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1、南昌大學碩士學位論文橙色紅曲菌(AS3.4384)SOD基因的克隆與功能分析姓名:涂追申請學位級別:碩士專業(yè):食品科學指導教師:許楊20070612M o n a s c u s ,o n e o f t h e i m p o r t a n t m i c r o o r g a n i s m n 瑚u “:e so f C h i n a , p r o d u c e sA na r r a y o f d i v e r s
2、 e b i o r e a c f i v e ∞c o n d a r y m e t a b o f i t e s d u r i n g t h e p t ' o c e 昭o ff e r m e n t a t i o n .H o w e v e r , i tw a s a l s o n o t i c e dt h a tm o s tM o n a s c u s 嗣瑚缸Bp r o d u c ec
3、i t r h f m , a h a r m f u lm y c o t o x i n , i n t h es a m e p r o c e s s .I no r d e rt oc o 咖c t M o n a s c u ss w a i n w i t h o u te x c r e t i n g c i t r i n i n b yg e n e t i c e n g i n e e r i n gW eh
4、a v ec l o n e d e i g h tp m m i v eg e n e s ( E S T s ) w h i c h 勰g e n e 盤a 驢e D t sp o s s i b l yl - c l a t e d t Ot h e c i t r i n i nb i o s y n t h e t i cp a t h w a yi nM o n a s c u s .B i o i n f o r m a
5、t i c sa n a l y s i s s h o w s t h a t o n cE S T ,n a m e d /5 , i s h i g h l yh o m o l o g o u s t oM n - S O D .S u p e r o x i d ed i s m u t a s e ( s o D ) ' a w i d e l y p r e s e n t em e t a l - c o n f
6、 i n i n g a n f i o x y d a f i v ee 1 1 z y f l l e .i s 缸i m p o r t a n t f r e e r a d i c a l s c a v e n g e r i nv i v o a n de x h i b i t s m u l t i p l eb i o l o g i c a le f f e c t s s u c ha s 缸出雒她a n t i
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8、s 啪i l l u s W a t e d a sf a l l o w i n g :1 .A c l o n e n a m e d Q 5 E ‘w h i c h c o n t a i n s S O D g e n e w a s i s o l a t e d f r o m t h e f o r s m i dg e n o m i cl i t 憾黟o f 挺圓以蒯蚴A S 3 .4 3 8 4 b y P C R
9、 .A f t e r c o m p l e t e l yd i g e s t e db y刪I ,t h e r e s t r i c t i o nd i g e s t i o nf r a g m e n t so f Q s E , w 齟s u b c l o n e d i n t op U C l 8 .T h e np U C l g - Q 5 E 4 w h i c hc o n m i m S O D g
10、 e n ea n d i t sf l a n k i n gr c g i o nw a sc o n s m l c t e c LI tW a S } a l c rc o n f i r m e dt h a tp U C l 8 ·Q 5 E 4 c o n t a i n s9 0 7b p5 ' - f l a n k i n gs e q u e n c ea n d3 5 6 b p 3 '
11、 - f l a n k i n gs e q u e n c e .2 .A ni n .o f tt y p eo f S O D g e n et a r g e t i n gp l a s m i dw h i c hi s c o m p o s e d o f a1 .S k b h o m o l o g o u sf i - a g m e n t a n d ah y g r o m y c i np h o s p
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