生物體內(nèi)乙醇脫氫酶（ADH）的活力測(cè)定、分布及其與乙醇代謝動(dòng)力學(xué)的關(guān)系.pdf

1、乙醇(alcoh01)俗稱酒精，是各種酒類飲料的主要成分，是世界范圍內(nèi)被普遍濫用的一種物質(zhì)。由此造成了許多暴力死亡和交通事故的發(fā)生。在這些情況下都需對(duì)血液中的乙醇濃度(blood alcohol concentration,BAC)進(jìn)行測(cè)定，而BAC的檢測(cè)結(jié)果是正確處理與乙醇有關(guān)的事(案)件的主要依據(jù)。飲酒后BAC與乙醇代謝動(dòng)力學(xué)密切相關(guān)，而乙醇代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)又與乙醇脫氫酶(alcohol dehydrogenase，ADH)的活力密切

2、相關(guān)。 本研究采用了頂空-氣相色譜(head space gas chromtography，HS-GC)條件測(cè)定ADH活力。對(duì)ADH的最適反應(yīng)條件、反應(yīng)終止液的濃度和用量、乙醇的相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行了考察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ADH的最適反應(yīng)條件為，最適pH值9.0，反應(yīng)物乙醇的最適濃度為20.0mmol/L，反應(yīng)物NAD的最適濃度為10.0mmol/L；最佳反應(yīng)終止液為十二烷基磺酸鈉。 應(yīng)用前文的HS-GC法，以健康Wistar大鼠

3、為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，對(duì)不同實(shí)驗(yàn)組大鼠的乙醇代謝動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，隨著反復(fù)飲酒時(shí)間的延長(zhǎng)，同空白組大鼠的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)進(jìn)行比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠的(1)總消除速率常數(shù)、滯后時(shí)間、尿藥排泄速率常數(shù)、清除率、吸收速率常數(shù)升高；(2)達(dá)峰時(shí)間、達(dá)峰濃度、藥時(shí)曲線下面積降低。(3)最適房室數(shù)與權(quán)重變化不明顯。 為了考察ADH在大鼠不同組織中的分布與活力變化規(guī)律，應(yīng)用前文HS-GC測(cè)定方法，對(duì)各實(shí)驗(yàn)組大鼠的血清、肝臟，胃黏膜，及小腸組織中ADH活力

4、進(jìn)行了測(cè)定；并進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，(1)隨著飲酒時(shí)間的延長(zhǎng)，大鼠小腸組織中ADH活力變化不明顯；胃黏膜組織ADH的活力下降；肝臟組織中ADH活力上升；血清中ADH活力雖然也上升，但在初期變化不明顯；(2)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，每組的不同組織之間的ADH活力，無論總體、還是兩兩之間進(jìn)行的比較，結(jié)果均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)：胃黏膜、血清、肝臟三種組織在不同組之間進(jìn)行總體比較時(shí)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異(P<0.05)；而小腸組織無統(tǒng)

5、計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 為了考察ADH與代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系，應(yīng)用前文的HS-GC測(cè)定方法，測(cè)定了不經(jīng)常飲酒與經(jīng)常飲酒志愿者血清中ADH的活力，并整理本課題組已研究的代謝動(dòng)力學(xué)資料，結(jié)果表明，志愿者血清中ADH活力和動(dòng)力學(xué)參數(shù)的變化規(guī)律同實(shí)驗(yàn)組大鼠相似；找出其中變化規(guī)律相似的大鼠藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，并將其與大鼠血清ADH活力值進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果表明，大鼠血清ADH活力值同總消除速率常數(shù)K、達(dá)峰濃度C<,max>、藥時(shí)曲線下面