簡介：學位論文獨創(chuàng)性聲明學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名手寫又P事簽字日期弘哆年‘月7日LD／，學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解南昌大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權南昌大學可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所和中國學術期刊光盤版電子雜志社將本學位論文收錄到中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫和中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務。保密的學位論文在解密后適用本授權書學位論文作者簽名手寫只P毒導師簽名手寫I幽彳弓卜，7簽字日期刃FJ年6月／日簽字日期加F7年占月一7日ABSTRACTABSTRACTOBJECTIVETOINVESTIGATETHEIMPACTOFUPREGIDATINGMIR21ONTHEBIOLOGICALBEHAVIORSOFHT29CANCERCELLSANDOBSERVETHECHANGESOFSENSITIVITYTO5FUANDRADIOTHERAPYMETHODWEFIRSTTRANSFECTEDWITHLENTIVIRALVECTORPREMIR21ASTHEEXPERIMENTALGROUP，THENWETRANSFECTEDTHENONSENSESEQUENCELENTIVIRALVECTORNCANDLENTIVIRALVECTORU6ASTHENEGATIVECONTROLGROUPS，ANDUTILIZEDTHEHT29CELLASTHEMOCKGROUPWEDEVELOPEDALENTIVIRALVECTORFORTHEOVEREXPRESSIONOFPREMIR21ANDEVALUATEDTHETRANSFECTIONEFFECIENCYUNDERAFLUORESCENCEMICROSCOPETHEMIR21EXPRESSIONWASMEASUREDBYTAQMANREALTIMEPCR，THECELLPROLIFERATIONCAPACITYWASDETECTEDBYCCK一8；THECOLONYFORMATIONCAPACITYWASDETECTEDBYTHECOLONYFORMATIONASSAY；CELLAPOPTOSISANDCELLCYCLEDISTRIBUTIONWASANALYZEDWITLLFLOWCYTOMETRY；TRANSWELLCHAMBERASSAYWASUSEDTOOBSERVETHECELLMIGRATIONABILITYCHEMOTHERAPYSENSITIVITYTO5一FUWASDETECTEDBYCCK一8ANDCALCPLATEDTHEHALFOFTHEINHIBITIONIC50TO5FU；THERADIATIONSENSITIVITYWASDETECTEDBYMTTEACHTESTWASREPEATEDTHREETIMESRESPLTSREALTIMEPCRRESP1TSHOWEDTHATTHEMIR21EXPRESSIONINTHELENTIVIRALVECTORPREMIR一21GROUPINCREASED4228TIMESP001COMPAREDWI也THECONTROLGROUPANDTWONEGATIVECONTROLGROUPS，THEUPREGPLATINGINTHEEXPRESSIONOFMIR21SIGNIFICANTLYPROMOTEDTHEPROLIFERATIONOFHT29CELLSP001，ANDSIGNIFICANTLYINCREASEDCOLONYFORMINGABILITY559士19VS37567士2101PO01INHIBITEDAPOPTOSISP005，EARLYAPOPTOTIC11士026VS667081％，LATEAPOPTOTICANDDEADCELLS133士085VS553111％；FURTHERMORE，UPREGGLATINGOFMIR21REDISTRIBUTEDTHECELLCYCLEANDPROMOTEDG1／SCELLCYCLETRANSITION，LEADINGTOTHEPROPORTIONOFG0／G1PHASECELLSREDUCED3653士092VS6018士093％001ANDTHEPROPORTIONOFSPHASECELLSINCREASED568T02VS3301101％0001G2／MPHASECELLSWASNOSIGNIFICANTDIFFERENCE；THEINVASIONABILITYINVITROWASENHANCEDINVASIONCELLS1048士672VS342士259PO01ANDREDUCEDIII

簡介：目的研究一氧化氮（NO）對兔纖維環(huán)細胞生物學行為的影響及其相關機制。方法構建兔纖維環(huán)細胞凝膠培養(yǎng)模型并將其為7組，分別向培養(yǎng)基內加入不同濃度的NO供體硝普鈉（SNP）及INOS抑制劑煙酰胺和1400W進行干預。干預3天后分別采用MTT法、ANNEXINVPI染色、線粒體膜電位JC1染色和RTPCR檢測各組纖維環(huán)細胞增殖活力、細胞凋亡狀況、細胞線粒體膜電位及細胞聚集蛋白多糖（AGGRECAN、Ⅰ和Ⅱ型膠原基因表達。結果①MTT檢測顯示第3、4組吸光度值（A）較正常對照組明顯下降（P結論NO對兔纖維環(huán)細胞生物學行為有較強的干擾作用，可能在纖維環(huán)損傷機制中扮演著重要角色。INOS抑制劑可以有效抑制NO對兔纖維環(huán)細胞生物學行為的干擾，具備用于椎間盤退變防治的良好潛力。

簡介：汕頭大學醫(yī)學院碩士學位論文2汕頭大學碩士學位論文汕頭大學碩士學位論文白藜蘆醇（RESVERATROL）對食管癌EC109細胞白藜蘆醇（RESVERATROL）對食管癌EC109細胞生物學作用的初步研究生物學作用的初步研究研究生孫雪平研究生孫雪平導師李冠武副教授導師李冠武副教授專業(yè)生物化學與分子生物學專業(yè)生物化學與分子生物學研究方向腫瘤分子生物學研究方向腫瘤分子生物學培養(yǎng)單位汕頭大學醫(yī)學院培養(yǎng)單位汕頭大學醫(yī)學院入學時間2004年9月入學時間2004年9月論文完成時間2007年4月論文完成時間2007年4月※本項目得到李嘉誠汕頭大學研究發(fā)展基金資助（項目編號2001022）

簡介：目的鑒定組織塊培養(yǎng)法體外培養(yǎng)人胚胎生殖腺嵴和背側腸系膜所獲得的細胞為未分化的人胚胎生殖細胞人EG細胞；嘗試不同時間和不同方法對人EG細胞進行傳代培養(yǎng)，探討最佳傳代時機和傳代方法；并確定傳代培養(yǎng)的細胞仍為未分化的人EG細胞。方法取5～10周人胚胎生殖腺嵴和背側腸系膜，用源于自身胚胎組織的成纖維細胞作為飼養(yǎng)層，在不添加任何細胞因子條件下進行組織塊培養(yǎng)。以免疫細胞化學法檢測培養(yǎng)細胞中SSEA1、SSEA3、OCT4、端粒酶的表達；利用流式細胞術檢測所得細胞中人EG細胞的比例。對原代培養(yǎng)第八天和第16天的細胞采用挑出傳代法、消化傳代法傳代培養(yǎng)，其中消化傳代法使用的三種消化液分別是025％胰蛋白酶、05％胰蛋白酶和025％胰蛋白酶002％EDTA。檢測傳代培養(yǎng)后細胞中SSEA1、SSEA3、OCT4、端粒酶的表達。結果原代培養(yǎng)的細胞生長良好，免疫細胞化學檢測顯示，位于飼養(yǎng)層上的細胞及細胞集落陽性表達SSEA1、SSEA3、OCT4、端粒酶；流式細胞術檢測表明，培養(yǎng)體系中人EG細胞比例約為13％。原代培養(yǎng)至第八天時，細胞生長最旺盛，適合于傳代；第16天時，很多人EG細胞集落已分化或消散，喪失了傳代的能力。使用胰蛋白酶EDTA作為消化液消化傳代人EG細胞所得的集落最多，效果最佳。通過免疫細胞化學方法檢測表明，傳代培養(yǎng)第五代細胞仍保持SSEA1、SSEA3、OCT4、端粒酶的陽性表達。結論組織塊培養(yǎng)法原代培養(yǎng)人胚胎生殖腺嵴和背側腸系膜所獲得的細胞為未分化的人EG細胞。最適宜的傳代時間是原代培養(yǎng)后第八天，最佳的傳代方法是胰蛋白酶EDTA消化法，且傳代培養(yǎng)后的細胞仍為未分化的人EG細胞。

簡介：目的①小鼠骨髓間充質干祖細胞體外培養(yǎng)體系的優(yōu)化及相關生物學研究；②MIL10重組復制缺陷型腺病毒載體的構建制備及轉染MMSCMPC表達；③MIL10基因轉染修飾骨髓間充質干／祖細胞在H2單倍型骨髓移植AGVHD模型中的生物免疫學效應。方法⑴無菌剝離SPF級雌性C57BL6小鼠股骨與脛骨，以培養(yǎng)基反復強力沖洗并刮擦髓腔內膜后收集沖洗液，加入碎骨片振蕩沖洗，過200目濾網(wǎng)制備為單細胞懸液。分別以3種完全培養(yǎng)基（低糖DMEM完全培養(yǎng)基，低糖DMEMMCDB201完全培養(yǎng)基，MESENCULT完全培養(yǎng)基）重懸，以1106C㎡的密度接種于25C㎡濾膜培養(yǎng)瓶，轉細胞培養(yǎng)箱，37℃，5CO2，100飽和濕度條件下培養(yǎng)。24小時后全量換液，去除未貼壁細胞，此后每3日換液一次。鏡下貼壁細胞約7080匯合時消化，以25～5103C㎡密度接種傳代。對不同代數(shù)的培養(yǎng)細胞進行如下檢測倒置顯微鏡下形態(tài)學特點觀察；不同培養(yǎng)體系小鼠成纖維細胞樣集落形成單位（CFUF）的檢測；計數(shù)繪制細胞生長曲線及倍增時間；流式細胞儀細胞周期檢測；流式細胞儀檢測細胞表面標記；體外定向誘導向成骨、成脂肪分化，鑒定多向分化潛能；RTPCR法檢測細胞MIL10MRNA；雙抗體夾心ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清中MIL10。采用SPSS115FWINDOWS統(tǒng)計處理軟件分析，檢驗水準Α005。⑵以PF5MIL10質粒為模板，PCR擴增回收MIL10CDNA，經一系列酶切和連接反應，將其定向插入腺病毒載體PSGCMV中，構建PSGCMVMIL10質粒；此質粒與5型腺病毒質粒PBGHE3通過脂質體LIPOFECTAMINE2000共轉染HEK293細胞，經胞內同源重組產生重組復制缺陷型腺病毒AD5MIL10；經純化后的AD5MIL10在HEK293細胞中大量擴增，并通過氯化銫密度梯度離心法純化，制備病毒液，50組織培養(yǎng)感染劑量法（TCID50）測定病毒滴度；以AD5EGFP腺病毒確定轉染MMSCMPC的最宜感染復數(shù)（MOI），AD5MIL10腺病毒體外轉染MMSCMPC；RTPCR法檢測AD5MIL10轉染MMSCMPC后MIL10的MRNA表達，ELISA法檢測AD5MIL10轉染MMSCMPC培養(yǎng)上清中MIL10。⑶以雌性C57BL6小鼠為供鼠，雄性F1（CB6F1）小鼠為受鼠，建立H2單倍型骨髓移植AGVHD模型對受鼠進行直線加速器6MVX射線一次性全身照射，總劑量12GY，劑量率100CGYMIN。制備供鼠10，11，12，13四種比例的骨髓單個核細胞（MNC）／脾MNC混合懸液（骨髓MNC取1107只），每比例為一實驗組（N15）。受鼠于照射后4小時內經尾靜脈回輸相應混合懸液，移植后進行一般情況觀察，定期體重監(jiān)測、外周血象及嵌合體測定，GVHD臨床綜合評分，組織病理學半定量評分，以綜合評判各組AGVHD效應，最終確定引出理想AGVHD狀態(tài)的相關參數(shù)，建立H2單倍型骨髓移植AGVHD模型；選擇1105只和5105只兩個劑量梯度作為MSCMPC移植劑量，在H2單倍型骨髓移植AGVHD模型中，分別以MSCMPC及MIL10基因轉染修飾的MSCMPC進行共移植實驗，對相應的4個共移植實驗組及AGVHD對照組進行移植后一般情況觀察，定期體重監(jiān)測，外周血象及嵌合體測定，GVHD臨床綜合評分，組織病理學半定量評分，對各組GVHD狀況進行綜合評價，并選擇移植后14天、28天、35天、60天及瀕死前等不同的時間點，采集制備各組實驗鼠血清，以ELISA法進行MIL10、MIL4、MINFΓ及MTNFA定量檢測。采用SPSS115FWINDOWS統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，檢驗水準Α005。結果①收集經骨片沖洗的小鼠骨髓沖出液接種培養(yǎng)，經傳代培養(yǎng)3代以上后細胞呈現(xiàn)為均質性較好的短梭形細胞，漩渦或放射狀生長；優(yōu)化選擇MESENCULT完全培養(yǎng)基為MSCMPC培養(yǎng)體系；細胞可傳代生長10代以上保持生物學特性穩(wěn)定，選擇P3代培養(yǎng)細胞為實驗用細胞；對數(shù)生長期的群體倍增時間（TD）為311±06小時；細胞匯合8090時G0G1期細胞百分率803，G2期細胞12400，S期細胞73；P3代細胞表面抗原高表達CD29、CD44、CD105、SCA1，極低表達CD45，低到中度表達CD31；P3代細胞經體外定向誘導培養(yǎng)，可分化為成骨及脂肪細胞，證實所培養(yǎng)細胞具備多向分化潛能；RTPCR法檢測培養(yǎng)細胞MIL10MRNA，雙抗體夾心ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清中MIL10，均未能證實MMSCMPC體外表達分泌MIL10。②擴增產物經酶切鑒定、PCR擴增、DNA測序均證實為小鼠白介素10；構建制備的重組腺病毒AD5MIL10經PCR鑒定正確，滴度達251010PFUML；AD5MIL10以最宜MOI值200轉染MMSCMPC時能獲得高效穩(wěn)定的體外表達，符合體內實驗要求。③雄性F1（CB6F1）小鼠為受鼠，經直線加速器6MVX射線一次性全身照射（總劑量12GY，劑量率100CGYMIN），接受雌性C57BL6供鼠1107骨髓MNC3107脾MNC（每只）聯(lián)合輸注時，可在相對集中的時間內（24D～28D）穩(wěn)定地引出典型AGVHD，臨床及病理程度較一致，死亡時間相對集中（27D～33D），以此為參數(shù)建立H2單倍型骨髓移植AGVHD模型；體內共移植實驗結果顯示以1105只MSCMPC共移植時可降低AGVHD的發(fā)生及嚴重程度（P005）；同細胞劑量的MIL10基因轉染修飾MSCMPC共移植能更為顯著地減低AGVHD的發(fā)生及嚴重程度（P005）。細胞因子檢測顯示MSCMPC共移植在14D明顯上調受鼠體內IL4水平（P005），同時明顯減低INFΓ和TNFA水平（P均005）；MIL10基因轉染修飾的MSCMPC共移植較MSCMPC更高地上調了受鼠體內IL10水平（P001），同時協(xié)同上調IL4水平（P005），更顯著地減少了INFΓ生成（P001），但IL10水平的上升可能也增加了受鼠發(fā)生及加重CGVHD的風險。結論⑴成功分離、培養(yǎng)了正常C57BU6小鼠的骨髓間充質干祖細胞，生物學特性穩(wěn)定，具有良好的增殖能力和向成骨、脂肪細胞的分化潛能，可用于進行基因轉染修飾及應用于動物模型。⑵成功構建了重組AD5MIL10復制缺陷型腺病毒載體系統(tǒng)，并證實對MMSCMPC具有較高的轉染效率并獲得高效穩(wěn)定的體外表達。⑶成功建立了雌性C57BL6小鼠→F1（CB6F1）雄性小鼠方向的H2單倍型骨髓移植AGVHD模型。1105／只MSCMPC共移植可降低AGVHD的發(fā)生及嚴重程度，提高細胞劑量（5105只）并不能增強效應。不同程度地上調受鼠IL4水平（但對IL10影響不顯著），同時明顯減低INFΓ和TNFA水平，這可能是MSCMPC移植減輕AGVHD的機制之一。1105只MIL10基因轉染修飾MSCMPC共移植能更顯著地減低AGVHD的發(fā)生及嚴重程度，但并不能降低甚至可能會加重CGVHD的發(fā)生及嚴重程度，提高細胞劑量其效應無顯著差別；MIL10基因轉染修飾MSCMPC較未修飾者更高地上調了受鼠IL10水平，同時協(xié)同上調體內IL4水平，更為顯著地減少INFΓ生成，可能是最終顯著降低AGVHD發(fā)生及嚴重程度的原因，但IL10水平上調也增加了受鼠發(fā)生及加重CGVHD的風險。

簡介：第三軍醫(yī)大學博士學位論文人毛乳頭細胞生長相關蛋白生物學活性的初步研究姓名羅洋申請學位級別博士專業(yè)皮膚病與性病學指導教師郝飛20040501第三軍醫(yī)大學博士學位論文8收集凝集性生長人毛乳頭細胞培養(yǎng)液上清制備成條件培養(yǎng)基分別作用于傳代培養(yǎng)后失去凝集性生長特性的毛乳頭細胞和臨床斑禿患者用來闡明毛乳頭細胞生長相關蛋白對活力較弱毛乳頭細胞的影響和對毛囊生長周期的調節(jié)作用以期為臨床治療禿發(fā)性疾病探索一種新的治療途徑在本研究中我們首先從人頭皮毛囊分離培養(yǎng)人毛乳頭細胞這些細胞具有周期性凝集性生長特性而且這種特性隨著傳代次數(shù)的增多而逐步喪失凝集性生長作為毛乳頭細胞的固有特性與其生物學功能密切相關我們收集凝集性生長人毛乳頭細胞培養(yǎng)液上清制備成條件培養(yǎng)基培養(yǎng)9代毛乳頭細胞發(fā)現(xiàn)其能將非凝集性生長的毛乳頭細胞轉化為凝集性生長狀態(tài)我們又將條件培養(yǎng)基培養(yǎng)的9代毛乳頭細胞與基礎養(yǎng)基培養(yǎng)的9代毛乳頭細胞分別作細胞計數(shù)發(fā)現(xiàn)條件培養(yǎng)基有明顯促進高傳代毛乳頭細胞增殖的能力我們再將2代毛乳頭細胞與9代毛乳頭細胞共培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)9代毛乳頭細胞有向低傳代毛乳頭細胞轉化的趨勢而2代毛乳頭細胞未出現(xiàn)向高傳代轉化的趨勢這些結果表明凝集性生長毛乳頭細胞所分泌的生長相關蛋白與毛乳頭細胞的凝集性生長等生物學特性有關我們應用3HTDR摻入技術發(fā)現(xiàn)基礎培養(yǎng)基培養(yǎng)的毛乳頭細胞其3HTDR摻入值隨著細胞傳代增高而降低而對應的條件培養(yǎng)基培養(yǎng)的高傳代毛乳頭細胞其3HTDR摻入值是相對較高的這表明條件培養(yǎng)基可促進活力較弱的高傳代毛乳頭細胞的增殖我們應用RTPCR技術觀察分泌性蛋白血管內皮生長因子MRNA的表達狀況發(fā)現(xiàn)基礎培養(yǎng)基培養(yǎng)的毛乳頭細胞其血管內皮生長因子MRNA的表達隨著細胞傳代增多而降低而對應的條件培養(yǎng)基培養(yǎng)的高代毛乳頭細胞其血管內皮生長因子的表達是相對較高的這表明條件培養(yǎng)基可促進活力較弱的毛乳頭細胞的分泌性蛋白的基因表達我們再在電鏡下觀察條件培養(yǎng)基培養(yǎng)的高代毛乳頭細胞發(fā)現(xiàn)其細胞核靠邊細胞內核糖體較多內質網(wǎng)分泌成池呈圓形和橢圓形而用基礎培養(yǎng)基培養(yǎng)的高傳代毛乳頭細胞其電鏡下可見其細胞核居中細胞內核糖體較少內質網(wǎng)分泌成星形或條索狀這表明條件培養(yǎng)基可促進活力較弱的高傳代毛乳頭細胞的分泌這些結果表明凝集性生長毛乳頭細胞所分泌的生長相關蛋白可促進活力較弱高傳代毛乳頭細胞的增殖和分泌性蛋白的表達和分泌我們收集凝集性生長人毛乳頭細胞培養(yǎng)液上清制備成毛乳頭細胞條件培養(yǎng)液凍干粉經熱源試驗急性毒性試驗細菌培養(yǎng)真菌培養(yǎng)等檢查無異常經查排除人免疫缺陷病毒乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒梅毒螺旋體感染經本院倫理委員會討論同意臨床使用并征得患者同意且簽署知情同意書的情況下應用于斑禿患者我們發(fā)

簡介：學位論文獨創(chuàng)性聲明學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名手寫字日期刃F許多月易日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解南昌大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權南昌大學可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所和中國學術期刊光盤版電子雜志社將本學位論文收錄到中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫和中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務。保密的學位論文在解密后適用本授權書J學位論文作者簽名鵝穢囊乒鋤簽名手寫球陟?！獿，，簽字日期矽F’年易月抄日簽字日期矽房年Z月占日摘要肉瘤細胞系U2OS細胞的增殖、侵襲和遷移，為下一步實驗打下堅實的基礎。關鍵詞脂肪酸合成酶；RNAI干擾；骨肉瘤；侵襲；遷移

簡介：目的（1）運用貼壁法與流式細胞分選方法分離提純人髓核間充質干細胞（NUCLEUSPULPOSUSMESENCHYMALSTEMCELLS，NPMSCS）。（2）從細胞形態(tài)、增殖特點、免疫免疫表型、三系分化等方面比較兩種方法獲得的髓核間充質干細胞的生物學活性。方法收集腰椎間盤突出癥患者的退變髓核組織（PFIRRMANN分級均為Ⅳ級），利用酶消化法分離細胞。分別采用兩種方法分離提純NPMSCS，一組細胞采用貼壁法培養(yǎng)，另一組通過流式細胞分選技術利用NPMSCS表面陽性標志物CD73、CD90、CD105獲得NPMSCS。將兩種方法獲得的NPMSCS進行體外培養(yǎng)擴增，分別進行形態(tài)學觀察，CCK8檢測增殖能力。向成骨、成脂、成軟骨誘導分化，誘導28天后分別進行茜素紅染色觀察其成骨能力、油紅O染色觀察其成脂能力、甲苯胺藍染色觀察其成軟骨能力，利用IMAGJ軟件計算染色區(qū)域所占的面積百分比。比較兩組NPMSCS在形態(tài)學，免疫表型以及增殖和分化能力的差異。結果（1）流式細胞分選儀以PECD73、APCCD90、V450CD105作為表面陽性標志，分選出CD73、CD90、CD105三陽性的髓核間充質干細胞，平均獲得數(shù)為353±078106個，其比例約（8967±252）％。貼壁法獲得的髓核間充質干細胞CD73、CD90、CD105的陽性表達率，分別為（8979±240），（9407±231），（9049±163）。（2）經酶消化后的原代細胞在接種后57H貼壁，原代細胞呈長短不一的短梭形，待細胞生長達8090融合時，可見旋渦狀生長或者以組織塊為中心的漩渦形成，排列整齊。流式細胞分選方法獲得的髓核間充質干細胞在接種后46H觀察到貼壁生長，主要以旋渦狀生長為主，少見散在的單個貼壁生長細胞，1215天細胞可達到8090融合。（3）在培養(yǎng)4H1D，流式組NPMSCS的增殖活力明顯低于貼壁組NPMSCS（P005）。在第5D13D，流式組NPMSCS增殖能力明顯高于貼壁組NPMSCS（P（4）流式組NPMSCS流式細胞儀免疫表型的檢測結果顯示，CD73的表達率為9855±035，CD90的表達率為9847±057，CD105的表達率為9820±124，表達率明顯高于貼壁組NPMSCS。流式組NPMSCS造血干細胞標志物CD45、CD34及HLADR等的表達率均低于4。（5）成骨誘導分化兩組NPMSCS經誘導28天后，顯微鏡下可見細胞內有黑色不透光區(qū)域，經茜素紅染色后可見細胞表面存在大量紅染的鈣鹽沉積，肉眼觀可見流式組NPMSCS紅染面積多于貼壁組NPMSCS，應用IMAGJ軟件進行圖像分析，測得流式組NPMSCS紅染面積的比例明顯高于貼壁組NPMSCS（P結論本實驗利用流式細胞分選技術從人退變髓核組織中獲得較高純度的NPMSCS，并能進行后續(xù)培養(yǎng)擴增。與貼壁法獲得的NPMSCS相比，流式分選的NPMSCS具有更強的增殖與分化能力。流式細胞分選方法為研究NPMSCS的生物學特性提供了可靠的細胞分離與純化方法。流式組獲得的NPMSCS能夠貼壁生長、完成三系分化誘導，提供了人髓核組織中存在間充質干細胞的依據(jù)。

簡介：第一軍醫(yī)大學博士學位論文肝癌干細胞生物學特征及個體化化療應用研究姓名周思朗申請學位級別博士專業(yè)腫瘤學指導教師張積仁20060510物學特征。以此探討肝癌干細胞的存在和可能生物學特征。最后利用腫瘤干細胞與成體干細胞關系，研究間充質干細胞在針對肝癌干細胞、個體化的藥物敏感實驗應用前景。具體包括以下幾方面1研究化療藥物連續(xù)刺激下，不同藥物間肝癌細胞耐藥及增殖相關蛋白表達的相關性，探討肝癌個體化化療的必要性。2根據(jù)腫瘤干細胞來源于相應成體干細胞的規(guī)律，通過肝癌干細胞的對應成體干細胞肝卵圓細胞表面標記分選肝癌細胞，找出高致瘤能力的肝癌干細胞樣細胞，并進一步研究其生物學特征。3研究骨髓間充質干細胞與肝癌細胞藥敏與肝癌細胞成瘤能力的相關性，了解間充質干細胞在個體化的藥物敏感實驗中的應用前景。第一部分持續(xù)化療肝癌細胞耐藥蛋白、增殖蛋白表達規(guī)律目的研究不同常規(guī)化療藥物連續(xù)刺激下，肝癌細胞株耐藥及增殖相關蛋白表達的變化的相關性。方法HEPG2細胞株經阿霉素ADM、氟尿嘧啶5FU、順鉑DDP、聯(lián)合化療刺激。應用流式細胞術分別檢測耐藥相關蛋白MDRL、MRP以及LRP與增殖相關蛋白ERBB．2和C．MYC的陽性細胞數(shù)及平均熒光強度，以此推算出不同藥物連續(xù)作用細胞株后各耐藥相關蛋白與增殖蛋白總表達量。分析不同化療藥物持續(xù)作用6個刺激周期后，耐藥相關蛋白與增殖蛋白總表達量變化的相關性。結果各化療藥物組以及聯(lián)合化療藥物組連續(xù)刺激細胞株6個周期，表達的ERBB．2、C．MYC、MDRL、MRP以及LRP抗體總量變化未發(fā)現(xiàn)明顯規(guī)律。將各藥物組不同周期表達的抗體總量進行相關性分析，結果如下1應用不同藥物刺激HEPG2細胞6個周期，對MDRL抗體表達總量進行相關性分析ADM組與5FU組，相關系數(shù)R一0．512，P0．299ADM組與DDP組，相關系數(shù)R0．783，P0．066；ADM組與聯(lián)合組，相關系數(shù)I一0．446，P0375；5FU組與DDP組，相關系數(shù)R一0．491，P0．323；5FU組與聯(lián)合組，相關系數(shù)I一0．046，P0．931；DDP組與聯(lián)合組，相關系數(shù)F．0．549，P0．259。II

簡介：分類號分類號R7353R7353學校代碼學校代碼10392學科專業(yè)代碼學科專業(yè)代碼100210100210學號號2111003128福建醫(yī)科大學碩士研究生畢業(yè)論文X線照射對結直腸癌細胞線照射對結直腸癌細胞SW480的上皮間質化及其的上皮間質化及其生物學特性影響的研究物學特性影響的研究THEINFLUENCEOFXRAYRADIATIONONEPITHELIALTOMESENCHYMALTRANSITIONINSW480COLORECTALCARCINOMACELLSANDITSBIOLOGICALCHARACTERISTICS學位類型型學術型碩士學術型碩士所在學院院第一臨床第一臨床醫(yī)學院學院研究生生王罡學科學科、專業(yè)專業(yè)外科學（普外）外科學（普外）導師師戴起寶戴起寶副教授教授陳紹勤陳紹勤副教授教授研究起止日期研究起止日期2013年3月至月至2014年1月答辯日期答辯日期2014年6月目錄英語縮略詞表1中文摘要2英文摘要4引言6材料與方法8結果22討論30結論33參考文獻34綜述37致謝43

簡介：點擊查看更多環(huán)孢素A對滋養(yǎng)細胞生物學功能及其信號轉導的調節(jié)作用.pdf精彩內容。

簡介：Y994758學校代碼10610學號S032789四川大學碩士研究生學位論文黏著斑激酶對高轉移性腺樣囊論文題目性癌細胞生物學特性影響的初步研究作指導教師姓名／職稱何志秀教授二OO六年五月四川丈學華西口腔醫(yī)學院碩士學住論乏縮略詞EAKACCACCMBPAS0DNEDLAMTTDMSOBSA0DR1二PCRTUNELFCMDEPCI叮ENECMFNBM縮略詞表英文全稱FOCALADHESIONKINASEADENOIDCYSTICCARCINOMAADENNOIDCYSTICC∞CINOMAMBASEPAIRANTISENSEOLIGODEOXYNUCLEOTIDEETHYLENEDIAMINETETRAACETILALID345DIMETHYLTHIAZOL一2一Y02，5DIPHENYLTETRAZOLIAMBROMIDEDIMETHYLSULFOXIDEBOVINESELAMALBUMINOPTICALDENSITYREVERSETRANSCRIPTIONPOLYMERASECHAINREACTION1DT曲EDIATEDDUTPNICKENDLABELFLOWCYTOMETRYDIETHYPYROCARBONATEPHOSPHATASEANDTENSINHOMOLOGDELETED0NCHROMOSOMETENEXTRACELLULARMATRIXFIBRONE斌INBASEMENTMEMBRANE中文名稱黏著斑激酶腺樣囊性癌腺樣囊性癌M細胞系堿基對反義寡核苷酸乙二胺四乙酸四甲基偶氮唑藍二甲亞砜小牛血清吸光度或光密度逆轉錄聚合酶鏈反應TDT介導的DUTP缺口末端標記技術流式細胞術焦碳酸二乙脂蛋白酪氨酸磷酸酶基因細胞外基質纖維粘連蛋白基底膜

簡介：復旦大學博士學位論文GNMT的表達及調控對人前列腺癌細胞系LNCAP和PC3生物學特性的影響IMPACTOFGNMTEXPRESSIONANDREGULATIONONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFHUMANPROSTATECANCERCELLLINESLNCAPANDPC3院系專業(yè)姓名指導教師導師組成員華山醫(yī)院。外科學童仕俊丁強教授方祖軍教授姜吳文教授孫劍良副教授完成日期2014年3月18K7目錄中文摘要1英文摘要5前言9日U舌9第一部分GLUT在人前列腺癌細胞系LNCAP和PC3中的表達研究內容LL實驗方法LL實驗結果16討念20結論21第二部分GNMT的體外調控對人前列腺癌細胞系LNCAP和PC3生物學特性的影響研究內容22實驗方法22實驗結果26討念49結論53第三部分GNMT的體內調控對人前列腺癌細胞系PC3成瘤作用的影響研究內容54實驗方法54實驗結果58討侖62結念63研究總結64參考文獻65文獻綜述GNMT在腫瘤中的多功能作用68致謝81

簡介：點擊查看更多再生障礙性貧血患者骨髓間充質干細胞生物學特性及成脂分化異常研究.pdf精彩內容。

簡介：干細胞是指具有高度增殖和自我更新能力并可分化為多種不同類型組織細胞的一類細胞該文是研究利用MSCS進行創(chuàng)傷促愈項目的一部分在建立小鼠骨髓MSCS體外分離培養(yǎng)體系的基礎上研究尾靜脈移植的骨髓MSCS在創(chuàng)傷小鼠體內的分布定位情況該文采用密度為1082的細胞分離液PERCOLL通過密度梯度分離小鼠的單個核細胞利用MSCS早期貼壁的特點24小時內換液去掉造血細胞分離培養(yǎng)骨髓MSCS研究其在體外傳代培養(yǎng)中的生長曲線、貼壁率及細胞周期等細胞生物學特點和超微結構并通過間接手段誘導向成骨細胞和成脂細胞分化來驗證分離獲得的MSCS是否具有多向分化的能力