酶基因的隨機(jī)突變

1、酶基因的隨機(jī)突變酶基因的隨機(jī)突變1引言：引言：酶分子的定向進(jìn)化簡(jiǎn)稱為酶定向進(jìn)化，是模擬自然進(jìn)化過酶分子的定向進(jìn)化簡(jiǎn)稱為酶定向進(jìn)化，是模擬自然進(jìn)化過程（隨機(jī)突變和自然選擇）程（隨機(jī)突變和自然選擇），在體外進(jìn)行酶基因的人工隨機(jī)突變，，在體外進(jìn)行酶基因的人工隨機(jī)突變，建立突變基因文庫，在人工控制條件的特殊環(huán)境下，定向選擇建立突變基因文庫，在人工控制條件的特殊環(huán)境下，定向選擇得到具有優(yōu)良催化特性的酶的突變體的技術(shù)過程。得到具有優(yōu)良催化特性的酶的

2、突變體的技術(shù)過程。酶定向進(jìn)化的基本過程包括隨機(jī)突變，構(gòu)建基因文庫，定酶定向進(jìn)化的基本過程包括隨機(jī)突變，構(gòu)建基因文庫，定向選擇等步驟。酶的定向進(jìn)化的第一步是在體外人為的進(jìn)行積向選擇等步驟。酶的定向進(jìn)化的第一步是在體外人為的進(jìn)行積陰德隨機(jī)突變，以獲得豐富多樣的突變基因，為后續(xù)的定向選陰德隨機(jī)突變，以獲得豐富多樣的突變基因，為后續(xù)的定向選擇打下基礎(chǔ)。擇打下基礎(chǔ)。酶基因的體外隨機(jī)突變首先要獲得酶基因，然后在體外進(jìn)酶基因的體外隨機(jī)突變首先要獲得酶

3、基因，然后在體外進(jìn)行隨機(jī)突變，體外隨機(jī)突變的技術(shù)多種多樣，主要有易錯(cuò)行隨機(jī)突變，體外隨機(jī)突變的技術(shù)多種多樣，主要有易錯(cuò)PCRPCR技術(shù)，技術(shù)，DNADNA重排技術(shù)，基因家族重排技術(shù)等。重排技術(shù)，基因家族重排技術(shù)等。這些突變方法的目標(biāo)都是為了獲得豐富多樣的突變基因，這些突變方法的目標(biāo)都是為了獲得豐富多樣的突變基因，但是各自采用的進(jìn)化策略和側(cè)重點(diǎn)有所不同，易錯(cuò)但是各自采用的進(jìn)化策略和側(cè)重點(diǎn)有所不同，易錯(cuò)PCRPCR技術(shù)是技術(shù)是從酶的單一基因

4、出發(fā)，通過改變聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的條件，如改從酶的單一基因出發(fā)，通過改變聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的條件，如改變底物和鎂離子濃度等，在變底物和鎂離子濃度等，在PCRPCR擴(kuò)增過程中，使堿基配對(duì)錯(cuò)誤擴(kuò)增過程中，使堿基配對(duì)錯(cuò)誤而引起基因突變；而引起基因突變；DNADNA重排技術(shù)是從兩條以上的正突變基因出重排技術(shù)是從兩條以上的正突變基因出發(fā)，經(jīng)過酶切和不加引物的發(fā)，經(jīng)過酶切和不加引物的PCRPCR擴(kuò)增，使擴(kuò)增，使DNADNA堿基序列重新排堿基序列重新排布而引

5、起的基因突變；基因家族重排技術(shù)是從基因家族的多個(gè)布而引起的基因突變；基因家族重排技術(shù)是從基因家族的多個(gè)同源基因出發(fā)，經(jīng)過酶切和不加引物的同源基因出發(fā)，經(jīng)過酶切和不加引物的PCRPCR擴(kuò)增等，使擴(kuò)增等，使DNADNA的堿基序列重新排布而引起基因突變。這些隨機(jī)突變方法可以單堿基序列重新排布而引起基因突變。這些隨機(jī)突變方法可以單2.3基因家族重排技術(shù)：又稱為基因家族改組技術(shù)，是從基因家族的若干同源基因出發(fā)，勇酶切割成隨機(jī)片段，經(jīng)過不加引物的多