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文檔簡介
1、毛細管電動微分離方法包括毛細管電泳(CE)和毛細管電色譜(CEC)。本文針對CE和CEC在生物物質如蛋白質、氨基酸等分離應用中存在的問題,提出了相應的解決方法。
首先針對蛋白質CE中蛋白質尤其是堿性蛋白質與管壁硅羥基非特異性吸附這一問題,制備了新型的聚乙烯醇涂層毛細管柱。制得的管柱可有效屏蔽蛋白質與管壁的非特異性吸附,分離柱效一般在600000理論板/米以上,且具有較好的分離結果重現(xiàn)性。例如,對三種堿性蛋白質進行100次分
2、離得到的保留時間的相對標準偏差均小于1.0%。
提出了兩端進樣蛋白質CE方法。該方法可在中性pH值的條件下,通過一次CE操作,同時分離帶有正電荷和負電荷的蛋白質。此外,進一步提出了電滲泵輔助式蛋白質CE方法,該方法同時分離帶正電荷、負電荷和不帶電的蛋白質。
針對開管CEC(OTCEC)低相率、低配基容量這一缺點,本文提出了采用觸須式聚合物作為OTCEC固定相的設想,研制了金屬螯合觸須式聚合物涂層管柱,并將其用
3、于氨基酸及嘌呤類衍生物的微分離。與單層配基修飾管柱相比,觸須柱的金屬離子螯合量提高了近900倍,可顯著增加分析物的保留因子和分離度。
為建立適用于修飾各種色譜配基的觸須式聚合物涂層管柱,本文研制了以甲基丙烯酸縮水甘油酯為接枝聚合單體的管柱制備方法。制得的管柱內壁含有大量環(huán)氧基,可用于修飾各種色譜配基。以苯丙氨酸為修飾配基,將制得的苯丙氨酸觸須柱用于苯類化合物、氨基酸混合物以及蛋白質混合物的微分離。
針對毛細管
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