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文檔簡介
1、目的:
1、檢測X線照射對結(jié)直腸癌SW480細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響。
2、觀察X線照射對體外培養(yǎng)的人結(jié)直腸癌SW480細胞生物學(xué)特性的影響,以及其侵襲、遷移能力變化的影響。
方法:
1、將人結(jié)直腸癌SW480細胞分成5組,分別用0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy劑量的X線照射后培養(yǎng)48h。
2、經(jīng)X線照射并培養(yǎng)48小時后,用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)變化。
3、應(yīng)用Tran
2、swell的方法檢測X線照射后培養(yǎng)24h的0Gy、4Gy、8Gy劑量組的SW480細胞的侵襲和遷移能力變化。
4、應(yīng)用QRT-PCR的方法和Western blot的方法來檢測經(jīng)X線照射和未經(jīng)X線照射的人結(jié)直腸癌SW480細胞的上皮指標E-cadherin和間質(zhì)指標Vimentin的表達變化情況,分析在X線照射與人結(jié)直腸癌細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系。
結(jié)果:
1、經(jīng)X線照射后,劑量為2Gy、4Gy、6Gy、8
3、Gy組的人結(jié)直腸癌SW480細胞形態(tài)均發(fā)生變化,細胞呈梭形,極性消失,細胞間分離并有偽足形成,此與發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象相一致。
2、經(jīng)X線照射后,4Gy劑量組和8Gy劑量組與0Gy組相比,侵襲能力均明顯增強(P<0.05),且8Gy劑量組與4Gy劑量組相比侵襲能力亦顯著增高(P<0.05)。
3、經(jīng)X線照射后,細胞的遷移能力發(fā)生改變,4Gy、8Gy劑量組相對于0Gy組遷移能力明顯增高(P<0.05)。但4Gy劑量
4、組與8Gy劑量組之間的差別沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
4、應(yīng)用SYBR QRT-PCR和Western blot法檢測目的基因E-cadherin,發(fā)現(xiàn)經(jīng)X線照射后與0Gy劑量組相比2Gy、4Gy、6Gy、8Gy劑量組的上皮指標E-cadherin均明顯下降(P<0.05),且X線劑量越高下降越明顯。
5、應(yīng)用SYBR QRT-PCR和Western blot法檢測目的基因Vimentin,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過X線照射后,
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