消毒與滅菌技術

1、第三章 清潔、消毒與滅菌技術,一、基本概念 二、物品清潔法三、物理方法四、化學方法,一 基本概念,清潔,是清除物品上的一切污跡,如塵埃, 油脂等,消毒,清除或殺滅物品上的病原微生物,滅菌,清除或殺滅物品上的一切微生物, 以殺滅芽孢為準,防腐,抑制微生物的生長與繁殖,概念的鑒別,消毒——相對的，不一定達到無菌的要求滅菌——絕對的，一定達到無菌的要求。,二 物品清潔法,常用的清潔方法,清潔方法用于,衣被、家具、地面、墻

2、壁及醫(yī)療器械等物體表面的處理或物品消毒、滅菌前的處理,常用去污法,碘酊　　　　乙醇甲紫　　　　乙醇或草酸溶液陳舊血漬　　　　過氧化氫溶液高錳酸鉀　　　　維生素c或過氧乙酸墨水　　　稀鹽酸或草酸也可用氨水或過氧化氫鐵銹　　　　1%熱草酸溶液，也可用熱醋酸,,,,,,,擦拭法,高壓蒸汽滅菌法,常用消毒滅菌的方法,物理法,化學法,浸泡法,熏蒸法,噴霧法,,,,,,熱力滅菌法,其他法,輻射滅菌法,燃燒法,烤箱法,煮沸法,干熱法,濕熱法

3、,日光曝曬法,紫外線燈照射法,電子滅菌燈法,電離輻射法,,,,,,,,,,三、物理消毒滅菌法,（physical disinfection sterilization） 利用熱力或光照等物理作用，使微生物的蛋白質及酶變性或凝固，以達到消毒滅菌的目的 常用的有熱力、光照、輻射、過濾 除菌等方法。,（一）熱力消毒滅菌法,(heat disinfection sterilization) 主要利用熱力破壞微生物的蛋白質、

4、 核酸、細胞壁和細胞膜，從而導致 其死亡 效果可靠、經濟方便，使用廣泛,1、干熱消毒滅菌法,干熱是指相對濕度在20%以下的高熱，由空氣導熱，傳熱 較慢，干熱消毒滅菌常用的方法,,,焚燒----最徹底的滅菌方法,燒灼----直接用火焰滅菌方法 如接種環(huán)、試管口、三角瓶口,干烤----加熱160-170℃ 2h 玻璃器皿、陶瓷,紅外線----熱效應，與干烤類似,滅菌效果：可殺死營養(yǎng)

5、體和芽胞,,干 熱 消 毒 滅 菌 法,,濕熱由空氣和水蒸氣導熱，傳熱快，穿透力強，濕熱消毒滅菌常用的方法：高壓蒸汽滅菌法 121 ℃ 15-20mim（殺芽胞)煮沸消毒法 水煮100 ℃ 5mim(殺繁殖體)-2h(殺芽胞)流通蒸汽消毒法 水蒸汽100 ℃ 15-30mim(殺繁殖體)間歇蒸汽滅菌法 反復多次流動蒸汽間歇加熱滅菌(殺芽胞）巴氏消毒法 61 ℃ 30mim/71 ℃ 30s（殺致病菌）,2、濕熱消毒滅菌法,,原

6、理,適用,方法,是熱力消毒滅菌中效果 最好的一種方法利用高壓及飽和蒸汽的高熱 所釋放的潛熱滅菌，潛熱是指當1g100℃的 水蒸汽變成1g100℃的水時 所釋放的熱能（2，255J）,臨床廣泛應用于 耐高溫、高壓、潮濕 物品的滅菌，如各類器械、敷料、搪瓷、 橡膠、玻璃制品及溶液等是熱力消毒滅菌中效果 最好的一種,根據(jù)排放冷空氣的方式 和程度的不同，分為 下排氣式壓力蒸汽滅菌

7、 和預真空壓力蒸汽滅菌。,高壓蒸汽滅菌法,高采用高壓飽和蒸汽殺滅微生物，是最有效的滅菌方法115 ℃,70.91kPa,30min 121℃，103.1kPa,15-20’,,培養(yǎng)基,注射液,手提式滅菌鍋,滅菌箱,高壓蒸汽滅菌,熱壓滅菌所需溫度與相當壓力及時間,高壓蒸汽滅菌常用設備,軟包裝滅菌器,高壓蒸汽滅菌器,手提式熱壓滅菌器,高壓蒸汽滅菌的效果監(jiān)測,監(jiān)測滅菌效果,物理監(jiān)測法　用150℃或200℃的留點溫度計。使用前將溫度計汞柱

8、甩至50℃以下，放入包裹內，滅菌后檢查其讀數(shù)是否達到滅菌溫度　化學監(jiān)測法　主要是通過化學指示劑的化學反應，滅菌后呈現(xiàn)的顏色變化來辨別是否達到滅菌的要求。臨床常用的化學指示卡與化學指示膠帶，化學指示卡放在包的中央，化學指示膠帶粘貼在包的外面。,,,監(jiān)測滅菌效果,生物監(jiān)測法　是最可靠的監(jiān)測法，利用對熱耐受力較強的非致病性嗜熱脂肪桿菌芽孢作為指示劑，制成每片含106個嗜熱脂肪桿菌芽孢的菌紙片,使用時將10片菌紙片分別放于滅菌器四角及中央，待

9、滅菌完畢，用無菌鑷取出后．再放人培養(yǎng)基內，在56℃溫箱中培養(yǎng)48h至1周，若全部菌紙片無細菌生長則表示滅菌合格。,煮沸消毒法（boiling sterilization）,,要求,適用,方法,經5～10分鐘可殺滅繁殖體，達到消毒效果。 將碳酸氫鈉加入水中，配成1%～2%的濃度時，可提高沸點達105℃，增強殺菌作用，還可去污、防銹。,適用于耐濕、耐高溫的物品如金屬、搪瓷、玻璃和橡膠類等,將物品刷洗干凈，全部浸沒在水中，然后加熱煮沸消

10、毒時間從水沸后計算如中途加入物品，則在第二次水沸后重新計時,注意,煮前 煮時 煮后,應將物品刷洗干凈有軸節(jié)的器械或帶蓋的容器應 將軸節(jié)或蓋打開再放入水中空腔導管須先在腔內灌水物品不宜放置過多，大小相同 的碗、盆不能重疊，要保證物 品各面都與水相接觸,根據(jù)物品性質決定放入水的時間及消毒時間玻璃器皿應用紗布包裹好后，從冷水或溫水中放入，消毒時間為10～15min橡膠制品用紗布包好，待水沸后放

11、入，時間為5～10min金屬及搪瓷類物品，消毒時間為10～15min；,水的沸點受氣壓影響，海拔高的地區(qū)氣壓低，水 的沸點也低，需適當延長 消毒時間；海拔每增高300m，消毒時 間延長2min；,應用無菌器械將物品及時取出置于無菌容器內,流通蒸汽消毒法,水蒸汽100℃ 30-60’(殺繁殖體)適用對象：不需殺死芽孢的物體的消毒。適用于一些注射劑生產，尤其是1－2ml注射劑及不耐高熱的品種。若在藥液中加入抑菌劑（0.1%~

12、0.5%苯酚等），可殺死芽孢,,此法不能保證殺滅芽孢，因此制備過程要避免污染。,低溫間歇滅菌法,將滅菌物體置于60~80℃ ，1h后，置于20~25℃ ，24h。反復三次(殺芽胞）,,不宜高壓滅菌的培養(yǎng)基不耐熱的藥物和營養(yǎng)物發(fā)酵車間的管道等中藥注射劑常用該法,適用對象,,缺點：時間長、功效低，消滅芽孢效果差,巴氏消毒法,巴氏消毒法（殺致病菌） 61℃ 30’或71℃ 15’’ 82℃處理4秒,,適用對象：奶制、果汁、酒

13、、 糖漿等食品消毒。,1、紫外線消毒法,概念 紫外線消毒法是利用紫外線照射，使菌體蛋白發(fā)生光解、變性，菌體內的核酸、酶遭到破壞而死亡的一種消毒方法。紫外線的殺菌力與其波長密切相關，最佳殺菌波長為250～270nm.適應范圍　紫外線消毒適用于空氣消毒與物品表面的消毒。,（二） 輻射滅菌法,特點：紫外線穿透力較弱紫外線可殺滅多種微生物，包括桿菌、病毒、真菌、細菌繁殖體等。殺滅繁殖體需3~5s；殺滅芽孢需10min以上。,殺菌機制,使菌體

14、DNA失去轉換能力而死亡；破壞菌體蛋白質中的氨基酸，使菌體蛋白光解變性；降低菌體內氧化酶的活性，使氧化能力喪失；使空氣中的氧電離產生具有極強殺菌作用的臭氧。,方 法,空氣消毒物品消毒,消毒前做好室內清潔衛(wèi)生，關閉門窗，停止走動每10m2安裝30W紫外線燈管一支有效距離不超過2m照射時間30～60分鐘,消毒時應將物品全部暴露避免遮擋有效距離為25㎝～60cm照射時間為20～30分鐘。,注意事項(1)保持紫外線燈管

15、清潔，每2周用95％乙醇棉球擦拭燈管表面一次。(2)紫外線對眼睛和皮膚有刺激作用，照射過程中產生的臭氧對人亦有危害，故一般不在有人的環(huán)境中使用，必要時應戴防護鏡和穿防護衣。,(3)消毒物品時應定時翻動物品，使其表面受到直接照射。(4)為保證消毒效果，應定時檢測燈管照射強度(一般每3～6個月測定一次)，如燈管強度低于70μW/cm2時應更換，或建立使用時間登記本，凡使用時間超過1000h需更換燈管。(5)定期進行空氣培養(yǎng)，以監(jiān)測滅菌

16、效果。,紫外線消毒法,2、電離輻射,包括：β射線（電子束滅菌，適用薄、密度低 的物料） 60Co － γ射線（同位素輻射滅菌法）殺菌機理：產生游離基,破壞DNA。特點：射線穿透力強、被滅菌物體溫度變化小適用范圍：一次性醫(yī)用塑料制品的消毒、食品的消毒-不破壞其營養(yǎng)成分,,,電離輻射滅菌法特點,適用于熱敏性藥物的滅菌； γ射線穿透力強,特別適用于已包裝密封的藥品消毒滅菌可防二次污染

17、； 殺菌作用可靠，廣泛適用于固、液、半固體物料。 有可能使藥效活性降低，使用中注意安全保護。,微波是頻率在30-300000MHz，波長在0．001～1m左右的電磁波。,微波可以殺滅各種微生物，包括細菌繁殖體、真菌、病毒和細菌芽孢、真菌孢子等,常用于食物及餐具的消毒、醫(yī)療藥品及耐熱的非金屬材料器械的消毒滅菌。,3、微波消毒滅菌法,4、光照消毒法,又稱輻射消毒，主要利用紫外線的殺菌作用，使菌體蛋白質發(fā)生光解、變

18、性而致細菌死亡。其特點對桿菌殺菌能力強，對球菌較弱，對生長期細菌敏感，對芽孢敏感性差。,,原理,適用,方法,由于日光具有熱、干燥和紫外線的作 用有一定的殺菌力,常用于床墊毛毯衣服書籍等物品的消毒,方法是將物品放在直射陽光下曝曬6h，定時翻動，使物品各面均能受到日光照射。,日光暴曬法,臭氧消毒法,臭氧在常溫下為強氧化劑，穩(wěn)定性極差，易爆炸，主要依靠強大的氧化作用殺菌可殺滅細菌繁殖體、病毒、芽孢、真菌，并可破壞

19、肉毒桿菌毒素。,床單位臭氧消毒,（三）過濾除菌法,指藥液通過無菌濾器，除去活的和死的微生物而得到無菌濾液的方法。 特點： 　（1)適用于很不耐熱的藥物溶液的除菌 （2)必須無菌操作（濾球、容器、藥液、環(huán)境無菌等過程）。,,殺菌機理：含有微細小孔<0.22μm,只允許液體或氣體及孔徑<0.22μm的顆粒通過，細菌不能濾過。不能除病毒、支原體適用范圍：血清、毒素、輸液、生物制品、抗生素以及空氣等的除菌。,,物理滅菌各種方

20、法的比較,四、 化學消毒滅菌法,化學消毒滅菌法是利用化學藥物滲透細菌體內，使菌體蛋白凝固變性，干擾細菌酶的活性，抑制細菌代謝和生長或損害細菌膜的結構，改變其滲透性，破壞其生理機能等，從而達到消毒滅菌目的。,（一）化學消毒劑的使用原則,(1)根據(jù)物品的性能及微生物的特性，選擇合適的消毒劑。(2)嚴格掌握消毒劑的有效濃度、消毒時間及使用方法。(3)消毒劑應定期更換，易揮發(fā)的消毒劑要加蓋，并定期檢測，調整其濃度。,(4)浸泡前將物品洗凈擦

21、干，浸沒在消毒液內的物品應注意打開軸節(jié)或套蓋，管腔內應注滿消毒液。(5)在使用前用無菌生理鹽水沖凈消毒后的物品，避免消毒劑刺激人體組織,（二）化學消毒劑的分類,高效消毒劑 高效消毒劑可殺滅一切微生物，包括芽孢 (碘酊、福爾馬林等)中效消毒劑 中效消毒劑可殺滅細菌繁殖體，不能殺滅芽孢(乙醇、碘伏等)低效消毒劑 低效消毒劑可殺滅細菌繁殖體，不能殺滅結核桿菌、親水性病毒或芽孢(苯扎溴銨、氯己定等),（三）化學消毒劑的使

22、用方法,浸泡法 侵泡法是將物品洗凈、擦干后，浸沒在消毒液中進行消毒滅菌的方法。擦拭法 擦拭法是用消毒劑直接擦拭人體或物品表面，如皮膚、桌椅等，達到消毒滅菌的方法。噴霧法 噴霧法是利用噴霧器將消毒劑變成微粒氣霧彌散在空氣中．對空氣和物品表面進行消毒滅菌的方法。熏蒸法 熏蒸法是將消毒劑加熱或加人氧化劑，使其產生氣體來進行消毒滅菌的方法。,（四）常用的化學消毒劑,碘酊 iodine tincture過氧乙酸 perace

23、tic acid福爾馬林 formalin （37 ～40%的甲醛溶液)戊二醛 glutaraldehyde環(huán)氧乙烷 ethylene oxide含氯消毒劑乙醇 alcohol碘伏 iodophor,碘酊 消毒效力：高效,濃度和用法：2%用于皮膚消毒，擦后待干，再用70%乙醇脫碘2.5%用于臍帶斷端消毒，擦后待干，再用70%乙醇脫碘注意事項： 對皮膚有刺激性，不可用于黏膜消毒對金屬有腐蝕性，不可用于金屬器械的

24、消毒對碘過敏者禁用,過氧乙酸 peracetic acid,消毒效力：高效0.2％用于手消毒，浸泡1～ 2min0.5％用于餐具消毒，浸泡30 ～ 60 min0.2％ ～ 0.5％用于物體表面消毒，或浸泡10 min1％ ～ 2％用于空氣消毒，8 mL/m3，加熱熏蒸，密閉門窗30-120 min,過氧乙酸,注意事項： 對金屬有腐蝕性，不可用于金屬器械的消毒易氧化分解而降低殺菌力，需現(xiàn)配現(xiàn)用濃溶液有腐蝕性，配制時

25、要戴口罩和橡膠手套存放于陰涼避光處，防高溫引起爆炸,,福爾馬林　formalin (37 ～40%的甲醛溶液),消毒效力：高效40％甲醛2～10 mL／m3加水4～20 mL加熱，作室內物品及空氣消毒40％甲醛40—60 mL／m3加高錳酸鉀20—40 g，柜內熏蒸，密閉6～12 h10％甲醛可作浸泡器械消毒,福爾馬林,注意事項： 蒸汽穿透力弱，因此衣服應掛起消毒消毒效果易受溫度、濕度影響，要求室溫在18℃以上，相對濕度

26、在70％以上對人體有一定毒性和刺激性，使用時注意防護,戊二醛glutaraldehyde,消毒效力：高效濃度和用法：2％戊二醛溶液加入0.3％碳酸氫鈉，成為2％堿性戊二醛，用于浸泡不耐高溫的金屬器械、醫(yī)學儀器、內鏡等，消毒需10～30 min，滅菌需7～10 h.,戊二醛,注意事項： 每周過濾1次，每2周應更換消毒液1次浸泡金屬類物品時，加入0.5％亞硝酸鈉作為防銹劑消毒滅菌后的物品，使用前用無菌蒸餾水沖凈,環(huán)氧乙烷　eth

27、ylene oxide,消毒效力：高效環(huán)氧乙烷為氣體滅菌劑，用于精密儀器、器械、化纖、人造毛類制品等不耐熱、不耐濕物品的滅菌。滅菌劑量為800～1200 mg/L，溫度為54℃±2℃，相對濕度為60％±10％，時間為2.5～4 h.臨床上有少量物品時可放入丁基橡膠袋中滅菌；有大量物品時可放人環(huán)氧乙烷滅菌柜內滅菌,環(huán)氧乙烷,注意事項： 易燃易爆具有一定毒性，工作人員要嚴格遵守操作程序存放在陰涼通風無火源處儲

28、存溫度不可超過40℃，以防爆炸滅菌后的物品須通風處理，清除環(huán)氧乙烷殘留量后方可使用每次滅菌時，應進行效果檢測及評價,含氯消毒劑（常用的有漂白粉、漂白粉精、氯胺T、二氯異氰脲酸鈉等）,消毒效力：中、高效濃度和用法：0.5％漂白粉溶液、0.5％～1％氯胺溶液用于浸泡餐具、便器等，浸泡30 min1％～3％漂白粉溶液、0.5％～3％氯胺溶液噴灑或擦拭地面、墻壁及物品表面排泄物消毒：干糞5份加漂白粉1份攪拌，放置2 h，尿液100

29、mL加漂白粉1 g，放置1 h,含氯消毒劑,注意事項： 消毒劑保存在密閉容器內，置于陰涼、干燥、通風處，減少有效氯的喪失配制的溶液性質不穩(wěn)定，應現(xiàn)配現(xiàn)用有腐蝕及漂白作用，不宜用于金屬制品、有色衣服及油漆家具的消毒3 d更換一次消毒液,乙醇　alcohol,消毒效力：中效濃度和用法：70％～75％用于皮膚消毒95％用于燃燒滅菌注意事項： 易揮發(fā)，需加蓋保存，定期測定，保持有效濃度有刺激性，不宜用于黏膜及創(chuàng)面消毒

30、易燃，故應置于避火處,碘伏　iodophor,消毒效力：中效濃度和用法：0.5％～l.0％有效碘溶液用于外科手術及注射部位皮膚消毒．涂擦2次0.05%有效碘溶液用于黏膜、創(chuàng)面消毒注意事項： 碘伏稀釋后穩(wěn)定性差，宜現(xiàn)配現(xiàn)用避光密閉保存，放陰涼處消毒后不用乙醇脫碘,苯扎漠銨(新潔爾滅) bromogeraminum,消毒效力：低效 0.01％～0 05％用于黏膜消毒0.1％～0.2％用于皮膚消毒0.1%～0.2％用于

31、金屬器械消毒，浸泡15～30 min (加入0.5％亞硝酸鈉以防銹),苯扎漠銨(新潔爾滅),注意事項： 對肥皂、碘、高錳酸鉀等陰離子表面活性劑有拮抗作用有吸附作用，會降低藥效，所以溶液內不可投人紗布、棉花等對鋁制品有破壞作用，故不可用鋁制品盛裝,氯己定(洗必泰) chlorhexi—dine,0.02％用于手消毒，浸泡3min0.05％用于創(chuàng)面消毒0.1％用于物體表面消毒注意事項： 對肥皂、碘、高錳酸鉀等陰離子表面活

32、性劑有拮抗作用消毒效力：低效 有吸附作用，會降低藥效，所以溶液內不可投人紗布、棉花等,常用的消毒防腐劑及應用,作業(yè),1、清潔、消毒、滅菌的概念。 2、化學消毒的原則是什么? 3、敘述紫外線消毒法的注意事項。,1、破傷風病員用過的敷料最好的處理方法是： A.清洗后消毒 B.燒毀 C.高壓滅菌 D.煮沸消毒 E.放棄（B）,習題,2、對細菌芽胞無效的化學消毒劑是：A.碘伏

33、 B.20%的碘酊 C.甲醛 D.0.5%過氧乙酸 E.2%戊二醛（A）,3、某病人因急性肝炎收入傳染病院，其信箋、錢幣用下列何種消毒方法為宜A.高壓蒸氣滅菌　　B.噴霧法 C.熏蒸法　　　　D.擦拭法 E.浸泡法（C）,4、下列說法正確的是 A.綠膿桿菌污染的敷料可煮沸消毒再次使用　B.紫外線消毒從燈亮后計時　　C.煮