構建金納米比色法和免疫分析法檢測環(huán)境和食品中的農(nóng)藥殘留.pdf

1、在農(nóng)作物的生長過程中，農(nóng)藥經(jīng)常被用作預防及控制蟲害和雜草。農(nóng)藥的使用極大地提高了農(nóng)作物的產(chǎn)量，然而過量或者其他不恰當?shù)氖褂棉r(nóng)藥，導致殘留的農(nóng)藥最終會流入水中、土壤中、甚至揮發(fā)到大氣中經(jīng)呼吸道進入人體，這將會嚴重影響人類和其他生物的生命健康。目前大部分的檢測技術都依賴于大型儀器，儀器價格昂貴，樣品前處理繁瑣，樣品分析時間長并且需要專業(yè)人士操作。因此，發(fā)展不依賴于大型儀器的農(nóng)藥殘留的快速檢測新技術，具有重大意義。本論文采用比色法和免疫分析法

2、，研究并建立了環(huán)境和食品中的農(nóng)藥殘留的快速檢測新技術，取得了較為滿意的結果。具體研究內(nèi)容如下：
　　1.利用對氨基苯甲酸（PABA）修飾的金納米粒子對殺螟丹進行了比色法檢測。實驗發(fā)現(xiàn)，由于修飾于金納米表面的對氨基苯甲酸中的羧基基團能與殺螟丹中的氨基基團形成氫鍵，誘導金納米粒子聚集，引起其光譜變化并伴隨溶液顏色變化，據(jù)此建立了檢測殺螟丹的紫外-可見分光光度法及比色法。殺螟丹裸眼檢測限為0.15 mg/L，利用紫外可見光譜進行定量分析

3、，殺螟丹在0.08~0.7 mg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關系，檢測限為0.02 mg/L。對環(huán)境水樣中的殺螟丹進行檢測，加標回收率為101％~107%之間，相對標準偏差在2.1%~4.7%之間。
　　2.利用對氨基苯甲酰胺（P-AMIDE）修飾的金納米粒子對殺草強進行了比色法檢測。實驗發(fā)現(xiàn)，由于金納米粒子表面的配位劑對氨基苯甲酰胺通過氨基基團與殺草強中的氨基形成氫鍵，誘導金納米子粒子發(fā)生聚集，使得溶液由酒紅色變成藍色，從而建立了可視

4、化檢測殺草強的方法。AuNPs的聚集程度與殺草強濃度呈正相關。本方法對環(huán)境水樣中的殺草強進行檢測，裸眼檢測限為0.10 mg/L，儀器檢測限為0.023 mg/L，殺草強濃度在0.10~0.95 mg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關系。
　　3.采用傅克反應對氯吡脲（CPPU）小分子進行結構改造，合成氯吡脲半抗原。再采用碳二亞胺（EDC）法將半抗原分別與牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）進行偶聯(lián)，獲得氯吡脲免疫抗原（CPPU-BS

5、A)和檢測抗原（CPPU-OVA）。采用質(zhì)譜、元素分析和核磁共振氫譜對氯吡脲半抗原的結構式和分子式進行鑒定；采用紫外光譜和高性能基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時間質(zhì)譜對偶聯(lián)物的結構和相對分子質(zhì)量進行鑒定。結果顯示成功合成出氯吡脲人工抗原，用氯吡脲免疫抗原來免疫新西蘭大白兔，結果表明氯吡脲免疫抗原能夠刺激大白兔產(chǎn)生特異性較好的抗氯吡脲多克隆抗體，因而建立了基于多克隆抗體的間接競爭ELISA法檢測臍橙中的氯吡脲。該法IC50為48 ng/mL，