副干酪乳桿菌lactobacillusparacaseihd1.7產肽條件優(yōu)化及肽類分離研究

1、黑龍江大學碩士學位論文副干酪乳桿菌（Lactobacillus paracasei）HD1.7產肽條件優(yōu)化及肽類分離研究姓名：高瑩申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：平文祥20080404黑龍江大學碩士學位論文A b s t r a c tA n t i b a c t e r i a l p e p t i d e s ( A S P ) ，p r o d u c e d b y l a c t i c a c i

2、d b a c t e r i a , s h o w t h e i ra d v a n t a g e si n s a f e t ya n dl o w c o s t ．A B Pi s n o w p a i dm o r ea n dm o r ea t t e n t i o nt o ．T h eA B P p r o d u c e db yL a c t o b a c i l l u s ．p a r a c

3、e s e iH D 1 ．7 c a ni n h i b i tn o to n l yg r a m p o s i t i v eb a c t e r i u m ，b u ta l s og r a m n e g a t i v eb a c t e r i u ma n d y e a s t ．I tC a l lk e e ps t e a d yw h e n b o i l e di 1 1l l i g ht

4、e m p e r a t u r e ．R e s e a r c hw a s d o n eo nt h ec o m p o n e n t so fm e d i u m t oo p t i m i z et h ep r o d u c t i o n o ft h eA B P , t h ep u r i f i c a t i o n o ft h eA B P w a s s t u d i e d ，a n dt

5、 h e b i o l o g i c a lf e a t u r e so f t h eA B P w e r ed e t e c t e d ．T } l i s r e s e a r c hl a i df o u n d a t i o n s f o rt h ep r o d u c t i o no ft h eA B P a n d m u c h m o r e a t t e n t i o n sw o

6、u l db ep a i d o nt h er e s e a r c ho f t h e s i t e sc o n t r o l i n gi n d i c a t o r sa n d t h eg e n e e x p r e s s i o no f t h e A B EB a s e d o n t h e c o m p a r i a t i o no f t h e c o m p o n e n t

7、s o f m e d i u m o f L ．p a r a c a s e i H D l ．7 ，a no p t i m a lm e d i u m W a s o b t a i n e d ：p e p t o n e3 0 9 ／L ，g l u c o s e10 9 ／L ，K 2 H P 0 41 ．5 9 ／L ，N a H P 0 40 ．2 # L ，N a S 0 37 9 ／L ，M g S 0 4O

8、．1g ／L ，U n S 0 40 ．0 2 5 9 ／L ，t w e e n 一8 01 ．0 m L ／L ，塒t hi n i t i a lp H 5 ．5 ．W h e ns t u d i e do nt h e s e p a r a t i o n a n dp u r i f i c a t i o n o ft h e A B P , t h ef e r m e n t a t i o nl i q u i d

9、w a s i s o l a t e db yt h eC M S e p h a r o s e F a s tF l o wC a t i o n —e a c h a n g ec h r o m a t o g r a p h ya n d S e p h a d e xG - 2 5 ，G 一10 g e lf i l t r a t i o nc h r o m a t o g r a p h y ．T h e a c t

10、 i v ec o m p o n e n t s ( G 1 0 a ，G 1 0 b ，G 1 0 c ，G 1 0 d a n dG 1 0 e ) w e r e o b t a i n e d ；t h eh i g h e s ta c t i v i t yW a s s h o w e d b y G 1 0 d ．I t sm o l e c u l a rw e i g h t w a s e s t i m a t

11、 e dt ob e u n d e r 1 0 k D a ．a c c o r d i n g t oS D S —P A G E ．T h e b i o l o g i c a l f e a t u r e so ft h eA B P s h o w e dt h a tt h e o p t i m u mp HW a s4 ．0 ．T h eb a c t e r i o c i nw a ss t e a d yi n

12、a c i dc o n d i t i o n s 。I tw a s s t i l l a c t i v ea f t e rb o i l e di n 12 1 ℃f o r15 m i n s ，w h i c hs h o w e dg o o d t h e r m a ls t a b i l i t y ．T h ei n h i b i t i o ns p e c t r u mo f t h eA B P w

13、 a sv e r y w i d e ，i tc o u l d i n h i b i t b o t h p o s i t i v eb a c t e r i aa n d n e g a t i v eb a c t e r i a , a n d a l s oe f f e c t e do n y e a s t ．I tw a s s e n s i t i v e t ot y p s i n ，b u ti n

14、s e n s i t i v e t op e p s i n ，p a p a i na n dK p r o t e a s e ．T h eA B P i n h i b i t e dB a c i l l u ss u b t i l i sf r o mg r o w i n gr a t h e rt h a nk i l l i n gi t ．T h eA B P s t i l lk e p tl l i g ha

15、 c t i v i t yw h e n p r e s e r v a t e d i n4 “ C f o r 4 m o n t h s ．k e y w o r d s L a c t o b a c i l l u s p a r a c a s e i H D 1 ．7 ；a n t i b a c t e r i a l p e p t i d e s ；f e r m e n t a t i o n ；s e p a