人類SRY基因啟動(dòng)子不同模塊的功能及SRY蛋白的自我調(diào)控作用研究.pdf

1、該文采用報(bào)告基因分析的方法,構(gòu)建了SRY基因5'旁側(cè)具有啟動(dòng)效應(yīng)的544bp以內(nèi)不同長(zhǎng)度片斷與熒光素酶報(bào)告基因載體pGL<,2>-Enhancer的重組子,并通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)導(dǎo)入Hela細(xì)胞,檢測(cè)其瞬間表達(dá),由此分析啟動(dòng)子不同模塊對(duì)基因轉(zhuǎn)錄效率的影響.結(jié)果顯示:位于起始密碼子ATG上游-353~-174之間的179bp片斷內(nèi)含有某種抑制子元件,-112~-63之間的49bp片斷內(nèi)含有某種增強(qiáng)子元件,而-174~-112之間的63bp片

2、斷中包含有基因轉(zhuǎn)錄所必需的啟動(dòng)子序列.其具體的作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究.另外,544bp SRY啟動(dòng)子片斷中包含有數(shù)個(gè)潛在的SRY蛋白結(jié)合位點(diǎn),為研究SRY蛋白是否具有自身反饋調(diào)節(jié)作用,該文構(gòu)建了SRY蛋白的真核表達(dá)載體SRYpcDNA3,與544bp SRY啟動(dòng)子片段的報(bào)告基因載體pGL544共轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,檢測(cè)pGL544的轉(zhuǎn)錄活性是否有改變.結(jié)果顯示:SRY蛋白可以輕度激活其自身啟動(dòng)子的活性,提示SRY蛋白可能正調(diào)控其自身的表達(dá)