消毒與滅菌效果監(jiān)測(cè)技術(shù)_第1頁(yè)
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1、,消毒與滅菌效果監(jiān)測(cè)技術(shù),四川感控中心,消毒滅菌效果監(jiān)測(cè)的重要意義 1 消毒滅菌設(shè)備存在質(zhì)量和故障等硬件問(wèn)題; 2 消毒滅菌工藝存在人為操作不規(guī)范因素; 3 操作人員存在技術(shù)不熟練或責(zé)任心問(wèn)題; 4 消毒藥品存在質(zhì)量問(wèn)題; 5 消毒藥品多數(shù)不是純品或不穩(wěn)定性。,工藝監(jiān)測(cè)—壓力蒸汽滅菌質(zhì)量控制三查工藝檢查:檢查門(mén)框和墊圈有無(wú)損壞;門(mén)鎖扣有效;壓力表能否達(dá)零位;用水檢查排氣口有無(wú)堵塞;關(guān)門(mén)后檢查是否存在漏氣;檢查調(diào)節(jié)閥

2、零活度,壓力和溫度指示是否吻合;安全閥的有效性;輸送蒸汽壓力過(guò)高,加層溫度過(guò)高;預(yù)真空式進(jìn)行B-D檢驗(yàn);把關(guān)檢查:滅菌包裝是否符合要求;滅菌包只小不能大;滅菌包擺放是否正確;裝載不過(guò)量;放常規(guī)監(jiān)測(cè)器材;滅菌后檢查:滅菌包有無(wú)損壞;有無(wú)濕包現(xiàn)象;有孔容器是否關(guān)閉;監(jiān)測(cè)指標(biāo)是否合格;無(wú)菌物品存放,發(fā)放,有效期等;,壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測(cè)器材制作標(biāo)準(zhǔn)1.國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織關(guān)于《對(duì)化學(xué)指示劑標(biāo)準(zhǔn)》。2.美國(guó)藥典第二十一版:關(guān)于生物指示劑參數(shù)的

3、規(guī)定。3.中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)制定并由國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局頒布:國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(消毒效果評(píng)價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn) 即GB 15981—1995)。4.《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版對(duì)消毒滅菌監(jiān)測(cè)器材有專(zhuān)門(mén)條款規(guī)定。,壓力蒸汽滅菌效果生物監(jiān)測(cè)方法1 生物指示劑:標(biāo)準(zhǔn)抗力菌株為嗜熱脂肪桿菌(ATCC 7953或SSI K31)芽胞,制劑為商品芽孢菌片和自含式生物指示劑管。2 生物指示劑含芽孢數(shù)為5×105~ 5×106 cfu /片。3

4、生物指示劑抗力標(biāo)準(zhǔn):在121℃飽和壓力蒸汽條件下,存活時(shí)間(ST)≥3.9min,殺滅時(shí)間(KT)≤19min,D121值1.3min~1.9min。4 抗力標(biāo)定:在標(biāo)準(zhǔn)生物和化學(xué)指示劑檢測(cè)器內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)和標(biāo)定。,2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》對(duì)化學(xué)指示劑規(guī)定指標(biāo) 1 監(jiān)測(cè)條件規(guī)定:以標(biāo)準(zhǔn)抗力檢測(cè)器為標(biāo)定儀器,以生物指示劑抗力為標(biāo)準(zhǔn),對(duì)化學(xué)指示劑進(jìn)行抗力監(jiān)測(cè)。 2 下排氣滅菌監(jiān)測(cè)121?指示卡與脈動(dòng)真空滅菌監(jiān)測(cè)132 ?指示卡分別在各

5、自飽和蒸汽作用下,要求達(dá)到的符合率如下: 第1組:以121 ?飽和蒸汽作用20min,132 ?作用3min,指示色塊與標(biāo)準(zhǔn)色塊符合率為100%; 第2組:以121 ?飽和蒸汽作用10min,132 ?作用1min,指示色塊與標(biāo)準(zhǔn)色塊符合率<20% ;第3組:以117 ?飽和蒸汽作用20min,128 ?作用3min,指示色塊與標(biāo)準(zhǔn)色塊符合率<20% ;,,,,,,,,,有菌生長(zhǎng),,,ME-型壓力蒸汽滅菌 生物指示劑,,ME

6、-型壓力蒸汽滅菌 生物指示劑,北京四環(huán)衛(wèi)生藥械廠,,,,,,,,,,菌管結(jié)構(gòu),,,,透氣孔,管蓋外管,培養(yǎng)基管,菌片,,,,,,,自含式生物指示劑管使用方法 1 將生物指示劑管2支直接置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包內(nèi),放于滅菌器下層排氣口附近(規(guī)范指排氣口上方)。 2 按正常滅菌程序進(jìn)行滅菌處理。 3 將試驗(yàn)包取出,取出指示管, 于管尖部夾碎套管內(nèi)安瓿。 4 將其置于56℃培養(yǎng)48h。,,,,,在此部位夾碎,,嗜熱脂肪桿菌

7、芽孢菌片使用方法 1 將裝有1片菌片的小紙袋2份放于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中心包好。 2 將試驗(yàn)包放于滅菌器下層排氣口附近。 3 按正常滅菌程序進(jìn)行滅菌處理。 4 取出試驗(yàn)包,在100級(jí)潔凈條件下,取出菌片直接接種于裝有5~10ml溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液試管內(nèi),同時(shí)接種1片陽(yáng)性對(duì)照菌片。 5 將接種管置于56℃培養(yǎng)48h觀察結(jié)果,若無(wú)菌生長(zhǎng)繼續(xù)培養(yǎng)至1周。,,,,,,,,,,,,,,,,菌片紙袋,滅菌后取出菌片,接種到培養(yǎng)基,于5

8、6℃培養(yǎng)48h,,,,,,,未培養(yǎng)前 使用后擠破 培養(yǎng)有菌生長(zhǎng),菌片,,,,,,,,,,,,,,,,,,,生物監(jiān)測(cè)結(jié)果判斷:符合以下條件:1 所有試驗(yàn)管內(nèi)培養(yǎng)液均未變色并呈透明無(wú)沉淀物;2 陽(yáng)性對(duì)照管內(nèi)培養(yǎng)液變成黃色并呈混濁,為滅菌合格。 附溴甲酚紫培養(yǎng)液處方及配制方法 處方:蛋白胨 10g,葡萄糖 5g,可溶性淀粉 1g,溴甲酚紫乙醇溶液10ml,加蒸餾水至1000ml。 調(diào)節(jié)pH值7.0~7.2,分裝試管,

9、每管5~10ml,于115℃壓力蒸汽滅菌30min ,保存?zhèn)溆? 溴甲酚紫為2%,直接溶解于乙醇內(nèi)即可.,關(guān)于快速生物指示劑問(wèn)題 1 快速生物指示劑是近年來(lái)國(guó)外新推出的壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測(cè)器材,希望在56℃培養(yǎng)4 h內(nèi)出結(jié)果。 2 原理是利用細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程產(chǎn)生代謝酶,再以熒光顯色,以便肉眼觀察;嗜熱脂肪桿生長(zhǎng)過(guò)程可產(chǎn)生α-D葡萄糖酶與培養(yǎng)基中熒光素結(jié)合顯色。 3 目前該產(chǎn)品質(zhì)量尚達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn)要求,易受一些不穩(wěn)定因素影響。某醫(yī)院用其

10、監(jiān)測(cè)脈動(dòng)真空滅菌器出現(xiàn)的假陽(yáng)性率達(dá)11%~44%。,Rapid Indicator,環(huán)氧乙烷和干熱滅菌效果監(jiān)測(cè) 1 監(jiān)測(cè)所用生物指示菌為枯草桿菌黑色變種芽孢。 2 用標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC 9372)制成芽孢菌片。 3 監(jiān)測(cè)環(huán)氧乙烷抗力標(biāo)準(zhǔn):菌片含菌量5×105~ 5×106 cfu /片。在環(huán)氧乙烷用量為600mg/L+30mg/L,相對(duì)濕度60%+10%,54℃條件下,存活時(shí)間(ST)≥7.8min,殺滅時(shí)間(K

11、T)≤58min,D10值2.6min~5.8min。 4 監(jiān)測(cè)干熱滅菌抗力標(biāo)準(zhǔn):菌片含菌量與上述相同;在160 ℃干熱條件下,存活時(shí)間(ST)≥3.9min,殺滅時(shí)間(KT)≤19min,D121值1.3min~1.9min。 5 商品菌片每個(gè)紙袋1片,每包50片。,,,枯草桿菌黑色變種芽孢菌片使用方法 1 環(huán)氧乙烷滅菌效果監(jiān)測(cè): (1)將菌片連同紙包放入環(huán)氧乙烷滅菌包內(nèi),一式2份,放在滅菌器內(nèi)適當(dāng)部位;(2)按環(huán)氧乙烷滅菌程序

12、處理后,在潔凈度100級(jí)條件下,取出菌片將其接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯管內(nèi);(3)于37℃培養(yǎng)48h。 2 干熱滅菌效果監(jiān)測(cè): (1)將菌片連同紙包放于玻璃試管內(nèi),分別置于上中下中央部位,在中層內(nèi)角和門(mén)把手附近各放1片;(2)按干熱滅菌要求,作用1個(gè)滅菌周期;(3)按上述方法接種和培養(yǎng)。 3 商品枯草桿菌黑色變種芽孢菌片只適合于滅菌效果監(jiān)測(cè),不適合作定量殺菌試驗(yàn)。,生物指示劑使用應(yīng)注意的問(wèn)題菌片包括嗜熱脂肪桿菌芽孢和枯草桿菌黑色變種芽孢(AT

13、CC 9372)。1.菌片使用及存在問(wèn)題:制備培養(yǎng)基;專(zhuān)門(mén)技術(shù)人員負(fù)責(zé);需要布樣、采樣、接種;技術(shù)復(fù)雜、受外界因素影響、易發(fā)生二次污染、總費(fèi)用較高;計(jì)數(shù)問(wèn)題,主要是不易洗下回收。2.生物指示劑管使用問(wèn)題:使用方法簡(jiǎn)單,不受外界因素影響,容易保證監(jiān)測(cè)質(zhì)量。3.培養(yǎng)溫度問(wèn)題和培養(yǎng)基pH值影響問(wèn)題。4 不要試圖對(duì)菌片作回收活菌計(jì)數(shù),很困難。,營(yíng)養(yǎng)瓊脂表面枯黑桿菌菌落形態(tài)及色素,營(yíng)養(yǎng)瓊脂表面枯黑桿菌菌落形態(tài)及色素,,,,,,,,,,,,

14、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,枯草桿菌黑色變種繁殖體革蘭染色菌體,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,枯草桿菌黑色變種芽孢孔雀綠染色,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,枯草桿菌黑色變種芽孢孔雀綠染色,化學(xué)指示卡使用中的幾個(gè)問(wèn)題 1.如何看待標(biāo)準(zhǔn)色:標(biāo)準(zhǔn)色是

15、最低合格線。 2.布放正確和足夠數(shù)量:包中心,雙標(biāo)本。 3.指示卡性能測(cè)試:標(biāo)準(zhǔn)條件下標(biāo)定,如在標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)器內(nèi)進(jìn)行,達(dá)到升溫速度10秒、排氣速度5秒、溫度誤差0.5℃。 4.防潮:不直接接觸金屬和玻璃,對(duì)折放置 ,置于紗布?jí)K中。,化學(xué)指示卡變色不達(dá)標(biāo)原因分析 1.不達(dá)標(biāo)準(zhǔn)色,但均勻:可能是溫度不夠,時(shí)間不足,超熱蒸汽,其他工藝問(wèn)題(參閱生物指示劑的分析結(jié)果)。 2.不達(dá)標(biāo)準(zhǔn)色,但變色不均勻:帶花白點(diǎn),背面有濕印,

16、可能為指示卡提前受潮。 原因:器械的冷凝水;蒸汽含水量過(guò)高,如蒸汽源壓力低、輸送管道長(zhǎng)、管道漏氣;預(yù)熱不夠,進(jìn)蒸汽時(shí)冷凝水;送氣管道內(nèi)水未排除;干燥時(shí)間不足。,,,,,,,指示卡背面,,指示卡正面,,標(biāo)準(zhǔn)色塊,指示色塊,,指示色塊水濕印,,,,,,,,,,,,,,,,,,20(mg5010030050010001500,0.0020.0050.0100.0300.0500.1000.150,,,,,,,,

17、,,,,,,,,2:試紙偶爾有紙張厚薄不均造成有里外之分,浸上消毒液后顯出兩面顏色深淺不一,此時(shí)依顏色深的一面為準(zhǔn)。另有時(shí)標(biāo)準(zhǔn)色印制出現(xiàn)誤差,造成讀值偏差,發(fā)現(xiàn)時(shí)請(qǐng)與生產(chǎn)廠聯(lián)系解決。,,,,,Mg/L,(%),注意:1:該試紙不適用于二氧化氯、臭氧、過(guò)氧化氫和萬(wàn)福金安消毒劑監(jiān)測(cè)。,G-1型消毒劑濃度試紙,戊二醛測(cè)試卡檢測(cè)范圍及顯色情況 卡標(biāo)號(hào) 測(cè)試范圍 顯色情況

18、3983M1.5% 1.5%~2.0% 1.5%可不顯色或顯色不均勻 達(dá)到2.0%時(shí)方可正常顯色 3987M1.8% 1.8%~2.3% 1.8%可不顯色或顯色不均勻 達(dá)到2.3%時(shí)方可正常顯色 3989M1.

19、8% 2.1%~2.6% 2.1%可不顯色或顯色不均勻 達(dá)到2.6%時(shí)方可正常顯色,,,,戊二醛化學(xué)指示卡變色情況,,,,,Comply3987 M1.8%,正常未用指示卡,監(jiān)測(cè)變色不均勻,監(jiān)測(cè)變色均勻合格,,,Comply3987M1.8%,Comply3987M1.8%,,,化學(xué)測(cè)試卡使用時(shí)注意事項(xiàng) 1.化學(xué)指示卡只是

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