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1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文腺病毒介導(dǎo)NURR1基因轉(zhuǎn)柒C17.2神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)性局灶性腦梗死姓名:黎祥噴申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師:邢詒剛20040512腺病毒介導(dǎo)N U R R l 基因轉(zhuǎn)染C 1 7 .2 神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)性局灶性腦梗死 碩士學(xué)位論文系。外源N S C s 移植或投入外源性的細(xì)胞因子能夠進(jìn)一步激活自身N S C s ,促進(jìn)神經(jīng)結(jié)構(gòu)和功能更明顯的恢復(fù)。更重要的是,移植到宿主腦內(nèi)的N S C s 能
2、向病灶部位的方向移行,與宿主細(xì)胞整合,體內(nèi)增殖,并能根據(jù)周?chē)h(huán)境的誘導(dǎo)向病變所缺失的細(xì)胞方向分化,從而使受損的神經(jīng)結(jié)構(gòu)和功能修復(fù)。2 .基因治療腦梗死的現(xiàn)狀近年來(lái),隨著對(duì)腦梗死病理生理機(jī)制、分子機(jī)制認(rèn)識(shí)的不斷深入,以及分子生物學(xué)、基因工程的高速發(fā)展,使腦梗塞的基因治療越來(lái)越接近現(xiàn)實(shí)。目前,腦梗死基因治療策略的焦點(diǎn)主要集中在腦梗死發(fā)生2 周內(nèi)如何增強(qiáng)神經(jīng)保護(hù)基因或者抑制被認(rèn)為有害的基因,特別是最初5 天。腦梗死發(fā)生后,在缺血半暗帶( i
3、 s c h e m i c p e n u m b r a ) ,按一定次序出現(xiàn)炎癥性級(jí)聯(lián)( i n f l a m m a t o r y c a s c a d e ) 。針對(duì)腦梗死后離子梯度破壞、能量衰竭和炎癥性級(jí)聯(lián)的基因治療試驗(yàn)已經(jīng)開(kāi)展,研究最多的候選基因是炎癥性級(jí)聯(lián)基因。3 , 神經(jīng)干細(xì)胞介導(dǎo)實(shí)現(xiàn)神經(jīng)移植和基因治療的綜合治療腦梗死的體外基因治療,須在體外以目的基因轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞,然后將經(jīng)轉(zhuǎn)染的靶細(xì)胞輸入到體內(nèi)。如果以神經(jīng)干細(xì)胞為
4、靶細(xì)胞,則有可能同時(shí)達(dá)到神經(jīng)干細(xì)胞移植和基因治療的目的,實(shí)現(xiàn)神經(jīng)移植和基因治療綜合治療。C 1 7 .2 神經(jīng)干細(xì)胞是由來(lái)源于小鼠小腦的原代神經(jīng)干細(xì)胞轉(zhuǎn)入v 2 m y c 基因構(gòu)建成功的永生化神經(jīng)干細(xì)胞系,帶有標(biāo)志基因L a c Z ,具有多向分化潛能。N U R R l 屬于核受體超家族,孤兒核受體沒(méi)有明確的配體,它們能以單體形式與相應(yīng)D N A 序列或與視黃醛x 受體結(jié)合為異二聚體激活D N A 的轉(zhuǎn)錄。N U R R l基因轉(zhuǎn)染
5、至N S C s 系后,能促進(jìn)N S C s 向神經(jīng)元方向分化。本實(shí)驗(yàn)選擇N U R R l 為目的基因。以C 1 7 .2 細(xì)胞系為靶細(xì)胞,進(jìn)行腦梗死體外基因治療、神經(jīng)干細(xì)胞移植治療的實(shí)驗(yàn)研究。主要工作:①構(gòu)建p A d e a s y - N U R R l 重組復(fù)制缺陷性腺病毒。②觀察N U R R l 基因轉(zhuǎn)染對(duì)C 1 7 .2 神經(jīng)干細(xì)胞體外分化的影響。③應(yīng)用C 1 7 .2 和N U R R l 基因修飾C 1 7 .2 神
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