家族性青少年高尿酸腎病致病基因研究魏昕

1、研究背景,家族性青少年高尿酸腎病又稱為家族幼發(fā)性高尿酸腎病（familial juvenile hyperuricaemic nephropathy,FJHN），是一種罕見的常染色體顯性遺傳性疾病，其臨床特點(diǎn)為青年發(fā)病，高尿酸血癥，腎小管尿酸排泄障礙及進(jìn)行性發(fā)展的間質(zhì)性腎炎以往的研究發(fā)現(xiàn)染色體16p12上的UMOD基因與該病的發(fā)生密切相關(guān)，但其具體突變位點(diǎn)在不同的人種中存在較大異質(zhì)性,研究背景,已報(bào)道了UMOD基因上的42個(gè)突變位點(diǎn)

2、與家族幼發(fā)性高尿酸腎 病相關(guān)，但這些突變位點(diǎn)主要集中在3號和4號外顯子區(qū)域，該區(qū)段編碼3個(gè)表皮生長因子樣區(qū)域和1個(gè)光氨酸富足區(qū)域,研究背景,UMOD基因包含2315個(gè)堿基，11個(gè)外顯子，編碼的蛋白質(zhì)為uromodulin 蛋白（又稱Tamm-Horsfall蛋白）,uromodulin在正常人的尿液中含量豐富，該蛋白雖已被發(fā) 現(xiàn)有一個(gè)多世紀(jì)了（1895），但其生物學(xué)功能尚不明確,,,,,,,,研究目的,

3、本研究的目的在于通過對一例較完整的中國南部的家族幼發(fā)性高尿酸腎病家系進(jìn)行遺傳學(xué)分析，定位中國家族幼發(fā)性高尿酸腎病的致病位點(diǎn)并探討其致病機(jī)制,診斷標(biāo)準(zhǔn),FJHN家系診斷標(biāo)準(zhǔn)：家族患病成員表現(xiàn)為常染色體顯性遺傳方式的慢性腎臟病痛風(fēng)或高尿酸血癥發(fā)生在腎功能損害之前家族中有兩例或以上成員為經(jīng)腎活檢證實(shí)的慢性間質(zhì)性腎炎患病成員診斷標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)腎損害（血肌酐水平≥1.4mg/dl）尿酸排泄分?jǐn)?shù)（FEUA%）：男性<5.5%; 女性

4、<7.8%FEUA%計(jì)算公式：[（血肌酐×尿尿酸）/（尿肌酐×血尿酸）]×100%,研究方法,FJHN家系的采集,患病成員,健康成員,,普通人群對照,,,,,,,,,DNA,尿液,腎組織,,,,,,外顯子測序，定位突變位點(diǎn),,,免疫熒光測定腎組織中uromodulin表達(dá),ELISA測定尿液中uromodulin濃度,研究結(jié)果,FJHN家系圖譜：4代，13例患者(10男，3女)，36例健康成員,研

5、究結(jié)果,13例患病成員臨床資料,研究結(jié)果,患病成員(A)UMOD基因在1815號堿基的位置上發(fā)生了突變（c.1815 A G，見圖二），該突變導(dǎo)致UMOD編碼蛋白u(yù)romodulin的第605號氨基酸由蘇氨酸變成甘氨酸,該突變在對照組（B,家族中的健康成員和100例無血緣關(guān)系的健康對照）中未出現(xiàn)。,A.,B.,,,研究結(jié)果,比較7例健存的患病成 員和15例未發(fā)病成員，15例無血緣關(guān)系的健康對照尿液中uromodulin濃度：患病成

6、員，未患病成員和健康對照尿uromodulin/尿肌酐分別為0.62mg/g，3.40 mg/g和3.10 mg/g，P<0.05,研究結(jié)果,比較健康對照（A）,非家族性痛風(fēng)腎患者（B），F(xiàn)JHN患者腎組織中uromodulin的表達(dá)：FJHN患者腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)uromodulin成團(tuán)塊狀聚集且表達(dá)明顯高于其他兩組。,討 論,以往研究報(bào)道的突變位點(diǎn)主要集中在3號和4號外顯子，這兩個(gè)外顯子所編碼的區(qū)域（EGF-like，D&am

7、p;C）與蛋白的折疊和轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)，這些位點(diǎn)的突變使uromodulin蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)聚集或在胞漿內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)能力下降，最終導(dǎo)致蛋白的分泌減少。,本研究所發(fā)現(xiàn)的新突變位點(diǎn)位于UMOD基因的9號外顯子（ c.1815 A G，p.605 T G），該區(qū)域編碼uromodulin蛋白的糖基磷脂酰肌醇錨定區(qū)（GPI -anchor），主要功能為將蛋白錨定在包膜上，然后通過酶解作用釋放到胞漿或細(xì)胞外。因此，該位點(diǎn)突變可能導(dǎo)致蛋白錨定失