酶工程重點(diǎn)考試

1、1.酶作用專一性機(jī)理專一性：一種酶只能作用于一種或一類底物。表現(xiàn)為鎖鑰模型鎖鑰模型認(rèn)為整個(gè)酶分子的天然構(gòu)象是具有剛性結(jié)構(gòu)的，酶活性部位的形狀與所需作用的底物形狀相吻合，它們可以象鑰匙與鎖一樣互相匹配。此學(xué)說可以較好的解釋酶的立體異構(gòu)專一性；但不能解釋酶的多底物現(xiàn)象、酶對(duì)正反方向的催化等誘導(dǎo)契合模型誘導(dǎo)契合模型該學(xué)說認(rèn)為酶的活性部位并不是和底物的形狀正好互補(bǔ)的，而是在酶和底物結(jié)合的過程中，由于酶與底物相互誘導(dǎo)，使底物分子或酶分子，有時(shí)是兩

2、者的構(gòu)象同時(shí)發(fā)生了一定的變化后才互補(bǔ)的，這個(gè)動(dòng)態(tài)的辨認(rèn)過程稱為誘導(dǎo)契合。2.抑制作用抑制作用：通過與酶分子上的某些必需基團(tuán)結(jié)合，使這些基團(tuán)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)發(fā)生改變，從而引起酶活力下降或喪失，這種作用稱為抑制作用。3.別構(gòu)效應(yīng)：別構(gòu)效應(yīng)：調(diào)節(jié)物與酶分子的調(diào)節(jié)中心結(jié)合之后，引起酶分子構(gòu)象發(fā)生變化，從而改變催化中心對(duì)底物的親和力。4.酶活力酶活力：也稱酶活性，指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。其大小可用在一定條件下，它所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速率來表

3、示，兩者呈線性關(guān)系。所以測(cè)定酶的活力就是測(cè)定酶的反應(yīng)速率酶反應(yīng)速率：用單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中底物的減少量或產(chǎn)物的增加量來表示。單位：濃度單位時(shí)間5.5.酶的比活力酶的比活力:代表酶的純度，用每mg蛋白質(zhì)所含的酶活力單位數(shù)表示，對(duì)同一酶來說，比活力愈大，表示酶的純度愈高。6.細(xì)胞的破碎的方法細(xì)胞的破碎的方法:機(jī)械破碎法、物理破碎法、化學(xué)破碎法、酶促破碎法7.制備固定化酶的方法很多，有包埋法，吸附法，共價(jià)鍵結(jié)合法，以及交聯(lián)法等8.交聯(lián)法：用

4、雙功能或多功能試劑使酶分子之間、酶分子與惰性蛋白之間，酶分子與載體之間進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)，形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的固定化方法。9.酶化學(xué)修飾的方法酶化學(xué)修飾的方法酶分子內(nèi)部化學(xué)修飾1、肽鏈有限水解修飾2、氨基酸置換修飾3、金屬離子置換修飾酶分子表面化學(xué)修飾4、酶分子側(cè)鏈基團(tuán)的修飾5、大分子結(jié)合修飾6、化學(xué)固定修飾10.同工酶同工酶指具有同一底物專一性，并能催化同一種化學(xué)反應(yīng)，但分子結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)不完全相同的一組酶判斷題1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白

5、質(zhì)。（╳）7衡量固定化酶的穩(wěn)定性的主要指標(biāo)是：酶的半衰期8固定化酶的活力回收指的是：固定化完成后被固定到載體上的酶活力占原液總酶活力的百分比；9酶的化學(xué)修飾是指通過化學(xué)基團(tuán)的引入或去除改變酶蛋白的共價(jià)結(jié)構(gòu)；10下列關(guān)于化學(xué)修飾的提法哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的：C（A）可以提高酶的穩(wěn)定性；（B）可以解除酶的抗原性（C）可以改變酶促反應(yīng)的最適溫度；（D）一般情況下可以提高酶的活力11利于維持蛋白結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定：增強(qiáng)氨基酸殘基裝配的堅(jiān)實(shí)程度；增加蛋白質(zhì)表面的

6、親水性；增加蛋白質(zhì)內(nèi)部的疏水性12關(guān)于酶在非水介質(zhì)中的最適水量下面提法正確的是：A（A）使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的動(dòng)力學(xué)剛性和熱力學(xué)穩(wěn)定性之間達(dá)到最佳平衡點(diǎn)酶能表現(xiàn)出最大活力所需要的含水量；（B）酶在非水介質(zhì)中表現(xiàn)活性所需的最低含水量；（C）不同酶在同一介質(zhì)里的最適水量相同；（D）同一種酶在不同介質(zhì)里的最適水量相同。13核酶的功能：剪切RNA；剪接RNA；復(fù)制DNA14脫氧核酶的功能：切割RNA；切割DNA；）具有激酶活力；15酶分子的定向進(jìn)化：屬

7、于非理性設(shè)計(jì)的酶分子改造方式；簡(jiǎn)答題1.固定化酶和游離酶相比，有何優(yōu)缺點(diǎn)？?jī)?yōu)點(diǎn)（1）易將固定化酶和底物，產(chǎn)物分開產(chǎn)物溶液中沒有酶的殘留簡(jiǎn)化了提純工藝（2）可以在較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)連續(xù)使用（3）反應(yīng)過程可以嚴(yán)格控制，有利于工藝自動(dòng)化（4）提高了酶的穩(wěn)定性（5）較能適于多酶反應(yīng)（6）酶的使用效率高產(chǎn)率高成本低缺點(diǎn)：固定化時(shí)酶的活力有損失；比較適應(yīng)于水溶性底物；與完整的細(xì)胞相比，不適于多酶反應(yīng)。2.酶分子的改造措施3微生物發(fā)酵產(chǎn)酶微生物發(fā)酵產(chǎn)酶酶發(fā)

8、酵生產(chǎn)的菌株一般需具備什么條件。酶發(fā)酵生產(chǎn)的菌株一般需具備什么條件。①不是致病菌，在系統(tǒng)發(fā)育上最好是與病原體無(wú)關(guān)②能夠利用廉價(jià)原料，發(fā)酵周期短，產(chǎn)酶量高③菌種不易變異退化，不易感染噬菌體④最好選用產(chǎn)生胞外菌的菌種，有利于酶的分離，回收率高產(chǎn)酶微生物誘變育種步驟的主要方法和步驟產(chǎn)酶微生物誘變育種步驟的主要方法和步驟主要方法：物理、化學(xué)或生物誘變方法誘變育種步驟：出發(fā)菌株的選擇、處理菌懸液的制備、誘變處理、中間培養(yǎng)、分離和篩選簡(jiǎn)要說明微生物

9、產(chǎn)酶（生產(chǎn)）的主要發(fā)酵方式簡(jiǎn)要說明微生物產(chǎn)酶（生產(chǎn)）的主要發(fā)酵方式（1）固體發(fā)酵法：利用麩皮和米糠為主要原料，添加谷殼，豆餅等，加水拌成半固體狀態(tài)，供微生物生長(zhǎng)和產(chǎn)酶用。分為淺盤法、轉(zhuǎn)桶法、厚層通氣法等（2）液體發(fā)酵：以液體為培養(yǎng)基，進(jìn)行微生物的生產(chǎn)繁殖和產(chǎn)酶。分為液體表層發(fā)酵法和液體深層發(fā)酵法（3）固定化細(xì)胞發(fā)酵優(yōu)點(diǎn)：①固定化細(xì)胞的密度大，反應(yīng)器生產(chǎn)強(qiáng)度大；②發(fā)酵穩(wěn)定性好，可以連續(xù)使用較長(zhǎng)時(shí)間，易于連續(xù)化，自動(dòng)化生產(chǎn)；③可在高稀釋率的