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文檔簡介
1、豬傳染性胃腸炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus of Swine,TGEV)是引起豬傳染性胃腸炎(Transmissible Gastroenteritis of Swine,TGE)的病原,屬于套式病毒目,冠狀病毒科,冠狀病毒屬。TGEV有四種主要的結(jié)構(gòu)蛋白:①纖突糖蛋白(S);②膜糖蛋白(M);③核衣殼磷蛋白(N);④小包膜蛋白(sM)。纖突糖蛋白(S蛋白)攜帶主要的B淋巴細(xì)胞抗原決定簇,
2、是唯一能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體和提供免疫保護(hù)的結(jié)構(gòu)蛋白。
本研究利用PCR方法和點突變技術(shù),成功克隆了TGEV-S基因。隨后構(gòu)建了表達(dá)載體pBAC176,該表達(dá)載體以EPSP基因作為選擇標(biāo)記,其目的基因TFGEV-S以增強(qiáng)型啟動子E35S為驅(qū)動。為進(jìn)一步提高目的基因表達(dá)量和篩選工作效率,構(gòu)建了表達(dá)載體pBAC178,該表達(dá)載體以紫色編碼基因(LC/PL)作為篩選標(biāo)記,其目的基因TGEV-S以玉米胚乳特異性啟動子(Zein)為驅(qū)
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