毛細管電泳-紫外聯(lián)合電導(dǎo)檢測器同時測定連翹中活性成分的研究.pdf

1、連翹（Forsythiae Fructus），是木犀科（Oleaceae）連翹屬（Forsythia）植物的果實，是一種傳統(tǒng)的中草藥。根據(jù)采摘季節(jié)的不同，連翹又可以被分為青翹和老翹，二者都具有清熱解毒，抗菌消炎的功效。在以往的研究中，人們更多的是通過連翹的主成分來研究其藥理藥效作用，然而，藥理學(xué)表明，連翹中所含有的三種重要的微量成分——三萜酸（齊墩果酸、熊果酸和白樺脂酸）與連翹的抗菌消炎的作用有著直接的關(guān)系。并且，三萜酸也具有其各自獨特

2、的藥理藥效作用。因此，為了更加全面的評價以及有效的利用野生青翹和老翹資源，本課題重點討論和研究了三萜酸在連翹中含量以及含量與連翹產(chǎn)地和采摘季節(jié)的關(guān)系。鑒于這三種三萜酸互為同分異構(gòu)體，在眾多的分離方法中，毛細管電泳技術(shù)因其高效快速，分離能力強，對實際樣品檢測時，樣品前處理簡單等優(yōu)勢，被廣泛的應(yīng)用于各類物質(zhì)的分離。同時，連翹中所含有的金屬元素對連翹的藥理藥效作用也起到了不可忽視的作用。本課題旨在開發(fā)快速、簡單的三萜酸的毛細管電泳-紫外檢測方

3、法，以連翹中三萜酸的含量為指標(biāo)，采用化學(xué)計量學(xué)的方法對不同地域和采收季節(jié)的連翹進行評價；同時采用毛細管電泳-非接觸電導(dǎo)檢測器開發(fā)了三種微量元素的分析方法，并重點討論了電導(dǎo)檢測器在金屬離子檢測中出現(xiàn)正負峰的原因。
　　第一章介紹的毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和基本原理、連翹的研究進展、β-環(huán)糊精在異構(gòu)體拆分過程中的基本理論以及化學(xué)計量學(xué)的基礎(chǔ)知識。其中，重點對三萜酸分離的不同色譜方法進行綜述，在對比中突出了毛細管電泳對三萜酸拆分的優(yōu)勢。提出

4、了毛細管電泳應(yīng)用于三萜酸的分離與定量對連翹質(zhì)量評價的良好應(yīng)用前景。
　　第二章對三種三萜酸的毛細管電泳-紫外檢測的方法進行開發(fā)，通過對背景電解質(zhì)和拆分劑的種類、濃度進行考察，重點討論了β-環(huán)糊精在三種三萜酸分離過程中的拆分機理，成功計算得到了三種三萜酸與β-環(huán)糊精的結(jié)合常數(shù)，進一步指導(dǎo)了三萜酸的拆分。最終確立了最佳的電泳分離條件為50 mmol/L的硼砂，0.5 mmol/L的β-環(huán)糊精，在pH值為9.5的條件下，齊墩果酸、熊果酸

5、和白樺脂酸實現(xiàn)了基線分離。方法的精密度良好（遷移時間和峰面積的RSD均小于5.0％），在5μg/mL至80μg/mL的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，檢出限達到1.28-1.76μg/mL。本章中三萜酸的分離無需任何衍生手段，具有很強的通用性。
　　第三章基于最佳的三萜酸的分離條件，對來自全國12個產(chǎn)地的19種連翹樣品中的三萜酸進行檢測和定量。再以三種三萜酸的含量為指標(biāo)，采用層序聚類分析和主成分分析的方法對連翹樣品的地域以及采收時間進

6、行了科學(xué)的評價，研究得到的一些結(jié)論表明，青翹中三萜酸的含量較老翹中的含量普遍較高，且熊果酸是三種三萜酸中含量最高的成分，白樺脂酸在所有老翹中均得到了檢出。本方法對連翹的質(zhì)量監(jiān)控提供了新的思路和方法。
　　第四章建立了毛細管電泳-非接觸電導(dǎo)檢測法對連翹中三種金屬元素（Mg2+、Zn2+、Cu2+）的檢測方法。本方法分析速度快、成本低廉，較傳統(tǒng)的原子吸收法具有極強的優(yōu)勢。同時，通過研究背景電解質(zhì)的組成變化、pH改變等因素，結(jié)合理論知識