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文檔簡介
1、目的:苯并[a]芘(benzo(a)pyrene,B(a)P)作為多環(huán)芳烴的代表,廣泛存在于各種環(huán)境介質(zhì)中,具有很強的致癌性。多氯聯(lián)苯是目前國際上極為關(guān)注的一類持久性有機污染物,多氯聯(lián)苯126(3,3’,4,4’,5-pentachlorobipheny,PCB126)作為具有共面結(jié)構(gòu)的多氯聯(lián)苯同系物代表,是毒性最強的多氯聯(lián)苯之一,在環(huán)境和人體中均可檢測到。有研究表明B(a)P的代謝活化可引起細胞氧化應(yīng)激,而多氯聯(lián)苯能增強B(a)P的代
2、謝活化,從而可能加重其氧化應(yīng)激程度,進而引起細胞的遺傳損傷,并且兩者常共存于多種環(huán)境介質(zhì)和人體生物樣本中,研究兩者聯(lián)合作用時氧化應(yīng)激效應(yīng)及遺傳毒性效應(yīng)具有現(xiàn)實意義。
方法:本文以HepG2細胞為靶細胞,設(shè)0.01、0.1、1和10nmol/L PCB126 劑量組和B(a)P 50μmol/L 劑量組,以10 ml/L 二甲基亞砜(DMSO)為溶劑對照組,進行各物質(zhì)的單獨染毒。同時用不同濃度PCB126 預(yù)處理HepG2細
3、胞后,再與B(a)P 聯(lián)合染毒。通過流式細胞術(shù)檢測細胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;通過TNB法檢測細胞內(nèi)谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)含量;通過硫代巴比妥酸法檢測細胞內(nèi)丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;并通過單細胞凝膠電泳試驗檢測DNA 損傷,以此探討PCB126對B(a)P 致HepG2細胞氧化應(yīng)激及遺傳損傷的影響。
結(jié)果:與溶劑
4、對照相比,PCB126單獨染毒時,僅在最高濃度(10.0nmol/L)引起ROS增加(P<0.05)。與B(a)P單獨作用相比,PCB126 各劑量與50μmol/L B(a)P 聯(lián)合染毒,ROS 均顯著增加(P<0.01),其中0.01、0.10、1.00nmol/L PCB126與B(a)P 聯(lián)合染毒時誘發(fā)的ROS增加存在劑量依賴關(guān)系,ROS的增加在10.0nmol/L PCB126與B(a)P聯(lián)合染毒時有所下降。
與
5、溶劑對照相比,50μmol/L B(a)P單獨染毒可引起HepG2細胞GSH 明顯增加(P<0.01),而各劑量PCB126單獨染毒時GSH 均顯著減少(P<0.01)。與B(a)P單獨作用相比,各聯(lián)合作用組GSH 均顯著減少(P<0.01)。
與溶劑對照相比,50μmol/L B(a)P單獨染毒可引起HepG2細胞MDA顯著增加(P<0.01)。與B(a)P單獨作用相比,僅在最高濃度10.0nmol/L PCB126與B
6、(a)P聯(lián)合染毒時MDA顯著增加(P<0.05)。
與溶劑對照相比,50μmol/L B(a)P單獨染毒可引起DNA損傷顯著升高(P<0.01)。與B(a)P單獨作用相比,1.00、10.0nmol/L PCB126與B(a)P聯(lián)合染毒時DNA損傷顯著增加(P<0.05)。
結(jié)論:綜上所述,一定劑量的PCB126 能使B(a)P誘導(dǎo)的HepG2 氧化應(yīng)激加重,細胞遺傳損傷增強,提示PCB126對B(a)P 遺
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