微分離系統(tǒng)中整體-混合毛細管色譜柱的制備與性能評價方法研究.pdf

1、液相色譜-質譜聯(lián)用技術(Liquid chromatography-mass spectrometry，LC-MS)是結合了色譜的分離及質譜的定性分析性能于一體的一種分析方法。LC-MS技術具有很高的選擇性、靈敏度、分離度和分析速度。近年來，隨著LC-MS新技術的不斷發(fā)展和完善，該技術已經(jīng)成為現(xiàn)代分析手段中不可缺少的組成部分，是小分子藥物、復雜生物樣本中多肽、蛋白質定性、定量分析的有力工具。
　　 本論文首先研究了毛細管整體柱的

2、制備方法。采用甲基丙烯酸月桂酯作為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，十二醇、1，4-丁二醇及二甲亞砜混合物為致孔劑，在內徑為75μm、不同長度的石英毛細管內制備了具有良好機械性能和化學穩(wěn)定性的反相毛細管整體柱，并對所合成的毛細管整體柱進行了電鏡表征、流速測定、柱長與柱壓的變化關系分析，表明毛細管整體柱的通透性良好，柱壓低。因此，可通過延長柱長的方法進一步提高其分離度。將所制備的毛細管整體柱裝于高效液相色譜儀上進行牛血清白蛋白和血漿

3、樣本的胰酶酶解液的分離，表明所制備的毛細管整體柱可以滿足一般多肽混合物的分離分析。
　　 在以上研究的基礎上，制備了一種應用于液-質聯(lián)用系統(tǒng)中的帶尖頭的新型混合型色譜柱。在毛細管噴頭部位制備長度約為1 cm的反相毛細管整體填料作為篩板，然后在該毛細管色譜柱的其余部分，采用勻漿裝柱法填充顆粒度為5μm的C18硅膠填料(Octadecylsilyl，ODS)，再將其裝于LC-MS系統(tǒng)中，以標準蛋白、酵母蛋白為分析對象，考察其在LC-