食品中人工合成色素的毛細管電泳分離檢測研究

1、食品中人工合成色素的毛細管電泳分離檢測研究蔣奕修謝天堯（中山大學化學與化學工程學院分析化學研究所廣東廣州510275）摘要建立了毛細管電泳電導法分離檢測食品中人工合成色素檸檬黃和日落黃的分析新方法.采用CZE模式以未涂層融硅石英毛細管（50cm50m）為分離柱10mmolLTris10mmolLH3BO30.2mmolLEDTA0.2%四乙烯五胺為電泳運行液分離電壓15.0kV檸檬黃和日落黃在11分鐘內(nèi)獲得基線分離.檢出限分別為9.81

2、0－7molL和1.1107molL.應用于市售飲料中檸檬黃和日落黃的測定取得滿意結(jié)果.關鍵詞毛細管電泳電導檢測食品分析合成色素檸檬黃日落黃1前言在食品中添加著色劑是為了改善食品的色澤增加人們的食欲同時也為了提高其價值食品著色劑可分為天然色素和人工合成色素人工合成色素色澤艷麗不易褪色價格低廉.食用合成色素多以苯、甲苯、萘等化工產(chǎn)品為原料經(jīng)過磺化、硝化、偶氮化等一系列有機反應化合而成有的還含有β萘胺和α氨基萘酚等致癌物.近年來某些作為食品

3、添加劑的合成色素已證實具有慢性毒性可以導致生育力下降、畸胎等.有些色素在人體內(nèi)可能轉(zhuǎn)換成致癌物質(zhì).例如人造奶油著色的奶油黃已被證實可以導致人和動物患上肝癌而其它種類的合成色素如橙黃能導致皮下肉瘤、肝癌、腸癌和惡性淋巴癌等.目前國際國內(nèi)的食品安全監(jiān)督機構(gòu)已出臺了相應的法規(guī)來嚴格控制其使用范圍和使用量.我國準許使用的人工合成色素有11種.“蘇丹紅”事件的爆發(fā)正是國際社會對食品安全問題高度重視的結(jié)果[14].因此建立靈敏、快速、簡便的測定食品

4、中人工合成色素的分析新方法具有重要的學術研究意義和實際應用價值.目前報道的有關食品色素檢測的方法有:高效液相色譜法[5]導數(shù)分光光度法[6]示波極譜法[7]單掃描極譜法[8]伏安法[9]和TLC[10]等.尚未見采用高效毛細管電泳電化學檢測報道.本文采用毛細管電泳電導檢測以10mmolLTris10mmolLH3BO30.2mmolLEDTA0.2%四乙烯五胺為電泳介質(zhì)CZE分離模式建立了同時測定日落黃、檸檬黃2種常見的人工合成色素（結(jié)

5、構(gòu)式如圖1所示）的分離分析新方法具有快速、簡便的優(yōu)點并應用于市售飲料中上述成分的檢測取得較滿意的結(jié)果.基金項目:中山大學化學與化學工程學院第六屆創(chuàng)新化學實驗與研究基金，基金編號:200612作者簡介:蔣奕修，中山大學化學與化學工程學院02級化學專業(yè)?通訊聯(lián)系人:謝天堯，Email:－HAc－TEPA、Tris－Cit－TEPA、Tris－H3BO3－TEPA、Tris－H3BO3－TEPA－EDTA等多種緩沖體系結(jié)果表明:以Tris－H

6、3BO3－TEPA－EDTA體系為運行液基線平穩(wěn)分離度和靈敏度最佳其中四乙烯五胺作為電滲流抑制劑[11].在固定四乙烯五胺濃度為0.2%H3BO3濃度為10mmolL的前提下通過加入Tris（2～15mmolL）來調(diào)節(jié)緩沖溶液的pH結(jié)果表明:pH較低時峰形有所重疊當pH為8～9之間可獲得滿意的分離度.同時發(fā)現(xiàn)在該體系中加入EDTA能夠使基線更快達到穩(wěn)定.綜合考慮分離效果和基線情況本文選擇的電泳運行液體系為:10mmolLTris10mm

7、olLH3BO30.2mmolLEDTA0.2%TEPA.3.2進樣方式的選擇比較重力進樣和電動進樣兩種方式電動進樣的檢測靈敏度比重力進樣約高6倍.這是由于當樣品溶于比電泳運行液低得多的溶液中在電動進樣時電場會基本加在樣品與管口之間當離子從高電場突然進入低電場時會因減速而堆集在電場交界處導致區(qū)帶縮短、濃度提高得到電堆積效果進而提高檢測靈敏度.檸檬黃和日落黃在水中有一定溶解度，并呈現(xiàn)陰離子形式存在[12]故可通過電堆積進樣來改善靈敏度.本

8、文采用電動進樣方式進樣參數(shù)為10.0kV5s.3.3進樣電壓在分離電壓為15.0kV的條件下結(jié)果表明:進樣電壓（9.0～11.5KV）的改變對分離監(jiān)測的影響.進樣電壓越低檸檬黃和日落黃的峰中間出現(xiàn)雜質(zhì)峰進樣電壓越高檸檬黃和日落黃的峰出現(xiàn)拖尾.在進樣電壓為－10.0kV的情況下檸檬黃和日落黃的分離情況最佳.3.4進樣時間進樣時間決定進樣量進樣太少達不到檢測靈敏度進樣太多容易引起區(qū)帶展寬分離度變差本實驗采用進樣時間5s.3.5樣品處理的影響

9、樣品加熱除去CO2再經(jīng)過0.22μｍ微孔濾膜過濾后直接進樣測出的色素峰較低原因是樣品pH值接近3使得色素大部分以中性分子形式存在降低了電遷移進樣量從而影響了色素的檢測靈敏度.為此將上述樣品用0.6molLTris調(diào)節(jié)至pH值等于8后進樣靈敏度提高6倍.故本實驗中樣品采用上述前處理方法.3.6線性范圍、檢出限和重現(xiàn)性在上述選定的實驗條件下對標準檸檬黃和日落黃進行測定毛細管電泳譜圖如圖2所示。對標準濃度系列的檸檬黃和日落黃進行了測定濃度與電