ⅰ，稻瘟病抗性蛋白pi36卷曲螺旋結構域免疫自激活的分子機理ⅱ，擬南芥廣譜抗病蛋白rpw8.1與乙烯信號的相互調控

1、I ，T h em o l e c u l a rm e c h a n i s mo f t h ea u t o i m m u n i t ym e d i a t e db y c o i l e d - —c o i l d o m a i n o f r i c eb l a s t p r o t e i n P D 6I I ，T h er e g u l a t i o n b e t w e e nA r a b i

2、 d o p s i sr e s i s t a n c e p r o t e i nR P W 8 ．1 a n d e t h y l e n es i g n a l i n gP e n g —q i a n gL i u( P l a n tp a t h o l o g y )D i r e c t e db yP r o f ．W e n —m i n g W a n gA D i s s e r t a t i o

3、nS u b m i t t e d i nP a r t i a l F u l f i l l m e n t o f t h e R e q u i r e m e n t f o rt h eD o c t o r ’SD e g r e eS i c h u a n A g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t yC h e n g d u S i c h u a n P ．R ．C h i

4、 n aM a y 2 0 1 6I ，稻瘟抗性蛋白P i 3 6 卷曲螺旋結構域免疫自激活的分子機理I I ，擬南芥廣譜抗病蛋白R P W 8 ．1 與乙烯信號的相互調控摘要第一部分稻瘟抗性蛋白P i 3 6 卷曲螺旋結構域免疫自激活的分子機理植物在長期與病原菌的共存中進化出了許多結構保守的抗病蛋白，這些蛋白往往包含一個N 端的卷曲螺旋( C C ) 結構域，一個中部的核苷酸綁定( N B ) 結構域和一個亮氨酸重復序列( L R R

5、 ) 。在模式植物擬南芥中有很多C C - N B —L R R蛋白的C C 結構域往往能觸發(fā)自身免疫。但是，是否所有的或者哪些C C 結構域都能夠激發(fā)自身免疫這一問題尚不清楚。此處，我們成功的擴增到P i 3 6 , R G A 4 ，R G A 5 ，P i k m ．J ，P i k m 一2 ，P i s h ，P i t a 和P b l 這八個稻瘟病抗病基因編碼C C 結構域的序列。通過瞬時表達試驗證明只有P i 3 6 的

6、C C 結構域能夠在本氏煙和水稻原生質體中觸發(fā)細胞死亡。通過酵母雙雜交和雙分子熒光互補試驗證明P i 3 6C C 結構域的自身相互作用是其激活細胞死亡所必需的。而后，證明使用擬南芥抗白粉病蛋白8 ．2 ( Ⅺ，W 8 ．2 ) 的啟動子在擬南芥中異位表達P i 3 6C C 結構域能夠提高擬南芥對白粉菌的抗病性；使用噻菌靈誘導蛋白1 ( P B Z l ) 的啟動子在水稻中異位表達P i 3 6C C 結構域能夠提高水稻對稻瘟菌的抗病

7、性。隨后，使用P i 3 6C C 結構域作為誘餌篩選稻瘟菌侵染后的水稻葉片e D N A 酵母文庫找到P i 3 6C C 結構域的互作蛋白，一個乙烯信號通路轉錄因子O s E I L 2 ，并結合雙子分熒光互補試驗進行驗證，確認O s E I L 2 為P i 3 6C C 結構域的互作蛋白。構建O s E I L 2 過表達與干涉水稻轉基因材料，證明O s E I L 2 正調控水稻稻瘟病抗病性。綜上，本論文證明稻瘟病抗病蛋白P