2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:(1)建立單獨配制溶劑系統(tǒng)的固定相和流動相的新方法,并將之用于天然產(chǎn)物的高速逆流色譜(High-speed counter-current chromatography.HSCCC)分離純化;(2)采用J型HSCCC系統(tǒng)和反膠團溶劑體系對活性天然蛋白進(jìn)行分離純化。
   方法:(1-1)氣相色譜(GC)輔助單獨配制溶劑系統(tǒng)。采用GC色譜和內(nèi)標(biāo)法測定傳統(tǒng)配制的固定相和流動相中各有機溶劑的含量,利用質(zhì)量參數(shù)計算水的含量。根據(jù)測

2、定結(jié)果分別計算固定相和流動相中各溶劑的體積分?jǐn)?shù),再單獨配制兩相溶劑,并將該法用于黃連(Coptis chinensisFranch)生物堿的分離純化。(1-2)UNIFAC數(shù)學(xué)模型-逆流色譜溶劑系統(tǒng)選擇(CCC-SSS)軟件單獨配制溶劑系統(tǒng)。根據(jù)UNIFAC數(shù)學(xué)模型計算各溶劑在溶劑系統(tǒng)上下相中的活度系數(shù)和摩爾百分比,再結(jié)合各試劑的密度和分子量計算出各試劑在上下相中的體積含量,以此來單獨配制兩相溶劑。并將該法用于穿山龍(Dioscorea

3、 nipponica Makino)和竹葉(Lophatherum gracile)中活性成分的分離純化。(2)采用兩性表面活性劑和有機溶劑建立的反膠團溶液為固定相,磷酸鈉鹽緩沖液為流動相,對來自菠蘿和螺旋藻中的菠蘿蛋白酶和藻藍(lán)蛋白進(jìn)行分離純化。
   結(jié)果:(1-1)在HSCCC分離純化黃連生物堿的過程中,使用GC輔助單獨配制的氯仿-甲醇-水(2:1:1,v/v/v)兩相溶劑系統(tǒng)成功分離出黃連堿、小檗堿、巴馬汀、表小檗堿和藥根

4、堿五種生物堿,其純度和回收率均分別大于98.5%和92.0%。在進(jìn)行等效HSCCC分離時,與傳統(tǒng)的溶劑配制方法相比,可以節(jié)約134mL氯仿、336mL甲醇和452mL水。(1-2)采用UNIFAC數(shù)學(xué)模型單獨配制的正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水(2:5:2:5,v/v/v/v)成功用于穿山龍中薯蕷皂苷的分離制備;用此法單獨配制的乙酸乙酯-正丁醇-水(2:1:3,v/v/v)成功的從竹葉中分離純化了槲皮素-3-O-葡萄糖苷。此法與傳統(tǒng)的溶劑系

5、統(tǒng)配制方法相比,分離效率相當(dāng),但節(jié)省了有機溶劑。(3)采用(0.1mol/LCTAB/正辛烷-止己醇)反膠團溶液做固定相,以流動相A(0.05mol/LNaH2PO4,pH=7.0,0.2mol/LKCl)進(jìn)行溶劑系統(tǒng)的動態(tài)平衡,流動相B(0.05mol/LNaH2PO4,pH=7.0,0.4mol/LKCI)進(jìn)行洗脫,成功的從菠蘿粗蛋白中分離出達(dá)到電泳純和質(zhì)譜純的菠蘿蛋白酶,回收率高達(dá)88.4%;同樣采用反膠團溶液(0.1mol/LC

6、TAB/正辛烷-正己醇)做固定相,流動相A(0.05mol/LNaH2PO4,pH=5.0,0.2mol/LKCl)和流動相B(0.05mol/LNaH2PO4,pH=8.0,0.4mol/LKC1)成功的從螺旋藻粗蛋白中分離出藻藍(lán)蛋白,產(chǎn)物純度為A620/A280=4.25,回收率約85%。
   結(jié)論:(1)我們對新建的單獨配制模式配制的溶劑系統(tǒng)與傳統(tǒng)模式配制的溶劑系統(tǒng)在HSCCC分離過程中的固定相保留率、分離時間、固定相和

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