膽紅素的提取與精制

1、膽紅素的提取精制與應(yīng)用膽紅素的提取精制與應(yīng)用摘要摘要：膽紅索是制藥工業(yè)的貴重原料，可人工工合成牛黃，合成牛黃的膽紅索要求質(zhì)量較高，因此探索膽紅素的提取方法，具有重要的科學(xué)價值和經(jīng)濟利益。改進備膽紅索鈣鹽、酸化、精制等階段，使膽紅索產(chǎn)率和純度都有明顯提高。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞：膽紅素：膽紅素、精制、精制、探索、探索、臨床應(yīng)用、臨床應(yīng)用正文：正文：一、概述膽紅素是人造牛黃的貴重原料，價格昂貴曾達25萬元kg，現(xiàn)在市場價5～6萬元kg，天然牛黃中的膽

2、紅素的含量高達50%～60%。天然牛黃中的膽紅素鈣鹽是膽汁生石的重要原因。據(jù)北大吳瑾光教授的研究發(fā)現(xiàn)人膽石中的膽紅素是和糖蛋白、多糖結(jié)合存在的；有少量的膽紅素用強酸、強堿處理也不被破壞，游離膽紅素在血中濃度過高顯示毒性結(jié)合膽紅素是無毒的。據(jù)藥理實驗證明，游離膽紅素對乙型腦炎病毒的滅活率抑制指數(shù)是去氧膽酸和膽酸的1.0～1.5倍。據(jù)日本崗奇公彥報告，膽紅素被氧化成膽綠素，成為一種有效的肝臟治療藥，他在不破壞肝組織的情況。有增殖新細胞的作用

3、，可用于血清肝炎、肝硬變的治療。膽紅素對W256瘤有較好的抑制作用。另外，膽紅索還有解熱、降壓、促進紅血球新生等作用。我國對膽紅素的需求量很大，人造牛黃已超過100t因此，膽紅素提純方法的探索有重要經(jīng)濟價值。膽紅素的研制開始于1864年，staedeler首先從膽石中分離了膽紅素。1955年我國天津育發(fā)制藥廠郭鞏等人從牛膽汁中提取出膽紅素；1960年武漢肉聯(lián)廠開始用鈣鹽法從豬膽汁中提取膽紅素。20世紀60年代末北京同仁堂中藥提煉廠鄭谷棟

4、教授對提煉方法進行了改進；1988年先后有人提出“快速提取膽紅素新技術(shù)”，“自提膽紅素技術(shù)”等等。膽紅素的提取歸納起來主要有兩條途徑：（1）先用乙醚、乙醇提取后的膽汁剩余物。再用三氯甲烷提取膽紅素；（2）先制備膽紅素鈣鹽，鹽酸酸化，三氯甲烷提取。第（1）種途徑直接用氯仿提取，收得率低，只能達到0.0164～0.0168。因為膽汁中的膽紅素是種極易溶于水的膽紅素結(jié)合物——結(jié)合膽紅素，所以直接氯仿提取不盡合理第（2）種途徑為膽紅素鈣鹽法，其

5、收得率可增加1～2倍，但生產(chǎn)周期長，相應(yīng)成本提高。二、膽紅素提取方法的探索我們對第（2）種方法進行了反復(fù)探索，并作了一些改進，使膽紅素的產(chǎn)率和質(zhì)量明顯提高。1、制備膽紅素鈣鹽取新鮮膽汁，80目過濾，加入4倍澄清石灰水，充分攪拌均勻，然后在攪拌下逐漸加溫，溫度升到50C，停止攪拌，55t到60C撈去白沫，65℃停止撈，繼續(xù)升溫至95℃，撈取膽紅素鈣鹽(拮紅色)。這和傳統(tǒng)方法直接加熱至沸騰撈取膽紅素鈣鹽有明顯不同。（1）石灰水的制備1份生石

6、灰和3O份清水，攪拌均勻，密閉保存24h以上。4、膽紅素臨床上的應(yīng)用應(yīng)用近來的研究表明，膽紅素在人體內(nèi)具有抗氧化作用，能清除自由基，抑制脂類和脂蛋白過氧化，改變某些酶的活性，阻斷DNA分子，減輕氧化損傷，它與人體內(nèi)其它抗氧化防御系統(tǒng)（GSH、SOD、VITE）具有協(xié)同作用。大量研究發(fā)現(xiàn)膽紅素具有明顯抑制低密度脂蛋白的氧化修飾作用，減緩對血管內(nèi)皮的損傷，抑制血栓和泡沫細胞的生成，從而防止和降低動脈粥樣硬化的發(fā)生，膽紅素除本身的抗氧化作用外

7、，膽紅素還能通過抑制蛋白激酶C發(fā)揮細胞保護作用。在一定條件下，膽紅素會生成一種被稱為肝臟生長因子（LGF）的白蛋白膽紅素復(fù)合物，其對肝細胞有再生作用，Ossloa等通過實驗證明，膽紅素能明顯抑制肝臟內(nèi)脂質(zhì)過氧化物的增高，阻止抗氧化酶的降低。因此，膽紅素在人體內(nèi)不僅是一種有害毒素，還是一種內(nèi)源性抗氧化劑，它在體內(nèi)主要通過清除過氧化脂質(zhì)，切斷過氧化脂質(zhì)引起的連鎖反應(yīng)，防止細胞破壞，另外膽紅素還能直接清除氧自由基，于早期階段終止自由基引起的細

8、胞損害，對心、腦、肝臟和血管等多種組織與器官具有重要的生理保護作用。由于膽紅素在體內(nèi)具有傷害與保護的雙重作用，這對我們檢驗工作者就提出了新的標準，要求我們采用最佳方法，準確定量分析膽紅素的高低值，及時反饋給臨床最新信息。近一個世紀來，臨床一直把血中高膽紅素濃度作為判斷肝膽疾病的重要指標。自從1994年Schwertner等發(fā)現(xiàn)低膽紅素濃度可能是冠心病的新的危險因子以來，許多學(xué)者作了大量有關(guān)膽紅素的研究，并隨著膽紅素檢測方法的特異性、準確

9、性的提高，膽紅素與臨床疾病的關(guān)系越來越受到臨床的重視。膽紅素與冠心病近年研究表明，膽紅素具有抗氧化作用，體外實驗證明，其抗氧化性甚至超過維生素C、維生素E等。越來越多的研究表明，低濃度膽紅素可能是冠心病新的危險因子，Schwertner等通過研究指出，冠狀動脈疾病患者由于體內(nèi)氧化活性的提高，使膽紅素的消耗量增加，從而導(dǎo)致體內(nèi)膽紅素濃度降低，此發(fā)現(xiàn)在后來的缺血性心臟病的研究中得到了證實。另外吸煙會降低膽紅素的濃度，增加脂蛋白的濃度，從而增

10、加患冠心病的機率。Hulea等報道，血清中生理濃度下的直接和間接膽紅素能有效地抑制金屬離子（如Cu2Fe2）催化的低密度脂蛋白修飾反應(yīng)，而膽紅素的這種抗低密度脂蛋白氧化修飾正是其防止動脈粥樣硬化和降低冠心病危險性的主要機制所在。有研究發(fā)現(xiàn)，當膽紅素濃度下降50%，發(fā)生動脈病變的危險性就增加47%。另有報道，冠心病患者體內(nèi)膽紅素濃度不一定持續(xù)低于正常對照者，當冠心病急性心肌梗死時其血清膽紅素濃度不但不降低反而可能會升高，因為此時伴隨著血紅

11、蛋白、肌紅蛋白分解或心功能不全而引起膽紅素濃度升高。膽紅素與腦血管疾病腦出血是常見的腦血管疾病，腦出血后大量紅細胞破壞，破壞的紅細胞釋放出血紅蛋白，并很快生成膽紅素，那么腦出血后血清膽紅素濃度升高是否是由于顱腦內(nèi)紅細胞破壞釋放出血紅蛋白而導(dǎo)致血清膽紅素濃度增高？Dohi等認為腦出血和蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期血清膽紅素濃度顯著升高，說明氧化應(yīng)激存在，可認為是機體對疾病的一種保護性反應(yīng)，并認為血清膽紅素濃度可以作為出血性中風(fēng)后一個有用的氧化應(yīng)激