銀杏保健品中銀杏酸的質(zhì)譜與色譜法快速分析研究.pdf

1、銀杏是我國特有的傳統(tǒng)植物，富含銀杏黃酮和萜內(nèi)酯等多種生物活性成分，具有很高的食、藥用價值，已被開發(fā)成各種保健品如銀杏茶、白果粉飲品等。本論文的研究對象為銀杏的主要毒性成分之一銀杏酸，具致敏性、細(xì)胞毒性和致突變毒性。歐盟和《中國藥典》分別規(guī)定銀杏葉提取物中銀杏酸含量不得超過5mg/kg和10mg/kg，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中雖未對銀杏保健品中的銀杏酸含量作出規(guī)定，但其攝入量不宜過多。為實現(xiàn)大批量銀杏保健品中銀杏酸的快速篩查和準(zhǔn)確定量，本論文開發(fā)了質(zhì)譜

2、和色譜法用于銀杏飲品中銀杏酸的分析測定，具體研究成果總結(jié)如下:
　　一、建立了實時直接分析-質(zhì)譜法(Direct Analysis in Real Time-Mass Spectrometry,DART-MS)對白果飲品中的銀杏酸進(jìn)行快速定性以及半定量分析的方法。研究影響離子化效率的因素，確定負(fù)離子模式、氦氣作為離子化氣體、樣品移動速度0.2mm/s、氣體溫度450℃為最優(yōu)條件，并進(jìn)行了方法學(xué)考察。該方法在2-50mg/L濃度范圍

3、內(nèi)線性良好，線性相關(guān)系數(shù)達(dá)0.9981，檢出限為0.5mg/L，RSD在12.5％-13.7％(n=6)之間，方法回收率為63.8％-71.2％。以GA13∶0為外標(biāo)，對銀杏葉、白果種仁、白果粉飲品中的銀杏酸進(jìn)行半定量分析并輔以二級質(zhì)譜定性，測得3種樣品中總銀杏酸含量分別為4799.4±545.3mg/kg，67.4±10.9mg/kg和26.6±2.3mg/kg。將該法和熱輔助在線衍生化-氣相色譜法的方法學(xué)參數(shù)、定量結(jié)果進(jìn)行比較，誤差

4、在合理范圍內(nèi)，說明DART-MS法適用于銀杏酸的快速測定和半定量分析。憑借其快速、實時、前處理步驟少等優(yōu)點，在大批量銀杏保健品中銀杏酸的快速篩查、定性以及半定量分析上顯示出強(qiáng)大的優(yōu)勢。
　　一、建立了熱輔助在線衍生化-氣相色譜法(Thermochemolysis-Gas Chromatography,TMC-GC)，用于銀杏保健品中銀杏酸的快速、準(zhǔn)確定量。采用甲醇對樣品粉末中的銀杏酸進(jìn)行萃取富集，萃取液與三甲基氫氧化硫(Trime

5、thylsulfonium Hydroxide，TMSH)以1∶2的比例在裂解爐300℃的高溫輔助下瞬間生成銀杏酸甲酯，由GC-FID(MS)分離測定，極大地提高了分析靈敏度。結(jié)果表明，銀杏酸GA13∶0在5-600mg/L濃度范圍內(nèi)線性良好，線性相關(guān)系數(shù)達(dá)0.9994，檢出限為1.8mg/L(S/N=3)，RSD為2.4％-2.6％(n=6)。以GA13∶0為外標(biāo)，分別測定白果種仁、白果粉飲品、銀杏葉、銀杏秋茶和春茶樣品中的7種銀杏酸

6、，總含量在31.5mg/kg-1.89×104mg/kg之間。同時，測定了銀杏秋茶和春茶中銀杏酸在沖泡90min后的溶出率分別為16％和12％，溶出量分別為1.95mg/g和2.23mg/g。白果粉飲品加標(biāo)回收率在87.1％-106.1％之間。本方法無需耗時的離線衍生化步驟，操作簡便、定量準(zhǔn)確、靈敏度高，在DART-MS法快速篩查的基礎(chǔ)上，本法可進(jìn)一步應(yīng)用于大批量樣品中銀杏酸的準(zhǔn)確、快速定量。
　　以上結(jié)果表明，本文開發(fā)的實時直接