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1、第一部分側(cè)腦室注射人胚神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎大鼠的實(shí)驗(yàn)研究 目的:研究側(cè)腦室注射人胚神經(jīng)干細(xì)胞(hNSCs)移植治療實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)大鼠的有效性及hNSCs在EAE大鼠腦內(nèi)的生長(zhǎng)、分布、分化狀況。 材料和方法:從自然流產(chǎn)的孕9~15周的人胚腦組織中分離、培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞。用豚鼠全脊髓勻漿免疫Wistar大鼠制備EAE大鼠模型,分別在免疫后10、15、21天經(jīng)側(cè)腦室注射移植未分化的hNS
2、Cs入大鼠體內(nèi),觀察hNSCs對(duì)EAE動(dòng)物模型神經(jīng)功能評(píng)分、腦內(nèi)脫髓鞘病灶數(shù)目的影響,免疫組化方法觀察移植后的hNSCs在EAE大鼠腦內(nèi)存活、遷徙、分化的狀況。 結(jié)果:從人胎腦中成功培養(yǎng)出hNSCs,培養(yǎng)條件下呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),形成神經(jīng)球。絕大多數(shù)細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)記物神經(jīng)巢蛋白(nestin)。hNSCs移植組各時(shí)間點(diǎn)大鼠腦組織切片中均可見Brdu、nestin、NSE、GFAP、CNPase染色陽(yáng)性細(xì)胞,CNPase陽(yáng)性的
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