高效液相色譜測(cè)定米糠中水溶性維生素

1、1高效液相色譜法測(cè)定米糠中的水溶性維生素高效液相色譜法測(cè)定米糠中的水溶性維生素（江南大學(xué)化工與材料工程學(xué)院，江蘇無(wú)錫214122）摘要摘要：高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定米糠中四種水溶性維生素VB1，VB6，煙酸，煙酰胺的含量。在HypersilC18（250cm4.6mmi.d.5.0μm）上，以體積比為88:12的0.1％磷酸水溶液甲醇為流動(dòng)相，以0.6mLmin流速等度洗脫，在266nm波長(zhǎng)下檢測(cè)。各組分在8min能基線分離。四種維生素在

2、0.6106gmL～8.5105gmL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，VB1、VB6、煙酸和煙酰胺的檢出下限分別為0.43106gmL、0.34106gmL、0.32106gmL、0.30106gmL。經(jīng)簡(jiǎn)單預(yù)處理，可以對(duì)米糠和淘米水中的這四種維生素的含量進(jìn)行測(cè)定，平均回收率在96.0％～99.9％之間。該法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、靈敏，對(duì)復(fù)雜體系水溶性維生素的測(cè)定具有重要的參考價(jià)值。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞：水溶性維生素；米糠；高效液相色譜Determination

3、offourwatersolublevitaminsinricebranbyreversephasehighperfmanceliquidchromatographyCAORuiCAOYuhuaLINanGONGWenjunKONGLingyaoWANGYunSchoolofChemicalMaterialEngineeringSouthernYangtzeUniversityWuxi214122Abstract:Highperfman

4、celiquidchromatography(HPLC)hasbeenappliedfthesimultaneousdeterminationoffourkindsofwatersolublevitaminsincludingvitaminB1vitaminB6nicotinicacidnicotinaeinricebran.TheseparationwasperfmedonaHypersilC18column(250cm4.6mmi.

5、d.5.0μm)withamobilephaseof0.1%H3PO4methanol(88:12VV)atflowrateof0.6mLmindetectionwavelengthwas266nm.Fourvitaminshadgoodlinearityintherangeof6.0107gmL8.5105gmLwithdetectionlimitof4.3107gmL3.4106gmL3.2107gmL3.0107mgLfvitam

6、inB1vitaminB6nicotinicacidnicotinaerespectively.Baselineseparationoffourvitaminscanbeachievedwithin8minutes.Withoutcomplicatedpretreatmentfouranalytesinricebransamplesaswellasextractsfromricewithwaterweresuccessfullydete

7、rminedwith3糯米樣品產(chǎn)地：云南西雙版納自治州。1.2色譜條件色譜條件色譜柱：HypersilC18柱（250cm4.6mmi.d.5.0μm）流動(dòng)相：A:0.1%磷酸水溶液B:甲醇，以體積比A:B=88:12等度洗脫；流速為0.6mLmin。檢測(cè)波長(zhǎng)：266nm；進(jìn)樣量20μL。1.3試液的制備試液的制備1.3.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精確稱取約0.05g的四種維生素標(biāo)準(zhǔn)品，用0.01molL鹽酸溶解并稀釋到50mL，搖

8、勻，分別得到1.36103gmL，1.18103gmL，1.04103gmL和1.00103.gmL的VB1，VB6，煙酸和煙酰胺的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于4℃冰箱中保存。儲(chǔ)備液用流動(dòng)相稀釋得所需濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。1.3.2米糠供試品溶液的制備米糠供試品溶液的制備取10.00g米糠于100mL錐形瓶中，加入20mL混合溶劑（體積比為80:20的甲醇－0.01molL鹽酸溶液）超聲提取30min，過(guò)濾，濾渣用相同的條件重復(fù)提取兩次，合并提取液。用旋轉(zhuǎn)

9、蒸發(fā)儀蒸發(fā)濃縮，濃縮液用無(wú)水乙醚萃取兩次脫脂，水相經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾，再過(guò)固相萃取柱，定容至10mL容量瓶中，即得米糠供試品溶液。1.3.3淘米水供試品溶液的制備淘米水供試品溶液的制備取100g云南產(chǎn)糯米加100mL自來(lái)水?dāng)嚢?0min，瀝出洗米水，然后定容至100mL。過(guò)濾，將濾液在12000rmin下離心15min，取上清液，經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾，再過(guò)固相萃取柱，即得淘米水供試品溶液。2.結(jié)果與討論結(jié)果與討論2.1樣品預(yù)處理樣

10、品預(yù)處理[8]方法優(yōu)化方法優(yōu)化米糠的主要成分有蛋白質(zhì)、脂肪酸、膽甾醇、多糖等。雖然VB1、VB6、煙酸和煙酰胺都是水溶性物質(zhì)，但采用水為提取劑，蛋白質(zhì)、碳水化合物也會(huì)隨之被提取出來(lái)，干擾測(cè)定并污染色譜柱。嘗試了純甲醇以及90％甲醇和10％的0.01molL鹽酸水溶液提取維生素，發(fā)現(xiàn)不能將水溶性維生素提取完全；70％的甲醇和30％的0.01molL鹽酸水溶液雖能將水溶性維生素提取完全，但米糠中的蛋白質(zhì)也會(huì)隨之被提取出來(lái)；用80％甲醇和20