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1、目的:通過(guò)研究姬松茸菌孢多糖對(duì)正常小鼠免疫功能和對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞移植裸鼠瘤p53和Bcl-2基因表達(dá)的影響,來(lái)探討姬松茸菌孢多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃癌防治作用及免疫機(jī)理,為研制新型防治胃癌藥物奠定基礎(chǔ)。 方法:以YAC-Ⅰ細(xì)胞和P-815細(xì)胞作為靶細(xì)胞,采用MTT比色法測(cè)定NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞活性,來(lái)研究姬松茸菌孢多糖對(duì)正常Balb/c小鼠免疫功能的影響。 將體外培養(yǎng)的人胃癌SGC-7901細(xì)胞接種于BALB/C-nu
2、/nu裸鼠的皮下,建立人胃癌移植瘤模型,共30只,隨機(jī)分為5組:香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組、陰性對(duì)照組。采用灌胃的方法進(jìn)行藥物干預(yù),共21天,各實(shí)驗(yàn)組每隔3-4d用游標(biāo)卡尺測(cè)量并計(jì)算移植瘤的體積,繪制移植瘤生長(zhǎng)曲線;于末次給藥24h后,脫臼處死小鼠,切取移植瘤并用電子分析天平稱重,計(jì)算藥物的抑瘤率,以觀察各組的抑瘤效果,同時(shí)按組別固定瘤塊;采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)人胃癌SGC-7901細(xì)胞移植裸鼠瘤p53和Bcl-2基因
3、表達(dá)水平。 結(jié)果:在測(cè)定NK細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)中,結(jié)果顯示:(1)香菇多糖組,姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與陰性對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);(2)姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組之間互相比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);(3)姬松茸菌孢多糖大、小劑量組與香菇多糖組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 在測(cè)定LAK細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)中,結(jié)果顯示:(1)與陰性對(duì)照組比較香菇多糖組,姬松茸菌孢多糖大、中劑量組差
4、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),姬松茸菌孢多糖小劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);(2)姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與香菇多糖組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 在抑瘤實(shí)驗(yàn)中結(jié)果顯示:(1)通過(guò)裸鼠瘤體積生長(zhǎng)曲線可見(jiàn),陰性對(duì)照組瘤體增長(zhǎng)較快,而姬松茸菌孢多糖中、小劑量組和香菇多糖組瘤體增長(zhǎng)較為緩慢,姬松茸菌孢多糖大劑量組瘤體增長(zhǎng)最為緩慢;(2)將第22天各藥物組裸鼠移植瘤體積與陰性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<
5、0.001);與香菇多糖組比較,姬松茸菌孢多糖大劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),姬松茸菌孢多糖中、小劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);(3)以瘤重計(jì)算各藥物組相對(duì)陰性對(duì)照組的抑瘤率,香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組分別為38.38%、53.75%、39.01%、32.23%;(4)以脾重計(jì)算脾臟指數(shù)與陰性對(duì)照組比較,香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中劑量組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),姬松茸菌孢多糖小劑量組差
6、異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與香菇多糖組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 人胃癌SGC-7901細(xì)胞移植裸鼠瘤p53基因表達(dá)水平的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:(1)香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與陰性對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);(2)與香菇多糖組比較,姬松茸菌孢多糖大、小劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),姬松茸菌孢多糖中劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
7、 人胃癌SGC-7901細(xì)胞移植裸鼠瘤Bcl-2基因表達(dá)水平的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:(1)香菇多糖組、姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組與陰性對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);(2)與香菇多糖組比較,姬松茸菌孢多糖大劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),姬松茸菌孢多糖中、小劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論:姬松茸菌孢多糖大、中、小劑量組對(duì)NK、LAK細(xì)胞的活性都有不同程度的提高,且對(duì)NK細(xì)胞活性的提高與劑
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