重金屬檢查法

1、重金屬檢查法,2009-07-27,重金屬檢查法原理：,重金屬系指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)。在藥典規(guī)定的情況下，在弱酸溶液中，如：Ag+ 、 Pb++ 、 Bi+++ 、Cu++ 、 Cd++ 、 Sb+++ 、 As+++ 、 Sn++ 、 Ni++ 、 Co++ 、 Zn++ 、Hg++ 等金屬均能生成不溶性硫化物。在堿性溶液中，如：Hg++ 、 Pb++ 、Bi+++ 、Cd++ 、C

2、u++ 、Ni++ 、Co++ 、Zn++ 、Fe+++ Mn++ 等金屬均能生成不溶性硫化物。,重金屬檢查法方法：,由于實(shí)驗(yàn)條件不同,分為4種檢查方法。第一法適用于供試品不經(jīng)有機(jī)破壞，在酸性溶液中進(jìn)行顯色的重金屬檢查。第二法適用于供試品需灼燒破壞，取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?jīng)處理后在酸性溶液中進(jìn)行顯色的重金屬檢查。,重金屬檢查法方法：,第三法適用于供試品能溶于堿而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的藥品中的重金屬。第四法

3、用微孔濾膜過濾，使重金屬硫化物沉淀富集成色斑，用于有色溶液或重金屬限度較低的品種。檢查時(shí)，應(yīng)根據(jù)藥典品種項(xiàng)下規(guī)定的方法選用。,第一法：,除另有規(guī)定外，取25ml納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml后，加水或各藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml ;乙管中加入按各藥品項(xiàng)下規(guī)定的方法制成的供試液25ml；,第一法：,若供試液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無(wú)干擾的有色溶液，使之與乙管一致；

4、再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。,第一法：如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使顏色一致時(shí)（即對(duì)照管）,可取該藥品項(xiàng)下規(guī)定的二倍量的供試品和試液，加水或該藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑使成30ml，將溶液分成甲乙二等份，乙管中加水或該藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml；,第一法：如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使顏色一致時(shí)（即對(duì)照管）,甲管中加入硫代乙酰胺試液2

5、ml，搖勻，放置2分鐘，經(jīng)濾膜(孔徑3μm)濾過，然后甲管中加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，加水或該藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑使成25ml；再分別在乙管中加硫代乙酰胺試液2ml，甲管中加水2ml，照上述方法比較，即得。,第一法：供試品如含高鐵鹽影響重金屬檢查時(shí),可取該藥品項(xiàng)下規(guī)定方法制成的供試溶液，加抗壞血酸0.5～1.0g，并在對(duì)照液中加入相同量的抗壞血酸，再照上述方法檢查。,第二法：,除另有規(guī)定外，取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，加硝?.5ml，蒸干，

6、至氧化氮蒸氣除盡后;（或取供試品一定量，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml，使恰濕潤(rùn)，用低溫加熱至硫酸除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，在500～600℃熾灼使完全灰化），放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對(duì)酚酞指示液顯中性，,第二法：,再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加水稀釋成25ml；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，

7、加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水稀釋成25ml；照上述第一法檢查，即得。,第三法：,除另有規(guī)定外，取供試品適量，加氫氧化鈉試液5ml與水20ml溶解后，置納氏比色管中，加硫化鈉試液5滴，搖勻，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同樣處理后的顏色比較，不得更深。 第四法：微孔濾膜過濾法。,標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備:,稱取硝酸鉛0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml與水50ml溶

8、解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于10μg的Pb）。配制與貯存用的玻璃容器均不得含鉛。,重金屬檢查法的記錄要求：,1、必須記錄所采用的方法。2、供試品的取樣量3、標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液取用量 4、乙管與甲管比較，乙管中顯出的顏色淺于甲管，判為符合規(guī)定。,重金屬檢查法的計(jì)算：,1、標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液計(jì)算：1mol硝酸鉛[Pb(NO3)2]的質(zhì)量為3

9、31.2g，含鉛（Pb）為207.2g。稱取硝酸鉛0.160g配制成1000ml貯備液，含Pb量為： 207.2×0.160×1000 331.2×1000 =0.1000mg/ml貯備液依法稀釋10倍后，所得標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度為每1ml含10μg的Pb。,重金屬檢查法的計(jì)算：,2、重金屬限量計(jì)算：進(jìn)行檢查時(shí)，如取供試品1.0g，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2.0ml制成的對(duì)照液

10、比較，計(jì)算重金屬的限量。標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液體積(ml)× 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度(g/ml)× 100% 供試品量（g)= 2.0×0.000010×100% = 0.0020% = 百萬(wàn)分之二十 1.0,重金屬檢查法的計(jì)算：,3、標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液取樣量計(jì)算：根據(jù)取供試品量及限量計(jì)算。如取供試品2.0g，依法檢查，規(guī)定含重金屬

11、不得過百萬(wàn)分之五，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10μgPb/ml）多少毫升？重金屬限量×供試品重（g） = 0.000005 × 2.0 = 1.0ml 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度(g/ml) 0.000010,實(shí) 驗(yàn) 舉 例,例如葡萄糖注射液中重金屬 檢查：取本品適量（約相當(dāng)于葡萄糖3g），必要時(shí)，蒸發(fā)至約20ml，放冷，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量使成25ml，依法檢查（附錄Ⅷ H第一法

12、），按葡萄糖含量計(jì)算，含重金屬不得過百萬(wàn)分之五。計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液取用量V = 0.000005 × 3 = 1.5ml 0.000010,實(shí) 驗(yàn) 舉 例,【檢查】重金屬 取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，依法檢查（中國(guó)藥典2005年版二部附錄VIIIH第二法），與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液 ml制成的對(duì)照液比較，  （規(guī)定含重金屬不得過百萬(wàn)分之十） 結(jié)論：,實(shí) 驗(yàn) 舉 例

13、,氯化鈉注射液重金屬檢查:　取本品50ml，蒸發(fā)至約20ml，放冷，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量使成25ml，依法檢查（附錄Ⅷ H第一法），含重金屬不得過千萬(wàn)分之三。計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液取用量,實(shí) 驗(yàn) 舉 例,維 生 素 C重金屬檢查:重金屬　取本品1.0g，加水溶解成25ml，依法檢查（附錄Ⅷ H第一法），含重金屬不得過百萬(wàn)分之十。V = 0.000010 × 1.0 = 1.0ml

14、 0.000010,重金屬檢查注意事項(xiàng)：,1、標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液應(yīng)在臨用前精密量取標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備溶液新鮮配制，以防止鉛的水解而造成誤差。配制與貯存標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液使用的玻璃容器，均不得含有鉛。 2、硫代乙酰胺試液與重金屬反應(yīng)的最佳pH值是3.5 ，故配制醋酸鹽緩沖液（ pH 3.5 ）時(shí)，要用pH計(jì)調(diào)節(jié)。硫代乙酰胺試液加入量以2.0ml時(shí)呈色最深。,重金屬檢查注意事項(xiàng)：,第四法中的檢測(cè)范圍為2-5μg的鉛，且因體積小，所以硫代乙酰胺試液的用量

15、為1.0ml 。硫代乙酰胺試液顯色劑的最佳顯色時(shí)間為2分鐘，除第四法由于檢測(cè)限量低，且為了方便過濾，顯色時(shí)間為10分鐘外，第一、二法均為放置2分鐘。,重金屬檢查注意事項(xiàng)：,3、為了便于目視比較，第一、二和三法中的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液用量以2.0ml（相當(dāng)于20μg的鉛）為宜，小于1.0ml 或大于3.0ml ，呈色太淺或太深，均不利于目視比較。4、如需將熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)髦亟饘贆z查時(shí)，則熾灼溫度必須控制在500-600℃ 。,重金屬檢查

16、注意事項(xiàng)：,實(shí)驗(yàn)證明，熾灼溫度在700℃以上時(shí)，多數(shù)重金屬都有不同程度的損失。以鉛為例，在700℃經(jīng)6小時(shí)熾灼，損失達(dá)68%。某些供試品（如安乃近，諾氟沙星等）在熾灼時(shí)能腐蝕瓷坩堝而帶入較多的重金屬，應(yīng)改用石英或鉑坩堝操作。,重金屬檢查注意事項(xiàng)：,5、熾灼殘?jiān)酉跛崽幚?，必須蒸干，至氧化氮蒸汽除盡，否則會(huì)使硫代乙酰胺試液水解生成的硫化氫，而氧化析出乳硫，影響檢查。蒸干后殘?jiān)欲}酸處理的目的，是使重金屬轉(zhuǎn)化為氯化物，可以在水中溶解。為

17、了避免殘留的鹽酸影響供試品的酸度，要加水15ml，滴加氨試液至對(duì)酚酞指示液顯中性，此時(shí)再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，即可保證供試液的pH在 3.5 左右。,重金屬檢查注意事項(xiàng)：,6、微量高鐵離子的存在，在弱酸性溶液中會(huì)使硫代乙酰胺水解生成的硫化氫進(jìn)一步氧化析出乳硫，產(chǎn)生渾濁而影響重金屬的比色，因此必須除去。藥典中加入抗壞血酸使微量高鐵還原成亞鐵離子，因亞鐵不干擾檢查。,重金屬檢查注意事項(xiàng)：,7、如供試品本身能生成不溶性的硫化物時(shí)

18、，則影響重金屬檢查。為了避免這些干擾，一般均加入其它試劑如氰化鉀，灑石酸等，使能干擾的金屬離子，產(chǎn)生穩(wěn)定的絡(luò)合物。,重金屬檢查注意事項(xiàng)：,如硫酸鋅和葡萄糖酸銻鈉中鉛鹽檢查，即在堿性溶液中加入氰化鉀，或在中性溶液中加入灑石酸，使鋅離子或銻離子生成穩(wěn)定的絡(luò)合物后，用硫化鈉為試劑進(jìn)行測(cè)定。注意：使用氰化鉀試液，不能用移液管吸取，可用量筒或橡皮頭吸管吸取，測(cè)定過的溶液不能倒入酸缸中。,實(shí) 驗(yàn) 舉 例,葡萄糖酸銻鈉 :鉛鹽　取本品1.0g，加