kca3.1在堿性環(huán)境促進(jìn)高磷誘導(dǎo)大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞鈣化的機(jī)制研究

1、 授予單位代碼 授予單位代碼 10089 學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?09010010045 中國(guó)圖書分類號(hào) 中國(guó)圖書分類號(hào) R543 碩士學(xué)位論文 碩士學(xué)位論文 專業(yè)學(xué)位 專業(yè)學(xué)位 KCa3.1 在堿性環(huán)境促進(jìn)高磷誘導(dǎo)大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌 在堿性環(huán)境促進(jìn)高磷誘導(dǎo)大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞鈣化的機(jī)制研究 細(xì)胞鈣化的機(jī)制研究 研 究 生： 生： 楊 碩 導(dǎo) 師：

2、 師： 徐金升 徐金升 教授 教授 專 業(yè)： 業(yè)： 內(nèi)科 內(nèi)科學(xué) 二級(jí)學(xué)院： 二級(jí)學(xué)院： 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院 2016 年 3 月 Hebei Medical University 中 文 摘 要 KCa3.1 在堿性環(huán)境促進(jìn)高磷誘導(dǎo)大鼠胸主動(dòng)脈 在堿性環(huán)境促進(jìn)高磷誘導(dǎo)大鼠胸主動(dòng)脈 平滑肌細(xì)胞鈣化的機(jī)制研究 平滑肌細(xì)胞鈣化的機(jī)制研究 摘 要 目的 目的：心血管疾病( Cardiovascul

3、ar disease，CVD) 是慢性腎臟病( Chronic kidney disease，CKD）患者最常見(jiàn)的并發(fā)癥，也是導(dǎo)致終末期腎病( End stage renal disease，ESRD) 患者死亡的首要原因。血管平滑肌細(xì)胞（Vascular smooth muscle cells，VSMCs）向成骨樣或成軟骨樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化從而導(dǎo)致的動(dòng)脈血管鈣化是發(fā)生心血管事件的關(guān)鍵步驟。 ESRD 患者在透析過(guò)程中使用碳酸氫鹽透析液，使機(jī)體

4、短暫的處于堿性環(huán)境。有研究發(fā)現(xiàn)，腹腔注射碳酸氫鈉的大鼠血管鈣化更加嚴(yán)重，但堿性環(huán)境促進(jìn)血管鈣化的機(jī)制并不清楚。中電導(dǎo)鈣激活鉀離子通道（Intermediate- conductance Ca2+-activated K+ channels, KCa3.1） 是依賴鈣激活的重要的鉀離子通道，在平滑肌細(xì)胞中廣泛表達(dá)，參與多種細(xì)胞調(diào)節(jié)功能，與高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)，因此我們推測(cè)其可能在血管鈣化中著重要作用。探究 KCa3.1 在血管鈣化

5、的作用，為臨床治療提供新靶點(diǎn)。 方法： 方法： 1 選擇 4 周齡健康雄性 SD 大鼠 80g-100g， 通過(guò)組織貼壁法進(jìn)行平滑肌細(xì)胞原代培養(yǎng)；選擇 6 周齡健康雄性 SD 大鼠 200g-250g，進(jìn)行體外血管環(huán)培養(yǎng)。SD 大鼠購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。 2 體外血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)：采用組織塊貼壁法培養(yǎng)原代大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，使用 10mmol/L β-甘油磷酸制備血管平滑肌細(xì)胞鈣化模型。使用 10mmol/l HCl 和 1

6、0mmol/l NaHCO3 調(diào)整培養(yǎng)基 pH 值。采用隨機(jī)數(shù)字表法， 將血管平滑肌細(xì)胞隨機(jī)分為 6 組： 正常 pH7.4 組、 高磷 pH7.4組、 高磷 pH7.7 組、 高磷 pH8.0 組、 正常 pH8.0 組、 TRAM-34 干預(yù)組 （在高磷 pH8.0 組培養(yǎng)基基礎(chǔ)上加入 20nmol/L TRAM-34）。 體外血管環(huán)培養(yǎng)：將 6 周齡 SD 雄性大鼠麻醉后，無(wú)菌條件下取出胸主動(dòng)脈， 小心剝掉外膜、 內(nèi)膜后， 將血管