介觀流控-閥上實驗室系統(tǒng)光度法定量分析蛋白質的研究.pdf

1、蛋白質是重要的生命物質,在生命活動過程中具有極其重要的功能,準確、快速地測定蛋白質的含量在生化、藥物、食品及臨床分析中具有重要意義。本論文的研究目的是結合介觀流控-閥上實驗室以及固體表面熒光技術,探索準確、靈敏、快速的蛋白質定量分析方法。
　　 論文首先結合微順序注射分析技術,以剛果紅為顯色劑,在介觀流控-閥上實驗室系統(tǒng)中建立了一種自動、準確、快速的在線蛋白質定量分析過程。利用LOV的自動介觀流控特征,有效地減少了分析過程中樣品

2、和試劑的消耗,提高了分析速度,避免了操作過程中樣品的交叉污染。在進樣體積為20.0μl,試劑消耗量為4.0μl的條件下,方法的線性范圍為12.5～200μg ml-1,檢出限為5.6μg ml-1(3σ),相對標準偏差為1.9％(50μg ml-1,n=11);分析頻率可達到60 h-1。對健康人血清、尿樣、市售乳飲料、酸奶中的蛋白質分析測定結果與考馬斯亮藍法結果相符。
　　 固相萃取技術是樣品預處理中最常用的方法之一,對分離純

3、化后的組份進行定量分析,可以驗證所建立的分離純化體系的效率,常規(guī)的洗脫后再定量的檢測方式由于引入洗脫劑會引起吸附后的組份發(fā)生形態(tài)變化或結構轉變,使分析結果產(chǎn)生不可避免的誤差。原位光譜檢測技術如固體表面熒光方法,是根據(jù)固相表面吸附前后表面光譜性質、強度的變化與吸附物濃度的關系對吸附組份進行原位實時定量檢測,無需引入洗脫劑,消除了溶劑效應,保證了樣品的原始性。本論文以硅膠為吸附材料,以鄰苯二甲醛為熒光探針,采用固體表面熒光方法對固相萃取過程