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文檔簡介
1、畜禽血常規(guī)檢驗(一),臨床獸醫(yī)學教研室內診組2012年4月,內容,目的與要求,掌握動物血樣的采取與抗凝方法。掌握血紅蛋白測定、紅細胞及白細胞計數的操作方法與注意事項。,一、血樣的采取與抗凝,1、血樣的采取① 采血前的準備:采血用應事先消毒滅菌、干燥處理。采血部位應剪毛按常規(guī)消毒。② 少量用血,一般可在耳尖、冠頂及靜脈末梢等處進行采取。③ 多量用血,大動物可在頸靜脈處進行采取;豬可在前腔靜脈處采??;禽類在翅內靜脈處采取,必要時
2、可進行心臟穿刺采取。小動物一般采用心臟采血。,,各種動物的采血部位,2、血樣的抗凝 獸醫(yī)臨床常用的抗凝劑、使用方法及用圖,見下表。,肝素,,血液學檢查項目與采血后可保存的時間,二、紅細胞計數(RBC) :顯微鏡計數法,1、原理 血液經200倍稀釋后,充入血細胞計數板,用顯微鏡觀察,計數一定容積內的紅細胞數并換算成每升血液中的紅細胞數。 2、器材與試劑 改良紐巴氏計數板、蓋玻片、沙利氏吸管、5ml吸管
3、、試管、小玻棒、顯微鏡、計數器、0.85%氯化鈉稀釋液。,3、方法① 用5毫升吸管準確吸稀釋液2毫升于試管中,用沙利氏吸管吸取血樣10微升,用脫脂棉擦去沙利氏吸管外壁多余的血液后插入試管底部,輕輕壓出血液于稀釋液中,再用上清液吸、吹數次,以洗出沙利氏管內黏附的血細胞,充分混勻后備用。② 將稀釋后的血樣用小玻棒取一滴,置于計數板與蓋玻片交界的邊緣,讓其自然浸入,使稀釋血樣擴散入計數室內,靜置2~3分鐘,鏡檢。③ 計數時用低倍鏡,依次
4、計數中央大方格內的四角和正中5個中方格,共80個小方格的紅細胞數。為避免重復和遺漏,計數時應按一定順序進行。注意壓在雙線上的紅細胞,遵守“數左不數右,數上不數下”計數法則。,4、計算方法 每mm3血液內紅細胞總數 = 5個中方格內紅細胞數×5×10×200×106 = 5個中方格內紅細胞數×1010 單位:個/升式中&
5、#215;5 — 5個中方格換算成1個大方格 ×10 — 1個大方格容積為0.1微升,換算成1.0微升 ×200 — 血液的稀釋倍數 ×106 — 由微升換算成升注意 防凝、防溶、取樣正確。,,5、正常參考值 健康動物除山羊的紅細胞數較多外,其他動物的紅細胞數約為6.0×1012~8.0×1012/L。6、臨床意義 ① 相對增多:脫水、急性
6、胃腸炎、腸便秘、滲出性胸膜炎、滲出性腹膜炎、某些傳染??; ② 絕對增多:紅細胞增多癥,見于代償性機能不全的心臟病及慢性肺部疾??; ③ 減少:各種貧血、出血性、溶血性、骨髓造血功能不全性貧血、營養(yǎng)不良性貧血、繼發(fā)性貧血。,三、白細胞計數(WBC) :顯微鏡計數法,1、原理: 用白細胞稀釋液破壞紅細胞后,混勻充入計數池中,在顯微鏡下計數一定容積中的白細胞數,經換算求得每升血液中的白細胞總數。2、試劑與設備:
7、 改良紐巴氏計數板、蓋玻片、沙利氏吸管、1ml吸管、試管、小玻棒、顯微鏡、計數器、白細胞稀釋液(2%冰醋酸溶液或1%鹽酸溶液)。,3、方法: 用1毫升移液管吸取白細胞稀釋液0.4毫升于小試管中,再用沙利氏吸管吸取血樣至20微升處,用脫脂棉擦去吸管周圍多余血液,然后將吸管插入小試管底部,緩慢放出血液后用上清液反復吹洗數次,以洗凈管內所粘附的血液,充分混勻振蕩,備用。取樣與計數方法與紅細胞計數方法相同,計數在計數室四角
8、的四個大方格內的白細胞數。,,4、計算方法: 每升血液內白細胞總數= 四個大方格白細胞數÷4×10×20×106 單位:個/升5、注意事項: 初學者容易把塵埃異物與白細胞混淆,可用高倍鏡觀察,白細胞有細胞核的結構,而塵埃異物的形狀不規(guī)則,無細胞結構。,,5、正常參考值(附后表)6、臨床意義 ① 增多:細菌性感染、炎癥、白血病、惡性腫瘤、中毒性疾病。 ②
9、 減少:病毒性傳染病、犬瘟熱、貓泛白血病減少癥、各種疾病晚期;再生障礙性貧血;藥物性降低:磺胺類、氯霉素、青霉素、鏈霉素、氨基比林、水楊酸鈉等;血液原蟲病、血液孢子病。,各種健康動物血紅蛋白數、紅細胞數及白細胞數參考值,資料見:安麗英編著.獸醫(yī)實驗診斷.中國農業(yè)大學出版社.2000年:25.,,,全自動血液細胞分析儀,檢驗動物種類多有12種動物檢測模式,如狗、貓、馬、牛、羊、猴、鼠,并有四種用戶自定義模式。適用范圍寵物醫(yī)院
10、 動物檢疫部門畜牧獸醫(yī)院動物園科研院校實驗中心,,操作方便嵌入式標本處理和測量單元全新高精度血液處理技術,抗凝全血9.6μl試劑自動加入,能直接感應試劑余量排堵方便20項檢測結果及WBC、RBC、PLT直方圖同屏顯示 9.6μl抗凝血只需按“計數“健即被吸取分析結果可靠界面鼠標操作,參數支持人工調整提供配套的動物
11、血檢測專用試劑有報告打印功能,,主要技術參數工作原理:電阻抗法,氰化高鐵血紅蛋白法及無氰化物的SFT法檢測參數:白細胞三分群,23項參數(含WBC、RBC、PLT彩色直方圖)標準用量:9.6μl(全血模式)20μl(預稀釋模式)檢測速度:≥40樣本/小時,可24小時開機有自動休眠及喚醒功能結果存儲:主機自動存儲12000份樣本的全部參數包括直方圖、歷史數據的管理查詢更便捷操作語言:全中文動物種類:狗、貓、馬、牛、羊、猴、
12、鼠等八種和四種用戶自定義模式質控方式:X-B、L-J、 、SD、CV標準方式:自動校準和人工校準顯示屏:大屏幕彩色液晶顯示,640 480分辨率信息:支持多種快速中文輸入接口:一個并行打印機接口,兩個USB接口,兩個PS/2接口,兩個RS232接口(支持聯網)電源:AC220V 50HZ,血常規(guī)化驗單,“血常規(guī)”檢查主要有四項指標:白細胞數(WBC計數)、紅細胞數(RBC計數)、血紅蛋白(HB)和血小板數(PLT計數)。
13、 白細胞數(WBC),它的多少反映身體抵御、殺滅致病微生物能力的強弱。如果減少通常是由于病毒感染、再生障礙性貧血、傷寒或瘧疾、營養(yǎng)不良、極度衰竭,以及脾功能亢進和自身免疫性疾病等。增多主要是急性化膿感染、炎癥存在、嚴重的組織損傷及大量的血細胞破壞、急性大出血和溶血、白血病及某些腫瘤等。 RBC、HB分別是紅細胞和血紅蛋白,是反映貧血的兩個指標。當發(fā)生貧血、白血病、失血等時,會減少;當發(fā)生嘔吐、腹瀉、缺氧和心肺疾病時增多。
14、 紅細胞(RBC)計數,增多的病理性原因有嚴重的肺氣腫、肺原性心臟病、真性紅細胞增多癥、慢性一氧化碳(CO)中毒等。減少的病理性原因有缺鐵性貧血、溶血性貧血、營養(yǎng)不良性貧血、再生障礙性貧血、失血性貧血等。 血紅蛋白(HB),其病理性原因與“紅細胞數”相同,但在各種貧血時,由于紅細胞與血紅蛋白含量不同,二者的減少程度可以不一致。因此,同時測定紅細胞和血紅蛋白,對貧血類型的鑒別有重要意義。 血小板數(PLT),它在止血、凝血過程
15、中起著十分重要的作用。正常畜禽每天血小板數有一定的波動,午后較早晨高,高原地區(qū)較平原地區(qū)高,妊娠中晚期升高,分娩后1-2天降低;劇烈活動和飼喂后升高,休息后又恢復到原來水平。如果低于正常值,就要引起重視,因減少常見于急性白血病、難治性貧血、脾功能亢進、彌漫性血管內凝血等;如果大于正常值,也不能馬虎,因在慢性粒細胞白血病、溶血性貧血及急性化膿性感染時,是增多的。,,當血常規(guī)化驗檢查的這些指標偏離(指標或高、或低)正常值范圍時,說明受檢者的
16、身體存在某一方面的病變。如果HGB值低于正常值,就說明有貧血存在,應該進一步檢查是什么性質的貧血。如果HGB值高于正常值,可能是因為患有血紅蛋白增高癥或者血液被濃縮的緣故。白細胞代表的機體的防御系統功能,其總數增高時,多表明有炎癥、感染存在。此時患病動物多有發(fā)熱癥狀,如果WBC值過高,并伴有嚴重的貧血,需進一步做骨髓穿刺檢查,排除白血病的可能。WBC值低于正常值,可由接受放射線、病毒感染藥物及化學物質中毒等引起。PLT減少時,可能會有出
17、血,如血小板減少性紫癜等;增高時,說明血液呈高凝狀態(tài),易發(fā)生血栓。其他檢查項目發(fā)生異常時,同樣提示機體出現了某一病變。,,血細胞直方圖 一、WBC直方圖: 是反映WBC體積大小的頻率分布圖。正常人WBC直方圖可見兩個明顯分離的峰,左峰為小細胞群(以淋巴細胞為主),右峰為大細胞群(以中性粒細胞為主),兩峰之間為中間細胞群(包括嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞)。小細胞群峰又高又陡,大細胞群較高較寬,中間細胞群一般為有一定寬度的平
18、坦區(qū)。小細胞群峰越高,淋巴細胞比率越大;大細胞群峰越高,中性粒細胞比率越大;而嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞增多或出現病理性細胞時,中間細胞群峰值增高。例如白血病時外周血中出現大量幼稚細胞,多分布于中間細胞群及其附近,使峰尖增高,不同白血病類型出現特異性直方圖?! 《?、RBC直方圖: 是反映RBC體積大小或任何相當于RBC體積大小范圍內粒子的分布圖。正常RBC直方圖為偏態(tài)分布曲線圖,峰值表示一定數量的RBC體積的平均值,與R
19、BC平均體積基本一致,正常人峰值一般在82-94fl之間。直方圖峰值變低,基底部增寬,說明RBC體積大小不一,與紅細胞分布增大一致。直方圖左移,提示RBC體積較小,如缺鐵性貧血病人的RBC直方圖明顯左移,基底部顯著增寬。直方圖右移,提示RBC體積較大,見于巨幼紅細胞性貧血和新生兒。RBC直方圖有時出現雙峰,是貧血治療有效的證據,多見于缺鐵性貧血、巨幼紅細胞性貧血病人治療后。 三、PLT直方圖: 是反映PLT體積大小分布頻率的分
20、布圖,正常PLT直方圖呈左偏態(tài)分布,峰值一般在6-10fl之間,直方圖左移,提示PLT體積偏小,直方圖右移,提示PLT體積偏大。直方圖尾部抬高或在20-30fl處出現另一個波峰,提示血液中可能存在較多的小紅細胞、紅細胞碎片、巨大血小板、血小板凝集及纖維蛋白等。缺鐵性貧血病人的PLT直方圖尾部明顯抬高、PLT減少及其治療過程中的直方圖多呈波浪狀。,Diagram,,,Cycle Diagram,Diagram,Diagram,Diagra
21、m,Diagram,,,Add Your Text,Diagram,Diagram,Add Your Title,Cycle Diagram,Diagram,Diagram,Progress Diagram,Block Diagram,,,,,TEXT,TEXT,TEXT,TEXT,TEXT,TEXT,TEXT,TEXT,Table,3-D Pie Chart,Block Diagram,Thank You !,www.themegal
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