瘧原蟲(chóng)鏡檢

1、瘧原蟲(chóng)鏡檢,陳國(guó)英湖北省疾病預(yù)防控制中心2019.5.2,一、概 述 (1),瘧疾廣泛流行于熱帶、亞熱帶及溫帶邊緣地區(qū)，是重要的蟲(chóng)媒傳染病。寄生于人體的瘧原蟲(chóng)有4種，即間日瘧原蟲(chóng)、惡性瘧原蟲(chóng)、三日瘧原蟲(chóng)和卵形瘧原蟲(chóng)。我國(guó)常見(jiàn)的為間日瘧原蟲(chóng)和惡性瘧原蟲(chóng)，分別引起間日瘧和惡性瘧 。,一、概 述(2),瘧疾的傳播媒介是按蚊，人是瘧原蟲(chóng)的中間宿主。瘧原蟲(chóng)寄生于人體的肝細(xì)胞和血液的紅細(xì)胞內(nèi)，前者稱紅細(xì)胞外期，后者為紅細(xì)胞內(nèi)期。

2、瘧疾發(fā)作的臨床癥狀是由紅細(xì)胞內(nèi)期引起的。末梢血液中查到瘧原蟲(chóng)是瘧疾診斷的三條標(biāo)準(zhǔn)之一。,二、瘧原蟲(chóng)在人體內(nèi)的生活史,瘧原蟲(chóng)生活史分為按蚊體內(nèi)的有性生殖和人體內(nèi)的無(wú)性生殖兩大部分，這里只將人體內(nèi)生活史作一簡(jiǎn)要介紹。,紅細(xì)胞外期 1,瘧原蟲(chóng)通過(guò)按蚊吸血進(jìn)入蚊體內(nèi)，經(jīng)一段時(shí)間發(fā)育成熟后，成為具有感染性的按蚊，若再次叮人時(shí)即將其唾液腺中的子孢子注入人體，經(jīng)血液循環(huán)進(jìn)入肝細(xì)胞內(nèi)繁殖。,紅細(xì)胞外期 2,間日瘧原蟲(chóng)的子孢子分為速發(fā)型和遲發(fā)型兩種。速發(fā)

3、型子孢子進(jìn)入肝細(xì)胞后迅速生長(zhǎng)發(fā)育，進(jìn)行裂體增殖，成熟后將肝細(xì)胞脹破，完成紅細(xì)胞外期的發(fā)育。每個(gè)受感染的肝細(xì)胞，含有數(shù)以千計(jì)的裂殖子，其釋放進(jìn)入血液后一部份被吞噬細(xì)胞消滅，一部份侵入紅細(xì)胞內(nèi)寄生。,紅細(xì)胞外期 3,間日瘧原蟲(chóng)完成紅細(xì)胞外期發(fā)育所需的時(shí)間約為8天，惡性瘧原蟲(chóng)約為6天，三日瘧原蟲(chóng)約為11天，卵形瘧原蟲(chóng)約為9天。在此階段的血液中沒(méi)有瘧原蟲(chóng)，受染者亦無(wú)臨床癥狀。遲發(fā)型子孢子需經(jīng)過(guò)一段或長(zhǎng)或短的休眠期后再分批完成紅外期發(fā)育，成為瘧

4、疾復(fù)發(fā)的根源。紅外期瘧原蟲(chóng)的發(fā)育只有一代，并不反復(fù)循環(huán)。惡性瘧原蟲(chóng)無(wú)遲發(fā)型子孢子，所以沒(méi)有真正的復(fù)發(fā)。,紅細(xì)胞內(nèi)期 1,從肝細(xì)胞中釋放的裂殖子，進(jìn)入血液循環(huán)后很快侵入紅細(xì)胞內(nèi)形成環(huán)狀體，又稱早期滋養(yǎng)體。它們?cè)诩t細(xì)胞內(nèi)攝取血紅蛋白等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行裂體增殖，最后發(fā)育為成熟裂殖體，內(nèi)含一定數(shù)量裂殖子。當(dāng)它脹破紅細(xì)胞后，裂殖子釋放至血液內(nèi)，使感染者出現(xiàn)臨床癥狀。進(jìn)入血液中的裂殖子，一部份侵入正常紅細(xì)胞，進(jìn)行又一個(gè)周期的裂體增殖，一部份裂殖子被吞噬

5、細(xì)胞吞噬。,紅細(xì)胞內(nèi)期 2,瘧原蟲(chóng)在紅細(xì)胞內(nèi)完成一個(gè)裂體增殖周期所需的時(shí)間因蟲(chóng)種而不同，間日瘧原蟲(chóng)、惡性瘧原蟲(chóng)和卵形瘧原蟲(chóng)約為48小時(shí)，三日瘧原蟲(chóng)約為72小時(shí)。經(jīng)過(guò)一代或幾代裂體增殖后，有一部份裂殖子侵入紅細(xì)胞后不再進(jìn)行分裂，而逐漸發(fā)育長(zhǎng)大成為配子體。,紅細(xì)胞內(nèi)期 3,瘧原蟲(chóng)在人體內(nèi)持續(xù)存活的時(shí)間以惡性瘧原蟲(chóng)最短，約為1年；間日瘧原蟲(chóng)和卵形瘧原蟲(chóng)為1-3年；三日瘧原蟲(chóng)最長(zhǎng)，為3-5年，甚至可終身帶蟲(chóng)。由瘧原蟲(chóng)侵入到出現(xiàn)臨床癥狀的這段時(shí)間

6、稱為潛伏期，其時(shí)間長(zhǎng)短與入侵人體瘧原蟲(chóng)的種類、蟲(chóng)株、原蟲(chóng)的數(shù)量及人體的抵抗力有關(guān)。惡性瘧的潛伏期為7-27天，平均11天；三日瘧通常為18-35天，平均28天；,紅細(xì)胞內(nèi)期 4,間日瘧則有長(zhǎng)潛伏期與短潛伏期兩種，短者11-25天，平均14天；長(zhǎng)者6-9個(gè)月，最長(zhǎng)者可達(dá)15個(gè)月。瘧原蟲(chóng)在紅細(xì)胞內(nèi)按照生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖的階段不同而分為滋養(yǎng)體、裂殖體和配子體3個(gè)時(shí)期或階段，各期瘧原蟲(chóng)的形態(tài)變化很大。,瘧原蟲(chóng)的基本結(jié)構(gòu)㈠ 核 即細(xì)胞核或染

7、色質(zhì)粒。在正常情況下核呈鮮紅色，呈圓形或不規(guī)則的顆粒狀。核的結(jié)構(gòu)致密，只有在個(gè)別發(fā)育階段較為疏松，例如間日瘧原蟲(chóng)雄配子體的核。有時(shí)因胞漿厚密或染色深藍(lán)，使核呈暗紅或紫紅色。,三、瘧原蟲(chóng)形態(tài)特征,三、瘧原蟲(chóng)形態(tài)特征,㈡ 細(xì)胞漿 被染成蔚藍(lán)色或深藍(lán)色，隨著蟲(chóng)體發(fā)育長(zhǎng)大，細(xì)胞漿逐漸增多。間日瘧原蟲(chóng)發(fā)育到大滋養(yǎng)體階段，胞漿呈阿米巴樣活動(dòng)，胞漿內(nèi)有空泡。三日瘧原蟲(chóng)阿米巴活動(dòng)不顯著。,三、瘧原蟲(chóng)形態(tài)特征,㈢ 瘧色素 顏色和顆粒的形狀，因

8、瘧原蟲(chóng)種類而異。間日瘧原蟲(chóng)的色素顆粒呈短棒狀，黃褐色；惡性瘧原蟲(chóng)的色素顆粒呈細(xì)砂狀，黑褐色；三日瘧原蟲(chóng)的色素呈砂粒狀，深褐色；卵形瘧原蟲(chóng)的色素與間日瘧原蟲(chóng)相似。瘧色素在蟲(chóng)體內(nèi)散在分布或聚集成團(tuán)塊。,三、瘧原蟲(chóng)形態(tài)特征,㈣ 被寄生的紅細(xì)胞 被間日瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞脹大、顏色變淡。瘧原蟲(chóng)發(fā)育至阿米巴樣體，紅細(xì)胞出現(xiàn)薛氏點(diǎn)(Schuffner's dots)。 被惡性瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞大小正?；蛏晕⒖s小，紅細(xì)胞上有時(shí)見(jiàn)到茂氏點(diǎn)(

9、Maurer's dots)。 被三日瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞大小正常，紅細(xì)胞上可見(jiàn)到齊氏點(diǎn)(Ziemann's dots)。被卵形瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞稍脹大或不脹大，呈卵形或一端呈鋸齒（傘矢）狀，薛氏點(diǎn)出現(xiàn)較早，于環(huán)狀體階段便可查見(jiàn)。,四、紅細(xì)胞內(nèi)期的瘧原蟲(chóng)分期1,滋養(yǎng)體 滋養(yǎng)體有早期與晚期之分。早期滋養(yǎng)體因外形呈環(huán)狀而又稱環(huán)狀體。以后蟲(chóng)體長(zhǎng)大，胞漿增多，時(shí)有偽足伸出，并在胞漿中出現(xiàn)空泡和瘧色素，此時(shí)稱為晚期滋養(yǎng)體。,四、紅

10、細(xì)胞內(nèi)期的瘧原蟲(chóng)分期2,裂殖體 晚期滋養(yǎng)體發(fā)育成熟（間日瘧原蟲(chóng)約經(jīng)40小時(shí)）后核開(kāi)始分裂稱為早期裂殖體，以后核經(jīng)反復(fù)分裂，最后胞漿亦隨之分裂，分別包裹在每個(gè)核的周邊，形成一個(gè)個(gè)的裂殖子，此期稱為成熟裂殖體。其體內(nèi)除有數(shù)量不等的裂殖子外，尚有集聚成塊狀的瘧色素。,四、紅細(xì)胞內(nèi)期的瘧原蟲(chóng)分期3,配子體 瘧原蟲(chóng)經(jīng)過(guò)一次或數(shù)次裂體增殖 后，部分裂殖子侵入紅細(xì)胞中發(fā)育長(zhǎng)大， 其核增大而不再分裂，胞漿不斷增多而無(wú) 偽足和空泡，最

11、后發(fā)育成為圓形，卵圓形或 臘腸形、新月形配子體。,薄血膜上瘧原蟲(chóng)的形態(tài)特征,瘧原蟲(chóng)均寄生于紅細(xì)胞內(nèi)，其基本結(jié)構(gòu)為細(xì)胞核、細(xì)胞漿和細(xì)胞膜。環(huán)狀體以后各期還有血紅蛋白消化分解后的產(chǎn)物瘧色素。各種瘧原蟲(chóng)除瘧色素以外均無(wú)色，血片制后需經(jīng)染色才能識(shí)別。 染色后的瘧原蟲(chóng)細(xì)胞核呈紅色或淡紫紅色，細(xì)胞質(zhì)呈藍(lán)色或淡藍(lán)色，瘧色素呈褐黃色或黑褐色。涂制好的薄血膜，紅細(xì)胞應(yīng)平鋪在血片上，互不重疊。由于薄血膜干燥迅速，瘧原蟲(chóng)很快被固定，所以形態(tài)典型活躍。,薄

12、血膜中常見(jiàn)的血液成分,中性白細(xì)胞,酸性球,血小板,大單核球,紅血球,淋巴球,薄血膜中被瘧原蟲(chóng)寄生紅血球形態(tài)特征,間日瘧原蟲(chóng)被寄生紅細(xì)胞脹大色淺，薛氏點(diǎn)鮮紅色，細(xì)小，數(shù)多,惡性瘧原蟲(chóng)被寄生紅細(xì)胞大小正常，色稍紫；茂氏點(diǎn)紫紅色，粗大，數(shù)少,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間日瘧 環(huán)狀體紅血球：正常。大?。?較大，約為紅 細(xì)胞直徑1/3。胞漿：環(huán)狀，淺藍(lán)色。核： 紅色，一個(gè)， 偶有二個(gè)。色素： 沒(méi)有。,薄血膜瘧

13、原蟲(chóng)形態(tài),惡性瘧 環(huán)狀體紅血球：大小正常,顏色較深。大小： 較小，約為紅細(xì)胞 直徑1/5~1/6。胞漿： 蘭色，環(huán)狀纖細(xì)， 有時(shí)位于紅細(xì)胞的 邊緣。常見(jiàn)多個(gè)同 寄生一紅細(xì)胞現(xiàn)象。核： 紅色一個(gè),常有二個(gè)。色素： 沒(méi)有。,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),惡性瘧環(huán)狀體,薄血膜中小滋養(yǎng)體形態(tài)特征,間日瘧原蟲(chóng)小滋養(yǎng)體約為紅細(xì)胞直徑的

14、1／3；環(huán)較粗大；核1個(gè)；2個(gè)核和一個(gè)紅細(xì)胞寄生2個(gè)環(huán)狀體，不如惡性瘧原蟲(chóng)多見(jiàn),惡性瘧原蟲(chóng)小滋養(yǎng)體約為紅細(xì)胞的 1/6；環(huán)纖細(xì)；核1~2個(gè)；一個(gè)紅細(xì)胞寄生2個(gè)環(huán)狀體的常見(jiàn),薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間日瘧大滋養(yǎng)體紅細(xì)胞：脹大褪色，出現(xiàn)形狀大小相等，分布均勻，數(shù)目較多，鮮紅色薛氏小點(diǎn)。大?。狠^大。胞漿：不規(guī)則，淺蘭色，出現(xiàn)阿米巴偽足，有空泡。核：紅色，一個(gè)。色素：有，細(xì)小桿狀，黃葛色，分布不均勻。,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間 日 瘧

15、 大 滋 養(yǎng) 體,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),惡性瘧大滋養(yǎng)體紅細(xì)胞：大小正常，顏色較深，可出現(xiàn)較粗、大小不一、分布不勻、數(shù)目較少紅色茂氏小點(diǎn)。大?。狠^小。胞漿：蘭色，圓形，堅(jiān)實(shí)，體積小。核：一個(gè)，紅色。色素：較細(xì)的黑褐色顆粒，常集成塊。,薄血膜中大滋養(yǎng)體形態(tài)特征,間日瘧原蟲(chóng)大滋養(yǎng)體蟲(chóng)體不規(guī)則，較大；阿米巴樣空泡明顯；瘧色素細(xì)小，黃褐色,惡性瘧原蟲(chóng)大滋養(yǎng)體體小，圓形；空泡小；早期瘧色素細(xì)小，金黃色，晚期結(jié)成塊狀，黑褐色

16、,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間日瘧未成熟裂殖體紅細(xì)胞：脹大，褪色，可有薛氏小點(diǎn)。胞漿：較不規(guī)則，空泡小或消失，蘭色。核： 紅色，分裂為二個(gè)以上。色素：黃褐色，分布不均勻。,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間 日 瘧 未 成 熟 裂 殖 體,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),惡性瘧未成熟裂殖體紅細(xì)胞：大小正常，顏色較深，可有茂氏小點(diǎn)。大?。?較小。胞漿： 規(guī)則，圓形或卵圓形，蘭色。核： 分裂為二個(gè)以上，紅色

17、。色素： 黃褐色顆粒，常集成黑褐團(tuán)塊。,薄血膜中裂殖體前期形態(tài)特征,間日瘧原蟲(chóng)裂殖體前期圓形或不規(guī)則；核分裂為2個(gè)以上，空泡消失；瘧色素分布不勻,惡性瘧原蟲(chóng)裂殖體前期圓形，核分裂為2個(gè)以上；瘧色素集成團(tuán)快,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間日瘧成熟裂殖體紅細(xì)胞：脹大，褪色，可見(jiàn)薛氏小點(diǎn)。大?。?個(gè)體較大。胞漿和核：裂殖子12~24個(gè)平均16個(gè)，排列不規(guī)則，核紅色，胞漿淺蘭色。色素： 黃褐色常集于瘧原蟲(chóng)的一邊。,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),

18、惡性瘧成熟裂殖體紅細(xì)胞： 大小正常，顏色較深，可見(jiàn)茂氏小點(diǎn)。大?。?蟲(chóng)體較小。胞漿和核：裂殖子8~36個(gè)平均18~24個(gè)，排列 不規(guī)則或呈二重排 列，核紅色胞漿蘭色。色素： 黑褐色，集中于中央或一側(cè)。,薄血膜中成熟裂殖體形態(tài)特征,間日瘧原蟲(chóng)裂殖體大于正常紅細(xì)胞；裂殖子12~24個(gè)，通常16個(gè)，排列不規(guī)則；瘧色素常集于一側(cè)，黃褐色,惡性瘧原蟲(chóng)裂殖體小于正常紅細(xì)胞；裂殖子較小，8~26個(gè)，排列不規(guī)則；瘧

19、色素成團(tuán)快狀，黑褐色,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間日瘧大（雌）配子體形狀大?。簣A或橢圓，較大。胞漿： 深蘭色。核： 一個(gè)，較小，深紅色常偏于一邊，核周可見(jiàn)明顯不染色帶。色素： 黃褐色，均勻散在，數(shù)目較多。,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間日瘧?。ㄐ郏┡渥芋w 形狀大小：圓形，蟲(chóng)體較大。胞漿： 淺蘭色。核： 一個(gè)，較大，疏松位于中央，淺紅色，周圍有明顯不著色帶。色素： 黃褐色，散在分布。,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),惡性瘧 大雌）配

20、子體形狀大小：新月形，兩端 稍尖。胞漿： 深蘭色。核： 一個(gè)，較小，致 密，深紅色位于中央， 核周可見(jiàn)透明不染色帶。色素：黑褐色，密布于核的周圍,薄血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),惡性瘧：?。ㄐ郏┡渥芋w形狀大?。号D腸形，兩端鈍圓。胞漿： 淺蘭色或淡紫紅色。核： 一個(gè)，較大，疏松，位于中央，淺紅色，核周可見(jiàn)不染色帶。色素： 黑褐色，疏松地分布于核周圍。,薄血膜中大（雌）配子體形態(tài)特征,間日瘧原蟲(chóng)雌配子體

21、小于正常紅細(xì)胞，圓形；核小，致密，深紅色，偏于一側(cè)，胞漿深藍(lán)色；瘧色素散在,惡性瘧原蟲(chóng)雌配子體新月型，兩端較尖；核小，致密，深紅色，位于中央；胞漿深藍(lán)色；瘧色素塊圍于核周,薄血膜中小（雄）配子體形態(tài)特征,間日瘧原蟲(chóng)雄配子體大于正常紅細(xì)胞，圓形；核大，疏松，淺紅色，多位于中央；胞漿淺藍(lán)色或淡紅色；瘧色素散在,惡性瘧原蟲(chóng)雄配子體臘腸形，兩端鈍圓；核大，疏松，淡紅色，位于中央；胞漿淺藍(lán)色或淺紅色；瘧色素圍于核周,大配子體與大滋養(yǎng)體區(qū)別,

22、蟲(chóng)體大小:幾乎充滿被寄生的紅細(xì)胞核:一個(gè)，較大且致密，周圍有一圈空白的不染色帶胞漿:邊緣清楚，不含空泡瘧色素:顆粒較多較粗，均勻散在,蟲(chóng)體大小:不超過(guò)被寄生紅細(xì)胞的3/4核:一個(gè)，延長(zhǎng)呈帶狀，周圍無(wú)明顯的不染色帶漿:邊緣不整齊，多有空泡瘧色素:顆粒較少較細(xì)，分布不均勻,三日瘧原蟲(chóng),1）滋養(yǎng)體 小滋養(yǎng)體略小于間日瘧的小滋養(yǎng)體，核較大，胞漿較粗厚，有時(shí)可見(jiàn)色素。大滋養(yǎng)體常呈帶狀，極少呈圓形，核常呈條狀，胞漿結(jié)實(shí)，一般不含空泡，

23、色素顆粒粗大，深褐色，常沿邊緣分布。 被三日瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞大小正常或略有縮小、顏色正常。偶見(jiàn)淡紫紅色微細(xì)的齊氏點(diǎn)，其數(shù)量少于薛氏點(diǎn)而多于茂氏點(diǎn)。,三日瘧原蟲(chóng),裂殖體 未成熟裂殖體核分裂成2個(gè)以上，胞漿也分裂，色素漸趨集中， 分布不勻。成熟裂殖體小于正常紅細(xì)胞，含裂殖子6～12個(gè)，常為8個(gè)，形成菊花狀，色素常集中于中央。裂殖子比間日瘧原蟲(chóng)裂殖子大。,三日瘧原蟲(chóng),配子體 形態(tài)與間日原蟲(chóng)的配子體相似，但蟲(chóng)體小于正常紅細(xì)胞，色素

24、顆粒粗大。,卵形瘧原蟲(chóng),滋養(yǎng)體 小滋養(yǎng)體與三日瘧小滋養(yǎng)體相似，核較大，胞漿較粗厚。大滋養(yǎng)體結(jié)實(shí)，空泡不顯著，常呈圓形，極少呈帶狀，色素棕黃色，顆粒粗大。 被卵形瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞，大小正?；蛏悦洿?，褪色，部分紅細(xì)胞變?yōu)槁研位蜻吘壪駛氵吘壍氖笭?，可?jiàn)較多的薛氏點(diǎn)，且比間日瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞出現(xiàn)早，于小滋養(yǎng)體階段已可見(jiàn)到，斑點(diǎn)也稍粗大。,卵形瘧原蟲(chóng),裂殖體 與三日瘧原蟲(chóng)的裂殖體相似，圓而結(jié)實(shí)，約占紅細(xì)胞的3/4， 一般不超過(guò)正常紅細(xì)胞大

25、小。成熟裂殖體含裂殖子6～12個(gè)，常為8個(gè)，一般排列不規(guī)則。裂殖子比常見(jiàn)三種瘧原蟲(chóng)的裂殖子大。,卵形瘧原蟲(chóng),配子體：亦與三日瘧原蟲(chóng)的配子體相似，一般不超過(guò)正常紅細(xì)胞的大小,,四種瘧原蟲(chóng)的小滋養(yǎng)體,四種瘧原蟲(chóng)的小、大滋養(yǎng)體,四種瘧原蟲(chóng)未成熟、成熟裂殖體,四種瘧原蟲(chóng)小配子體、大配子體,間日瘧原蟲(chóng),被寄生細(xì)胞明顯膨大，褪色,大滋養(yǎng)體呈阿米巴樣（阿米巴樣體）,蟲(chóng)體胞漿內(nèi)空泡明顯,色素顆粒短桿狀，較細(xì)，黃褐色,薛氏點(diǎn)細(xì)小，數(shù)多,,,,,,惡性瘧

26、原蟲(chóng),,,被寄生紅細(xì)胞形態(tài)正常,核紅色，一個(gè)或多個(gè)。,茂氏點(diǎn)紅色、粗大、明顯數(shù)少,環(huán)狀體細(xì)胞漿淡藍(lán)色，較纖細(xì)。,環(huán)狀體有時(shí)貼于紅細(xì)胞邊緣，多重感染較常見(jiàn),,,,,,三日瘧原蟲(chóng),卵形瘧原蟲(chóng),五、厚血膜中瘧原蟲(chóng)的形態(tài)特征1,厚血膜的優(yōu)點(diǎn)是能夠提高瘧原蟲(chóng)的檢出率，厚血膜上原蟲(chóng)集中，檢出率比薄血膜高出十幾倍甚至數(shù)十倍，尤其是在輕度感染的情況下。但是，厚血膜的鏡檢亦受到很多因素的影響：厚血膜層次多、背景深、透光差，蟲(chóng)體收縮，瘧原蟲(chóng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)遠(yuǎn)不

27、如薄血膜上清晰典型；,五、厚血膜中瘧原蟲(chóng)的形態(tài)特征2,厚血膜中紅細(xì)胞重疊和橫豎交替，使瘧原蟲(chóng)體態(tài)各不相同，并且還會(huì)出現(xiàn)折皺疊加的現(xiàn)象；血片制作、染色過(guò)程中亦會(huì)使原蟲(chóng)皺縮變形和腐蝕破損，厚血膜中原蟲(chóng)的形態(tài)與薄血膜相比，差異很大，識(shí)別較難；染色過(guò)程中血紅蛋白溶解，紅細(xì)胞消失而不能像薄血膜那樣可以借助紅細(xì)胞特有的改變和瘧原蟲(chóng)在紅細(xì)胞內(nèi)的特點(diǎn)進(jìn)行識(shí)別；厚血膜上還常混雜一些與原蟲(chóng)較易混淆的染液殘?jiān)?、血小板和血?xì)胞碎片，更增加了鑒別的困難。,五、厚

28、血膜中瘧原蟲(chóng)的形態(tài)特征3,但是我們可以根據(jù)瘧原蟲(chóng)特有的三個(gè)基本要素即紅色細(xì)胞核、藍(lán)色細(xì)胞漿和棕褐色或黑褐色的瘧色素，和其組成的形態(tài)特征與動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)，以及還可能出現(xiàn)的紅色薛氏或茂氏小點(diǎn)和紅細(xì)胞的紅色陰影等方面去認(rèn)真觀察分析，反復(fù)操練，還是可以逐漸識(shí)別和逐步掌握的。,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),⑴ 小滋養(yǎng)體：呈環(huán)狀或因空泡消失而變成各種形狀，形狀的改變因胞漿向核的一側(cè)，或同時(shí)向二側(cè)收縮，或圍住核，鏡檢是常見(jiàn)“!”、“，”、“飛鳥(niǎo)”、“Ｖ”形和“鳥(niǎo)眼”

29、等。,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間日瘧原蟲(chóng)小滋養(yǎng)體的蟲(chóng)體大于惡性瘧原蟲(chóng)小滋養(yǎng)體，核較大，胞漿較厚，常呈“!”或“，”等。常伴有各個(gè)發(fā)育階段的瘧原蟲(chóng)。,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),三日瘧原蟲(chóng)小滋養(yǎng)體大于惡性瘧原蟲(chóng)小滋養(yǎng)體而略小于間日瘧原蟲(chóng)的小滋養(yǎng)體。核較大，胞漿較粗厚，常呈“，”或“鳥(niǎo)眼”等。有時(shí)可見(jiàn)色素。,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),如果血膜上只有少數(shù)環(huán)狀體，其形態(tài)又不太典型，則應(yīng)另外取血檢查，不應(yīng)輕易下結(jié)論。,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),⑵ 大滋養(yǎng)體：間日瘧原蟲(chóng)大滋養(yǎng)體

30、運(yùn)動(dòng)活潑，空泡大，形態(tài)變化也較大，而惡性瘧原蟲(chóng)和三日瘧原蟲(chóng)大滋養(yǎng)體僅有輕微運(yùn)動(dòng)，空泡小，形態(tài)變化也較小,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),間日瘧原蟲(chóng)大滋養(yǎng)體呈阿米巴樣或縮成各種形狀，常見(jiàn)有些原蟲(chóng)的胞漿為圓形，核和色素均被包在中間，著色很深，只能看到深藍(lán)色的胞漿和黃褐色的色素折光，核模糊不清，或僅于調(diào)節(jié)顯微鏡的亮光時(shí)，才隱約可見(jiàn)。有些胞漿皺縮斷裂成幾個(gè)團(tuán)塊，大小不一，互不連接，核位于胞漿之中或外邊，色素分布不勻。有些則僅見(jiàn)胞漿和色素而核看不清楚。,厚血膜

31、瘧原蟲(chóng)形態(tài),三日瘧原蟲(chóng)大滋養(yǎng)體常呈圓形或卵形，有時(shí)可見(jiàn)呈帶狀。由于它的胞漿結(jié)實(shí)，色素顆粒粗大，深褐色，數(shù)量較多，以致整個(gè)原蟲(chóng)呈黃綠色，核不太清楚,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),惡性瘧原蟲(chóng)大滋養(yǎng)體常呈圓形，蟲(chóng)體較小而結(jié)實(shí)，色素細(xì)小，金黃色，結(jié)成團(tuán)塊后，呈黑褐色。,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),⑶ 裂殖體：三種瘧原蟲(chóng)的未成熟裂殖體和成熟裂殖體，除蟲(chóng)體略微縮小而著色較深外，幾乎與薄血膜上的形態(tài)一樣。間日瘧原蟲(chóng)裂殖體較大，而惡性瘧原蟲(chóng)和三日瘧原蟲(chóng)的裂殖體均較小。三日

32、瘧原蟲(chóng)的裂殖子較大，間日瘧原蟲(chóng)的裂殖子次之，惡性瘧原蟲(chóng)的裂殖子較小。,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),⑷ 配子體：間日瘧原蟲(chóng)和三日瘧原蟲(chóng)的配子體相似，均呈圓形，但前者的蟲(chóng)體比后者大。間日瘧原蟲(chóng)雄配子體核大，圓形或星狀，胞漿較少，著色淡，色素粗大，數(shù)量較多。間日瘧原蟲(chóng)的雌配子體與成熟大滋養(yǎng)體相似，但配子體的色素顆粒粗大，多而分散，有沿邊分布的現(xiàn)象。惡性瘧原蟲(chóng)的配子體呈新月形或臘腸形，常見(jiàn)其邊緣上附著一小塊皺縮的紅細(xì)胞膜，有時(shí)可見(jiàn)縮成圓形，核位于中央，

33、色素散在于核周圍，其外為一圈胞漿，還可見(jiàn)配子體的胞漿部分或全部消失，只留下核和色素，或核和胞漿均消失，只留下色素。,厚血膜瘧原蟲(chóng)形態(tài),⑸ 被瘧原蟲(chóng)寄生的紅細(xì)胞：厚血膜染色后，紅細(xì)胞的血紅蛋白溶解，其輪廓消失，但斑點(diǎn)卻十分清楚。有時(shí)尚殘留紅細(xì)胞的模糊痕跡，血膜邊緣部分較薄，更易查見(jiàn)。,厚血膜中常見(jiàn)的血液成分,中性球,酸性球,中性球,大單核球,淋巴球,血小板,厚血膜中瘧原蟲(chóng)的形態(tài),厚血膜由于用血量較多，涂制的血膜小，紅細(xì)胞重疊且干燥慢，致

34、使蟲(chóng)體皺縮，空泡消失，胞漿變形，其形態(tài)改變的程度與瘧原蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)的強(qiáng)弱、空泡有無(wú)和大小有關(guān)。各期瘧原蟲(chóng)在發(fā)育中，大小滋養(yǎng)體明顯的阿米巴樣運(yùn)動(dòng)，其他期僅有輕微運(yùn)動(dòng)；大、小滋養(yǎng)體含明顯空泡，裂殖前期的空泡不明顯或消失，成熟裂殖體和配子體均無(wú)空泡。,厚血膜小滋養(yǎng)體形態(tài),小滋養(yǎng)體 胞漿呈環(huán)狀或向核的一側(cè)或兩側(cè)收縮，使環(huán)的中間斷裂，或圍繞核。間日瘧原蟲(chóng)的環(huán)較大，常呈分號(hào)“；”和感嘆號(hào)“！”狀；而惡性瘧原蟲(chóng)的環(huán)纖細(xì)，常呈分號(hào)“：”、飛鳥(niǎo)“⌒.⌒”、V

35、狀和斷環(huán)狀。,間日瘧小滋養(yǎng)體,惡性瘧小滋養(yǎng)體,厚血膜惡性瘧小滋養(yǎng)體,惡性瘧環(huán)狀體在發(fā)育不同階段，其個(gè)體大小有很大變化。注意粗環(huán)與間日瘧環(huán)狀體的區(qū)別。,厚血膜間日瘧大滋養(yǎng)體 形態(tài),間日瘧大滋養(yǎng)體呈阿米巴樣運(yùn)動(dòng)，胞漿常斷裂幾塊或縮成圓形，核和瘧色素均被包在胞漿之中，著色深，只隱約可見(jiàn)紅色的核和黃綠色的瘧色素。胞漿可皺縮斷裂成幾個(gè)塊狀，大小不一，似互不連接。核位于胞漿之中或外邊。瘧色素分布不均勻。有些僅見(jiàn)胞漿和瘧色素而核看不清楚。,大滋養(yǎng)體,

36、厚血膜惡性瘧大滋養(yǎng)體形態(tài),惡性瘧原蟲(chóng)大滋養(yǎng)體，與薄血膜形態(tài)相似，常呈圓形，體小結(jié)實(shí)，瘧色素細(xì)小，金黃色，結(jié)成塊狀后，呈黑褐色。,大滋養(yǎng)體,厚血膜裂殖體 形態(tài),裂殖體 間日瘧原蟲(chóng)、惡性瘧原蟲(chóng)的裂殖體前期及成熟殖體，除蟲(chóng)體略為縮小著色較深外，均與薄血膜相似。,間日瘧裂殖體,惡性瘧裂殖體,厚血膜間日瘧配子體形態(tài),間日瘧原蟲(chóng)的配子體呈圓形或卵圓形，除蟲(chóng)體略縮小且著色深外，均與薄血膜相似。間日瘧雄配子體，核大，疏松，圓形或呈星狀，胞漿較少，著色

37、淡，瘧色素顆粒大，數(shù)量較多，散在分布。雌配子體與圓形成熟的大滋養(yǎng)體相似，但配子體瘧色素顆粒粗大，多而散在分布。,大配子體,小配子體,厚血膜惡性瘧配子體形態(tài),惡性瘧原蟲(chóng)的配子體呈新月形或臘腸形，如血膜干燥較慢，則可縮成圓形，核居中，瘧色素圍在核周，外圍一圈胞漿。此外，還可見(jiàn)配子體的胞漿部分或全部消失，只留下核和瘧色素，或核和胞漿均消失，只留下一些瘧色素。,大配子體,小配子體,厚血膜紅細(xì)胞形態(tài),寄生的紅細(xì)胞 經(jīng)染色后，因細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白溶解

38、，輪廓消失，但有時(shí)尚留下殘骸的“影子”或點(diǎn)彩。,厚血膜上可見(jiàn) 到的某些雜質(zhì),在厚血膜上有時(shí)可見(jiàn)到一些類似瘧原蟲(chóng)的物質(zhì)，要根據(jù)瘧原蟲(chóng)的三個(gè)基本要素仔細(xì)加以鑒別。,同其他物體的鑒別,厚血膜可因染液的酸鹼度影響，只見(jiàn)到小滋養(yǎng)體的核而不見(jiàn)胞漿；只見(jiàn)到瘧色素而無(wú)其他結(jié)構(gòu)；或者只見(jiàn)胞漿斷裂的殘塊。這樣，它與涂片和染色過(guò)程中所沾污的雜質(zhì)包括來(lái)自空氣的灰塵、真菌、孢子，來(lái)自取血時(shí)沾污的污垢、細(xì)菌、染料殘?jiān)?，白?xì)胞分裂后散出的顆粒、碎片，網(wǎng)狀紅細(xì)胞的

39、殘骸等，皆易混淆，要謹(jǐn)慎鑒別。,1．疑似瘧色素 血膜上的染料殘?jiān)盎覊m，有時(shí)可誤為瘧色素，此時(shí)可依據(jù)其顆粒大小，色澤及分布范圍加以區(qū)別。轉(zhuǎn)動(dòng)微螺旋時(shí)，可見(jiàn)它浮于紅細(xì)胞之上，與原蟲(chóng)不在一個(gè)平面上。,此外下面幾種情況，容易誤為瘧原蟲(chóng)，應(yīng)注意鑒別,2．疑似瘧原蟲(chóng)核 細(xì)菌尤其是球菌或白細(xì)胞破裂后散出的顆粒，皆為紅色小點(diǎn)，與瘧原蟲(chóng)的核相似，最易混淆。但球菌形體較大，邊緣光滑，常見(jiàn)許多個(gè)聚集一處，分布較廣。中性和酸性白細(xì)胞的顆粒，著色較淡，邊緣

40、整齊，附近常有白細(xì)胞的碎屑。,3. 疑似瘧原蟲(chóng)胞漿 網(wǎng)狀紅細(xì)胞殘骸和白細(xì)胞殘骸通常為藍(lán)色，與瘧原蟲(chóng)的胞漿相似，有時(shí)因與上述紅點(diǎn)巧合一起，而容易誤為瘧原蟲(chóng)。鑒別時(shí)如形同大滋養(yǎng)體，可依據(jù)瘧色素的特點(diǎn)加以區(qū)別；如形狀似小滋養(yǎng)體，可依據(jù)蟲(chóng)體大小、折光是否均勻以及核與胞漿是否在一個(gè)平面上予以區(qū)別。,瘧原蟲(chóng)計(jì)數(shù)方法 1． 半定量計(jì)數(shù) 用厚血膜每個(gè)視野中所觀察到的瘧原蟲(chóng)的平均數(shù)可粗略地估計(jì)為瘧原蟲(chóng)密度。這種方法簡(jiǎn)便，缺點(diǎn)是計(jì)數(shù)的瘧原

41、蟲(chóng)數(shù)受制作的血膜厚度所影響，在流行病學(xué)上不宜用這種數(shù)據(jù)作定量分析。,國(guó)內(nèi)常用此方法將密度分為六級(jí)： 全厚血膜查見(jiàn)瘧原蟲(chóng)數(shù)在10個(gè)以內(nèi)，記錄實(shí)際數(shù)字； 全厚血膜查見(jiàn)瘧原蟲(chóng)數(shù)在10個(gè)以上，但平均每個(gè)視野不到1個(gè)蟲(chóng)，記錄“少”； 100個(gè)視野中查見(jiàn)的瘧原蟲(chóng)數(shù)平均每個(gè)視野1~5個(gè)，記錄“＋”； 100個(gè)視野中查見(jiàn)的瘧原蟲(chóng)數(shù)平均每個(gè)視野6~10個(gè)，記錄“++”； 100個(gè)視野中查見(jiàn)的瘧原蟲(chóng)數(shù)平均每個(gè)視野11

42、~100個(gè)，記錄“+++ ”； 100個(gè)視野中查見(jiàn)的瘧原蟲(chóng)數(shù)平均每個(gè)視野100個(gè)以上，記錄“++++ ”。,國(guó)外常用的方法將密度分為四級(jí)： 厚血膜上100個(gè)視野中查見(jiàn)1~10個(gè)瘧原蟲(chóng)，記錄“+”; 厚血膜上100個(gè)視野中查見(jiàn)11~100個(gè)瘧原蟲(chóng)，記錄“++”； 厚血膜上100個(gè)視野平均1個(gè)視野查見(jiàn)1~10個(gè)瘧原蟲(chóng)，記錄“+++”； 厚血膜上100個(gè)視野平均1個(gè)視野查見(jiàn)10個(gè)瘧原蟲(chóng)以上，記錄++

43、++”，,2． 厚血膜的瘧原蟲(chóng)計(jì)數(shù) 根據(jù)預(yù)先測(cè)定的白細(xì)胞數(shù)目計(jì)算出每微升血液中瘧原蟲(chóng)的數(shù)目。在制作厚血膜的同時(shí)，使用Coulter計(jì)數(shù)器或血球計(jì)確定每微升血液中的白細(xì)胞數(shù)。然后鏡檢厚血膜，計(jì)數(shù)同一視野中的瘧原蟲(chóng)數(shù)和白細(xì)胞數(shù)，直到所計(jì)數(shù)的白細(xì)胞數(shù)達(dá)到確定的數(shù)值為止(如果瘧原蟲(chóng)密度較高，計(jì)數(shù)100～200個(gè)白細(xì)胞即可，但在瘧原蟲(chóng)密度很低時(shí)，計(jì)數(shù)白細(xì)胞數(shù)需達(dá)1000個(gè))。,用下式算出瘧原蟲(chóng)密度。瘧原蟲(chóng)數(shù)/白細(xì)胞數(shù)×白細(xì)胞數(shù)

44、/μl血=瘧原蟲(chóng)數(shù)/μl血。一般情況下，當(dāng)瘧原蟲(chóng)密度超過(guò)4000個(gè)/μl血時(shí)，計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞其結(jié)果就較精確。如果無(wú)法進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)，則可按常規(guī)估計(jì)白細(xì)胞數(shù)。國(guó)外最常采用的數(shù)值是8000白細(xì)胞/μl血,國(guó)內(nèi)常用6000白細(xì)胞/μl血。,血片的鏡檢,1.在學(xué)習(xí)鏡檢瘧原蟲(chóng)之前，必須先對(duì)正常厚薄血膜中各種血細(xì)胞的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和染色性質(zhì)加以識(shí)別．2.學(xué)習(xí)鏡檢瘧原蟲(chóng)，首先要學(xué)看薄血膜，在基本上掌握薄血膜中瘧原蟲(chóng)形態(tài)后，才學(xué)習(xí)鏡檢厚血膜。

45、3.鏡檢瘧原蟲(chóng)一般只查厚血膜，薄血膜僅作為原蟲(chóng)分類時(shí)參考和血片編號(hào)之用。4.鏡檢瘧原蟲(chóng)必須用油鏡頭配合5X低倍目鏡鏡檢，當(dāng)發(fā)現(xiàn)疑難問(wèn)題時(shí)可調(diào)換10X目鏡進(jìn)行觀察。5.檢查時(shí)應(yīng)從厚血膜的上緣開(kāi)始，使血膜從上而下，自左至右，由右至左，一行接一行，一個(gè)視野稍疊一個(gè)視野順序地查完整個(gè)血膜。,掌握要點(diǎn)：1．構(gòu)成瘧原蟲(chóng)的三個(gè)基本要素是什么？ 2．被間日瘧和惡性瘧寄生的紅血球有何變 化？ 3．在周圍血液中可以見(jiàn)