基于糖組學的核心蛋白聚糖的糖胺聚糖結構序列研究.pdf

1、曼，澎爐z角矢乎博士學位論文論文題目：基于糖組學的核心蛋白聚糖的糖胺聚糖結構序列研究合作導師：ProfRobertJLinhardt提交日期：2018年1月基于糖組學的核心蛋白聚糖的糖胺聚糖結構序列研究摘要糖組學代表組學研究的最前沿，也最具挑戰(zhàn)性。目前，糖組學的發(fā)展未跟上快速發(fā)展的基因組學和蛋白組學研究的腳步，主要原因是糖鏈結構的復雜性及缺乏有效的鑒定糖序列的分析方法。糖基化通常發(fā)生在高爾基體和內質網(wǎng)，根據(jù)基因組學和蛋白組學方法，不能研

2、究透徹或預測糖基化過程。蛋白聚糖(proteoglycans，PGs)及其側鏈上的糖胺聚糖(glycosaminoglycans，GAGs)是其中一種結構最復雜的糖復合物。2011年Nature子刊NatureChemicalBiology首次發(fā)表蛋白聚糖雙庫尼茨抑制劑(bikunin)的糖胺聚糖全序列結構，也是迄今唯一結構鑒定的糖胺聚糖，本文在此基礎上研究結構更復雜的蛋白聚糖核心蛋白聚糖(decorin)的糖胺聚糖全序列結構。核心蛋白

3、聚糖從來源豐富的豬皮中通過檸檬酸鈉提取，利用非特異性蛋白酶actinaseE完全酶解蛋白質，通過D一消除反應除去還原性末端殘留的氨基酸殘基，得到糖胺聚糖。應用一系列分析方法包括聚丙烯酰胺凝膠電泳，凝膠滲透色譜，核磁共振和高效液相色譜一串聯(lián)質譜鑒定提取的糖胺聚糖純度和初級結構，并測定其體外抗凝血活性。結果顯示decorin糖胺聚糖平均分子量為22kDa，鏈長范圍為聚合度dpl4一dp290，平均聚合度為dp92，平均每個二糖重復單元(己糖