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文檔簡介
1、藥物轉運體,作為一種特殊的膜蛋白家族,在藥物的吸收,分布與清除中發(fā)揮了重要的作用,藥物轉運體在腫瘤細胞中的過量表達所引起的多藥耐藥更是腫瘤治療失敗的主要原因。因此,了解藥物轉運體蛋白表達功能的分子調控機制對藥代動力學研究及腫瘤臨床治療具有積極作用。MRP蛋白家族是藥物轉運體家族的亞家族。MRP2是MRP蛋白家族的第二個成員,主要介導有機陰離子的主動轉運。有報道已證實ERM(ezrin/radixin/moesin)蛋白家族中的radix
2、in參與了MRP2在肝細胞微管膜上定位的調控。然而有關兩者關系的報道主要集中在radixin對MRP2定位的調控上,鮮有關注到radixin對MRP2表達及功能的影響;并且大部分的研究都是在以肝細胞為代表的僅有radixin單獨表達的體系中進行,甚少在ERM三個蛋白都存在的體系中。
為了檢驗radixin在MRP2及MRP家族其他成員的表達及功能上的作用,ERM三個蛋白均表達的人胃癌SGC-7901細胞被選擇作為模型。本研究通
3、過RNAi方法構建radixin表達下調的穩(wěn)定細胞株,運用RT-PCR方法檢測了MRP1-6成員mRNA表達水平;實時熒光PCR和western結果表明radixin的表達下調使MRP2在mRNA和蛋白水平上的表達都下調了大約50%,并由此影響了SGC-7901中calcein的外排;MTT實驗結果表明radixin表達下調穩(wěn)定細胞克隆中calcein外排效率的降低并非由各細胞株活力的差異所導致。綜上,在ERM三個蛋白共表達的體系中,r
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