氨基酸對映體的毛細(xì)管電泳-電化學(xué)分離檢測.pdf

1、氨基酸組成蛋白質(zhì)的基本單元，在人體及動物生命活動中起著舉足輕重的作用，自然界存在的及具有生物活性的氨基酸均為L型氨基酸，然而非天然氨基酸多為外消旋體，D型氨基酸在生理活性和實際用途與L型有很大差別，D型必須在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為L型才能被機體吸收利用，因此DL-基酸的分離是生命科學(xué)研究的基礎(chǔ)，在蛋白質(zhì)多肽的研究、有機化學(xué)中的不對稱合成以及醫(yī)藥、食品、衛(wèi)生等領(lǐng)域的研究中都具有重要意義。采用通常的氣相色譜和液相色譜法拆分，制備手性固定相和色譜柱費用昂

2、貴，大多數(shù)氨基酸沒有紫外吸收峰、不產(chǎn)生熒光，一般需要柱前樣品衍生化。衍生化過程不僅費時繁瑣，而且有可能使分析物質(zhì)發(fā)生改變，影響分析結(jié)果。高效毛細(xì)管電泳由于其高效、快速、樣品用量少、操作簡單等優(yōu)點，成為生物化學(xué)和分析化學(xué)中最受矚目，發(fā)展最快的一種分離分析新技術(shù)，已被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、手性分離和環(huán)境檢測等領(lǐng)域。電化學(xué)檢測作為一種靈敏度高，選擇性好的檢測方法在毛細(xì)管電泳分離分析中得到了廣泛的應(yīng)用，電導(dǎo)檢測具有通用性，對于氨基酸無須進(jìn)行衍生化

3、即可檢測，操作簡單，運行成本低。本論文采用了毛細(xì)管電泳－電導(dǎo)檢測分別對異亮氨酸和組氨酸進(jìn)行了分離檢測，并對其分離機理進(jìn)行了初步的探討。 本論文包括三個部分，主要內(nèi)容如下： 第一章回顧和評述了毛細(xì)管電泳的發(fā)展歷史；詳細(xì)介紹了毛細(xì)管電泳的基本原理；概述了毛細(xì)管電泳檢測的各種方法，特別對電化學(xué)檢測的各種方法及其最新應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行了詳細(xì)的介紹；重點介紹了氨基酸的分離檢測方法和毛細(xì)管電泳在氨基酸的手性分離的應(yīng)用和研究進(jìn)展；并闡述了本

4、課題的研究背景和意義。 第二章在熔融石英毛細(xì)管(50μmi.d.×50cm)中，銅鹽和羥丙基甲基纖維素作為二元協(xié)同手性選擇劑，以2mmol/LNaAC+3mmol/LHAc+1mmol/LCu+10mg/LHPMC(pH=3.5)為電泳運行液，分離電壓15.0kV，建立了異亮氨酸對映體的毛細(xì)管電泳分離-電導(dǎo)檢測的分析新方法。異亮氨酸對映體獲得良好的基線分離，其線性范圍為3～500mg/L，檢出限(S/N=3)為1mg/L。對影響

5、分離度的影響因素：電泳運行液組成，手性選擇劑、HPMC濃度等進(jìn)行了詳細(xì)的討論。本方法具有較好檢測靈敏度及重現(xiàn)性，操作簡便，分析成本低，可發(fā)展于實際樣品的分析應(yīng)用。 第三章采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳-電導(dǎo)法，以銅-L-精氨酸作為配基交換選擇劑，在2mmol/LNaOH+0.4mmol/LCit+1.3mmol/LCu+2.6mmol/LL-Arg(pH=10.2)運行液中，采用電動進(jìn)樣，進(jìn)樣電壓9.0kV，進(jìn)樣時間10s，分離電壓15.0