炎性因子誘導的自噬調控人胎盤MSCs對急性肺損傷治療的影響.pdf

1、急性肺損傷（ALI）的發(fā)病機制十分復雜，現(xiàn)在沒有特效的治療方案，間充質干細胞（MSCs）作為具有自我更新潛能和多向分化潛能等多功能的前體細胞，給ALI的治療帶來一條新思路。間充質干細胞的細胞特性和功能具有一定的可塑性，即隨所處微環(huán)境的不同而改變，致使其生物學功能在基礎研究和臨床應用中表現(xiàn)出復雜性和多樣性的特點。間充質干細胞在急性肺損傷炎性環(huán)境下發(fā)揮什么樣的細胞特性和功能仍有待研究。
　　目的：
　　研究在炎性環(huán)境下的MSCs

2、發(fā)生自噬對急性肺損傷治療的影響。
　　方法：
　　（1）從寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院獲取健康胎盤，根據(jù)已建立的人胎盤來源間充質干細胞分離培養(yǎng)的方法，培養(yǎng)鑒定間充質干細胞。
　?。?）應用IL-1β、IL-6、IFN-γ和 TNF-α炎癥因子處理人胎盤來源間充質干細胞，western blot檢測自噬標記蛋白LC3I/II、Atg5和Atg7表達情況；同時觀察同等處理條件下間充質干細胞的增殖情況以及自噬抑制劑3-MA處理后的增殖

3、情況。
　?。?）應用western blot檢測凋亡標志因子Caspase3、PARP1。
　?。?）利用博來霉素（BLM）制備小鼠急性肺損傷模型，尾靜脈注射感染si-NC和si-Atg7慢病毒的人胎盤來源間充質干細胞，觀察發(fā)生自噬和不發(fā)生自噬的間充質干細胞在小鼠急性肺損傷模型中的存活率；觀察間充質干細胞干預后急性肺損傷小鼠的肺組織病理改變。
　　結果：
　?。?）我們成功分離、培養(yǎng)了人胎盤來源間充質干細胞。<

4、br>　?。?）炎癥因子IL-1β、IL-6、IFN-γ和 TNF-α可誘導間充質干細胞發(fā)生自噬；其中，IFN-γ和 TNF-α誘導的自噬抑制間充質干細胞增殖；抑制IFN-γ和TNF-α誘導的自噬能夠恢復間充質干細胞的增殖。
　?。?）IFN-γ、TNF-α誘導間充質干細胞發(fā)生自噬可導致其凋亡。
　?。?）在博來霉素（BLM）誘導的小鼠急性肺損傷模型中，si-Atg7組較si-NC組，間充質干細胞存活率更高，肺組織病理改善明