稀土熒光配合物修飾去鐵蛋白的制備與應(yīng)用.pdf

1、碩士學(xué)位論文稀土熒光配合物修飾去鐵蛋白的制備與應(yīng)用P r e p a r a t i o na n d A p p l i c a t i o no f L u m i n e s c e n t L a n t h a n i d eC o m p l e x - ·M o d i f i e dA p o f e r r i t i n學(xué) 號(hào)： 2 1 Q Q Z Q 星壘大連理工大學(xué)D a l i a n U n i v

2、 e r s i t y o f T e c h n o l o g y大連理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘 要基于稀土熒光生物探針的長(zhǎng)壽命熒光特性而發(fā)展起來(lái)的高靈敏度時(shí)間分辨熒光生化分析技術(shù)可有效消除來(lái)自生物體樣品的背景熒光干擾，已經(jīng)在臨床診斷與生物技術(shù)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。然而，由于稀土熒光生物標(biāo)記物都存在生物親和性的問(wèn)題，一定程度上限制了其在時(shí)間分辨熒光生化分析技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用。本碩士論文研究利用將E u ( I I I ) 、E u ( I

3、 I I ) ／T b ( I I I ) ( E u ：T b = l ：1 ) 及T b ( 1 1 1 ) 與配體4 ’．苯基．2 ，2 ’：6 ”，2 ”．聯(lián)三吡啶．6 ，6 ”．二甲胺四乙酸的熒光配合物包裹進(jìn)去鐵蛋白中的方法，制備出了可發(fā)出紅、橙、綠系列熒光顏色的稀土配合物修飾蛋白質(zhì)。這種修飾蛋白質(zhì)不僅保持了去鐵蛋白的外部結(jié)構(gòu)，同時(shí)還保持了稀土熒光配合物的發(fā)光性質(zhì)。為了驗(yàn)證修飾蛋白可以作為生物標(biāo)記探針用于時(shí)間分辨熒光生化測(cè)定中

4、，將包裹了稀土配合物的去鐵蛋白與鏈霉親和素( S A ) 共價(jià)鍵合后用于人前列腺特異抗原( P S A ) 的時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定。結(jié)果表明，S A 經(jīng)蛋白標(biāo)記后依然保持了良好的生物反應(yīng)活性，可用于人P S A 的高靈敏度免疫測(cè)定。另外，包裹了稀土配合物的去鐵蛋白還被成功地用于人宮頸癌細(xì)胞( H e L ac e l l s ) 的時(shí)間分辨熒光成像測(cè)定。上述結(jié)果表明，包裹了稀土熒光配合物的去鐵蛋白可作為一種熒光探針用于時(shí)間分辨熒光生化測(cè)