羅非魚鱗膠原蛋白基抗菌凝膠的研究及在三文魚保鮮中的應用.pdf

1、我國擁有豐富的淡水魚資源，魚鱗作為水產(chǎn)品加工的主要副產(chǎn)物，大部分被加工成魚飼料或者直接丟棄，而其中豐富的膠原蛋白資源沒有能被有效的利用。膠原蛋白是生物高分子，具有天然的低毒性、生物降解性、低免疫活性、保濕性和營養(yǎng)性而廣泛地應用于食品工業(yè)、化妝品、生物醫(yī)學材料等領(lǐng)域。羅非魚是世界水產(chǎn)業(yè)重點科研培養(yǎng)的淡水養(yǎng)殖魚類，被譽為未來動物性蛋白質(zhì)的主要來源之一。本研究采用酸法提取羅非魚魚鱗膠原蛋白，并對其理化性質(zhì)進行研究，同時以魚鱗膠原蛋白凝膠為基質(zhì)

2、，分別添加牛至精油、溶菌酶和茶多酚三種天然抑菌劑制成魚鱗膠原蛋白基抗菌凝膠，探究其在三文魚保鮮中的應用，為羅非魚魚鱗膠原蛋白的開發(fā)和利用提供了理論依據(jù)，對海產(chǎn)品儲藏保鮮技術(shù)的發(fā)展具有較重要的應用前景。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1．羅非魚魚鱗基本成分測定：按照國家相關(guān)標準測得其水分含量高達47.39％，其次為粗蛋白、灰分和總鈣含量，分別約為21.57%、16.23%和13.94%，脂肪含量最少，只有0.02%左右，這種組成十分有

3、利于膠原蛋白的提取。
　　2．不同時間下酸法提取魚鱗膠原蛋白性質(zhì)差異：
　　（1）掃描電鏡觀察魚鱗結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)羅非魚魚鱗相比提取完膠原蛋白的魚鱗有完整的年輪形狀且膠原纖維層豐富細膩，說明酸法能較充分地提取羅非魚魚鱗膠原蛋白。（2）不同提取時間下魚鱗膠原蛋白的提取率：采用酸法提取羅非魚魚鱗膠原蛋白，并分析得到魚鱗膠原蛋白的提取率隨提取時間的延長先增加后減小，48 h時提取率最大，達到24.7%。
　?。?）采用紫外分析、傅

4、里葉紅外變換光譜分析、SDS-PAGE電泳分析和氨基酸組成分析檢測不同提取時間對膠原蛋白性質(zhì)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，12 h、24 h、48 h和72 h提取的蛋白質(zhì)均在230 nm左右有紫外吸收峰，在膠原蛋白的紅外特征峰處也有振動吸收峰，說明本實驗從羅非魚魚鱗中提取的蛋白質(zhì)屬于膠原蛋白；而SDS-PAGE電泳分析表明48 h提取得到的魚鱗膠原蛋白結(jié)構(gòu)保留最好；氨基酸組成分析結(jié)果也進一步證實了48 h提取的膠原蛋白羥脯氨酸含量更高，品質(zhì)更好。

5、
　　3.酸溶性魚鱗膠原蛋白理化性與毒理性研究：結(jié)果顯示提取時間為48 h的酸溶性魚鱗膠原蛋白（Acid soluble collagen scale，ASC）的變性溫度為35.23℃，乳化性與乳化穩(wěn)定性分別為48.48%和59.89%，吸濕性為0.25 g/g，起泡性與失水率分別為185.00%和41.00%，經(jīng)口毒性為LD50>5000 mg/kg，根據(jù)急性毒性分級，為實際無毒。
　　4.三種天然抑菌劑的抑菌效果探究：<

6、br>　?。?）通過96孔板法探究三種天然抑菌劑的最小抑菌濃度（minimum inhibitory concentration,MIC）和最小殺菌濃度（minimum bactericidalconcentration,MBC）：含有牛至精油、溶菌酶和茶多酚的ASC對E. coli的MIC分別為2.5μL/mL、6.25 mg/mL和0.156 mg/mL，MBC分別為2.5μL/mL、25 mg/mL和0.156 mg/ml；對S.

7、aureus的MIC分別為1.25μL/mL、12.5 mg/mL和0.156 mg/mL，MBC分別為2.5μL/mL、25 mg/mL和0.156 mg/ml；對L. monocytogenes的MIC分別為1.25μL/mL、12.5 mg/mL和0.625 mg/mL，MBC分別為1.25μL/mL、25 mg/mL和1.25 mg/ml；對V. parahemolyticus的MIC分別為0.313μL/mL、25 mg/mL

8、和0.156 mg/mL，MBC分別為0.313μL/mL、25 mg/mL和0.156 mg/ml。
　?。?）含有最小抑菌濃度的牛至精油、溶菌酶和茶多酚的ASC對E. coli的抑菌率分別為87.53%、49.26%和79.81%；對S. aureus的抑菌率分別為83.22%、51.16%和75.22%；對L.monocytogenes的抑菌率分別為75.00%、58.86%和79.08%；對V. parahemolytic

9、us的抑菌率分別為92.43%、41.73%和88.24%。
　　5.魚鱗膠原蛋白基抗菌凝膠在三文魚保鮮中的應用：在ASC中添加牛至精油、溶菌酶和茶多酚三種天然抑菌劑，采用感官評定、pH值、色差值、質(zhì)構(gòu)值、TVB-N值、菌落總數(shù)等指標檢測浸涂有不同抑菌液的三文魚在儲藏過程中的新鮮度變化。發(fā)現(xiàn)浸涂含有三種天然抑菌劑的魚鱗膠原蛋白基抗菌凝膠可以不同程度的延緩三文魚腐敗變質(zhì)的速度，綜合各項指標表明，添加牛至精油的魚鱗膠原蛋白基抗菌凝膠相