1.虎紋捕鳥蛛毒素ⅰ的生物素標記與受體分析;2.過甲酸氧化輔助酶解在質(zhì)膜蛋白質(zhì)組學中的應用

1、湖南師范大學碩士學位論文1.虎紋捕鳥蛛毒素-Ⅰ的生物素標記與受體分析;2.過甲酸氧化輔助酶解在質(zhì)膜蛋白質(zhì)組學中的應用姓名：呂榮申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：王賢純;梁宋平200905012 過甲酸氧化輔助酶切法在質(zhì)膜蛋白質(zhì)組學中的應羯質(zhì)膜蛋白在許多生物學過程中起重要作用，是許多藥物的作用靶標。細胞須膜蛋自質(zhì)組研究正成為蛋自質(zhì)組學的研究熱點。然而由于整合膜蛋白低豐度和疏水的性璦，使得其狠難被分析和鑒定。在蛋白質(zhì)組學

2、分析過程中，疏水性肽段和跨膜肽段常常很難被鑒定到，這樣就降低了疆白總的覆蓋率和蛋自被鑒定的可靠性。本研究報道了一種膜上酶解耘策略，用于膜蛋自質(zhì)的鑒定。該策略的特點是引入了過甲酸氧化處理( P A O T ) 。由于過甲酸試劑能將半胱氨酸殘基和甲硫氨酸殘基分別氧化為半胱磺酸和甲硫氨酸砜，這使得蛋童的疏水性大大降低，增加了疏水性肽段的酶切和檢測效率，這非常有利于分析鑒定疏水性強的蛋白e 以人類C N E l 細胞系為材料，我們比較了P A

3、o T 輔助酶解與另外二種常用的酶解方法：胰蛋白酶／胰凝乳蛋囊酶酶解和甲醇酶解站結(jié)果表明，甲醇酶解法鑒定到? 2 個整合膜蛋白，其中平均疏水值大于O 的躡白數(shù)為3 l ；胰蛋白酶／胰凝乳蛋白酶酶解法共鑒定到5 9 個整合膜愛白，其中平均疏水值大于O的蛋自數(shù)為4 0 個；P 鷦墨法共鑒定到王0 王個整合膜蛋白，其中平均蔬水值大于O 的蛋鼠數(shù)為6 7 個培因此，比起其它兩種傳統(tǒng)的方法，過甲酸氧化輔助酶解方法能鑒定到更多的高疏水性多跨膜區(qū)蛋白