，屬

4、于RAD51蛋白家族，與蠑螈氨基酸同源性達85.56％，命名為kzRAD51。Real Time PCR結(jié)果表明kzRAD51在頭節(jié)呈高豐度表達，幼節(jié)也呈高表達，在成節(jié)表達量最低，在孕節(jié)則呈低表達。這表明kzRAD51作為DNA修復基因，推測其對成節(jié)和孕節(jié)發(fā)育相關的某類基因的損傷修復起著重要的作用。 ⑶PKC是一種信號分子，廣泛參與細胞的信息傳遞和腫瘤細胞的生長、分化、增殖等過程。為了研究擴展莫尼茨絳蟲PKC在其頭節(jié)、幼節(jié)、成

5、節(jié)、孕節(jié)生長過程中的表達規(guī)律，我們從cDNA文庫中克隆得到了擴展莫尼茨絳蟲PKC的cDNA序列，該基因全長1356bp，包含一個ORF，編碼379個氨基酸，推測蛋白的理論分子量為40KDa，等電點為9.19，屬于PKC蛋白家族，與水熄蟲氨基酸同源性達57.1％，命名為kzPKC。RealTime PCR結(jié)果表明kzPKC在頭節(jié)呈低表達，幼節(jié)呈高表達，在成節(jié)和孕節(jié)上均呈是低表達。這表明kzPKC做為一種信號分子，可能影響著成節(jié)和孕節(jié)組織的