簡(jiǎn)介：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜異位癥在位內(nèi)膜細(xì)胞生物學(xué)行為及對(duì)不同藥物反應(yīng)性的研究姓名李華軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師郎景和20040501里墜塑絲型查蘭墾主嬰莖些蘭蘭塑壁I_一MTIMPMGMLMMMRNANG0DICAMPPBSPCRPEGRAFSRFWRNAE州ASENNRPMGCRRPCRAPOPPROLJTEST11RISEUEDUUGUJMMPOMVEGFMOLPERLITERTISSUEINHIBITOROFMETALLOPROTEINASEMILLIGRAMMILLILITERMILLMOLPERLITERMESSENGERRNANANOGRAM0PTICALDENSITY0VARIANCHOCOLATECYSTPROGESTERONEPHOSPHATEBUFIEREDSALINEPOLYMERASECHAINREACTIONPOLYETHYLENEGLYCOLREVISEDAMERICANFERTILITYSOCIETYRNASEFREEWATERRIBONEUELEICACIDRIBONUELEASE’NNDIMETHYLFORMAMIDEROTATIONPERMINUTEGROWTHCURVEREVERSETRANSCRIPTATIONPOLYMERASECHAINREACTIONAPOPTOSISPROLIFERATION1’RIS，EDTABUFFERSOURCETHERAPEUTICSTRISHYDROXYMETHYLAMIMOMETHANEEUTOPIEENDOMETRIUMUNITMICROGRAMMICROLITERMATRIXMETALLOPROTEINASEMICROMOLPERLITERVASCULARENDOTHELIALGROWTH2摩爾每升基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑毫克毫升毫摩爾每升信使核糖核酸納克光密度細(xì)胞間粘附分子孕酮磷酸緩沖鹽液聚合酶鏈反應(yīng)聚乙二醇美國(guó)生育學(xué)會(huì)無(wú)核酸酶的水核糖核酸核酸酶NN二甲基甲酰胺每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)生長(zhǎng)曲線逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)凋亡增殖TRIS／EDTA緩沖液源頭治療論三羥甲基氨基甲烷在位內(nèi)膜決定論酶單位微克微升基質(zhì)金屬蛋白酶微摩爾每升血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

簡(jiǎn)介：目的體外分離培養(yǎng)人羊水間充質(zhì)干細(xì)胞HAFMSCS，HUMANAMNIOTICFLUIDMESENCHYMALSTEMCELLS，觀察其生物學(xué)特性。低溫凍存HAFMSCS三個(gè)月，觀察凍存后細(xì)胞的生物學(xué)特性，找出最佳的凍存方案。體外誘導(dǎo)HAFMSCS向內(nèi)皮細(xì)胞分化，分別在常氧及低氧環(huán)境下觀察其分化為內(nèi)皮細(xì)胞的能力。方法采用四種方法分離培養(yǎng)HAFMSCS，用MTT法觀察各組細(xì)胞的增殖能力。流式細(xì)胞技術(shù)FACS檢測(cè)各組細(xì)胞表面抗原CD29，CD34，CD44，CD45，CD73，CD90，HLAABC，HLADR等的表達(dá)。比較各組細(xì)胞成脂、成骨的分化能力，及檢測(cè)各組細(xì)胞中OCT4，NANOG等MRNA表達(dá)水平。用不同成分的凍存液凍存HAFMSCS，凍存三個(gè)月后復(fù)蘇細(xì)胞，并分析其存活率、生物學(xué)特性及分化能力。體外采用VEGF和BFGF聯(lián)合誘導(dǎo)HAFMSCS向內(nèi)皮細(xì)胞分化，F(xiàn)ACS分析細(xì)胞VWF、CD31及CD133MRNA的表達(dá)水平，采用細(xì)胞免疫熒光的方法鑒定誘導(dǎo)分化后細(xì)胞VWF的表達(dá)情況，觀察誘導(dǎo)后細(xì)胞在MATRIGEL上形成毛細(xì)血管樣結(jié)構(gòu)的能力。比較低氧環(huán)境與常氧環(huán)境下上述指標(biāo)的差異。結(jié)果四種不同的培養(yǎng)方法均培養(yǎng)出HAFMSCS。其中CHANG培養(yǎng)基兩步培養(yǎng)法培養(yǎng)的細(xì)胞，其貼壁時(shí)間、細(xì)胞集落形成時(shí)間及細(xì)胞傳代時(shí)間較其余三組更短，培養(yǎng)15天即有細(xì)胞貼壁，45天可見(jiàn)細(xì)胞集落形成，細(xì)胞增殖快。四組細(xì)胞均表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記物CD29、CD44、CD73、CD90，而不表達(dá)造血干細(xì)胞標(biāo)記物CD34、CD45，符合間充質(zhì)干細(xì)胞的特征，各組之間無(wú)明顯差異。四組細(xì)胞成骨、成脂誘導(dǎo)成功，并分別通過(guò)油紅。染色及VONKOSSA染色證實(shí)。四組細(xì)胞中均檢測(cè)到OCT4，NANOGMRNA的表達(dá)。凍存三個(gè)月后的HAFMSCS，以?xún)龃嬉悍桨笧镈MEMFBSDMSO541的細(xì)胞存活率最高，細(xì)胞增殖能力最強(qiáng)。而復(fù)蘇后細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線、細(xì)胞表型、分化能力及OCT4，NANOG的表達(dá)與凍存前細(xì)胞相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。HAFMSCS體外誘導(dǎo)分化為內(nèi)皮細(xì)胞，流式細(xì)胞技術(shù)分析比較各組誘導(dǎo)后細(xì)胞中VWF，CD31，CD133等內(nèi)皮相關(guān)標(biāo)記物抗原的水平，以VEGF和BFGF聯(lián)合誘導(dǎo)組誘導(dǎo)效率最高，MTRIGEL上形成毛細(xì)血管結(jié)構(gòu)的能力也最強(qiáng)。低氧環(huán)境下經(jīng)VEGF和BFGF聯(lián)合誘導(dǎo)組的HAFMSCS內(nèi)VEGF，VWF和CD31的MRNA水平高于其余各組，形成毛細(xì)血管樣結(jié)構(gòu)的能力也明顯強(qiáng)于其余各組。結(jié)論HAFMSCS具有易獲得、體外增殖快、多向分化能力等優(yōu)勢(shì)。CHANG培養(yǎng)基兩步培養(yǎng)法能夠在較短時(shí)間內(nèi)培養(yǎng)大量的HAFMSCS。短期凍存HAFMSCS對(duì)于其生物學(xué)特性無(wú)明顯影響，最佳的凍存液配方為DMEMFBSDMSO541。VEGF和BFGF聯(lián)合誘導(dǎo)較為理想的體外誘導(dǎo)HAFMSCS分化為內(nèi)皮細(xì)胞的誘導(dǎo)方案。低氧能夠促進(jìn)這一過(guò)程，在短期低氧環(huán)境下，HAFMSCS誘導(dǎo)分化為內(nèi)皮細(xì)胞的能力與暴露于低氧環(huán)境的時(shí)間呈正相關(guān)。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多第一部分 菌株I03A-09005的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及其生物學(xué)活性研究;第二部分 靶向結(jié)核桿菌細(xì)胞壁的藥物篩選研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：（中國(guó)中國(guó)圖書(shū)資圖書(shū)資料分類(lèi)法分類(lèi)號(hào)）料分類(lèi)法分類(lèi)號(hào)）單位代碼單位代碼10660R7337學(xué)號(hào)號(hào)S100102貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士學(xué)位論文屆碩士學(xué)位論文OSI027及其聯(lián)合自噬及其聯(lián)合自噬抑制劑抑制劑對(duì)K562細(xì)胞細(xì)胞的生物學(xué)影響及機(jī)制的的生物學(xué)影響及機(jī)制的研究研究研究生生張建英張建英導(dǎo)師師張亞莉張亞莉教授教授曾小菁曾小菁教授教授年級(jí)級(jí)2010級(jí)專(zhuān)業(yè)業(yè)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)2013年5月28日貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文1OSI027及其聯(lián)合自噬及其聯(lián)合自噬抑制劑抑制劑對(duì)K562細(xì)胞的細(xì)胞的生物學(xué)影響及機(jī)制的生物學(xué)影響及機(jī)制的研究研究臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)研究生張建英導(dǎo)師張亞莉教授曾小菁教授摘要【目的】探討OSI027及其聯(lián)合自噬抑制劑對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株K562的生物學(xué)影響及可能的機(jī)制?！痉椒ā砍Ｒ?guī)方法復(fù)蘇、傳代培養(yǎng)待細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)分裂期后用于實(shí)驗(yàn)。1藥物對(duì)K562細(xì)胞生物學(xué)影響的初步觀察空白對(duì)照組細(xì)胞行正常培養(yǎng)，OSI027處理組以01、05、1、5、10、20ΜMOLL濃度的OSI027處理細(xì)胞，雷帕霉素（RAPA）處理組以1、5、10、20、50、100NMOLL濃度的RAPA處理細(xì)胞，收集處理后的24H、48H、72H細(xì)胞，以MTT比色法測(cè)定細(xì)胞增殖抑制率及半數(shù)抑制濃度（IC50）；倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況；光學(xué)顯微鏡觀察常規(guī)瑞氏染色后細(xì)胞形態(tài)變化。2藥物對(duì)K562細(xì)胞生物學(xué)影響的機(jī)制研究細(xì)胞分為空白對(duì)照組（正常培養(yǎng)）、OSI027、RAPA、氯喹（CQ）、OSI027聯(lián)合CQ和RAPA聯(lián)合CQ處理組，收集處理后24H、48H、72H細(xì)胞，ANNEXINVFITCPI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡；PI單染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期分布；透射電鏡觀察亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化；WESTERNBLOTTING檢測(cè)細(xì)胞中BCL2、BECLIN1、HIF1Α蛋白的表達(dá)情況?！窘Y(jié)果】1MTT結(jié)果顯示，OSI027對(duì)K562細(xì)胞有明顯增殖抑制作用，且抑制作用呈劑量時(shí)間依賴(lài)性，其IC50為6104ΜMOLL；RAPA對(duì)K562細(xì)胞有一定的增殖抑制作用，IC50為132640NMOLL。2細(xì)胞生長(zhǎng)狀況觀察顯示，與對(duì)照組相比，OSI027處理組出現(xiàn)了細(xì)胞數(shù)量減少、顏色變暗、抱團(tuán)生長(zhǎng)和破碎等現(xiàn)象，隨藥物濃度升高和時(shí)間延長(zhǎng)，上述變化更加明顯；RAPA處理組未出現(xiàn)明顯的生長(zhǎng)變化，僅見(jiàn)細(xì)胞數(shù)量略微減少等改變。3細(xì)胞形態(tài)觀察顯示，與對(duì)照相比，OSI027處理組細(xì)胞邊緣破碎，體積縮小，胞質(zhì)中出現(xiàn)空泡，核仁消失，核染色質(zhì)粗糙；RAPA處理組未出現(xiàn)明顯的形態(tài)變化，僅在作用72H時(shí)，見(jiàn)細(xì)胞核染色質(zhì)變得較粗糙。4細(xì)胞凋亡檢測(cè)顯示，OSI027可誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡，且效應(yīng)高于RAPA作用組（P005），當(dāng)OSI027聯(lián)合CQ作用時(shí)主要誘導(dǎo)細(xì)胞壞死，壞死率隨處理時(shí)間延長(zhǎng)而升高，72H達(dá)2957180；RAPA對(duì)細(xì)胞凋亡影響不大，當(dāng)其聯(lián)合

簡(jiǎn)介：本課題研究CDL33造血干／祖細(xì)胞的生物學(xué)特性，探討其誘導(dǎo)分化和體外擴(kuò)增，并克隆CDL33基因全長(zhǎng)及研制抗人CDL33單克隆抗體，為進(jìn)一步研究和利用CDL33打下基礎(chǔ)。11臍血CDL33細(xì)胞生物學(xué)特性的研究。本研究從臍血中磁珠分選獲得CD34CDL33和CD34CDL33兩群細(xì)胞，繼而進(jìn)行體外細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)，結(jié)果表明兩群細(xì)胞均得到顯著擴(kuò)增。相同擴(kuò)增體系中CD34CDL33細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)均高于CD34CDL33細(xì)胞。對(duì)CD34CDL33細(xì)胞擴(kuò)增后細(xì)胞表面抗原譜的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行分析顯示，CD34CDL33細(xì)胞在擴(kuò)增過(guò)程中向CD34CDL33細(xì)胞演變，進(jìn)而最后分化為CD34CDL33細(xì)胞；細(xì)胞集落培養(yǎng)表明CD34CDL33細(xì)胞體外集落細(xì)胞形成多于CD34CDL33細(xì)胞，但沒(méi)有顯著性差別。但是CD34CDL33細(xì)胞以CFUGM集落為主，而CD34CDL33細(xì)胞則BFUE集落占多數(shù)代表早期祖細(xì)胞的CFUGEMM和HPPCFU的集落數(shù)量在CD34CDL33細(xì)胞組顯著高于CD34CDL33細(xì)胞組；長(zhǎng)期培養(yǎng)啟動(dòng)細(xì)胞測(cè)定CD34CDL33細(xì)胞遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于CD34CDL33細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD34CDL33在擴(kuò)增狀態(tài)下細(xì)胞表面粘附分子表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化也表明，擴(kuò)增前后粘附分子沒(méi)有顯著改變。綜上所述，本研究顯示CD34CDL33細(xì)胞是比CD34CDL33細(xì)胞更原始的HSPC。對(duì)CD34CDL33細(xì)胞擴(kuò)增后細(xì)胞表面抗原表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行分析提示，CDL33分子可能是早于CD34的HSPC表面標(biāo)記。同時(shí)通過(guò)SCFFLTPO細(xì)胞因子組合，可以在體外有效對(duì)CD34CDL33細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增，并且HSPC的擴(kuò)增對(duì)粘附分子的表達(dá)沒(méi)有明顯的影響，提示體外擴(kuò)增可能不會(huì)對(duì)HSPC的遷徙和歸巢造成影響。12臍血CD133細(xì)胞重建SCLD小鼠造血的實(shí)驗(yàn)研究SCID小鼠造血重建模型可以進(jìn)行定量評(píng)估人HSPC的生物學(xué)特性，并確定HSPC植入SCID小鼠骨髓并重建造血的能力。本研究將CDL33細(xì)胞和擴(kuò)增后的CDL33細(xì)胞以及CDL33細(xì)胞移植于SCID小鼠，并對(duì)造血功能重建進(jìn)行研究。44只SCID小鼠，移植前所有小鼠均接受30GY60C0照射，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分組，在輻照后4小時(shí)內(nèi)由尾靜脈注射移植細(xì)胞CD34CDL33和CD34CDL33細(xì)胞。繼而觀察實(shí)驗(yàn)小鼠存活狀況，3周后檢測(cè)小鼠骨髓人CD45細(xì)胞和人ALU基因。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示移植CD34CDL33細(xì)胞小鼠存活率明顯高于移植CD34CDL33細(xì)胞小鼠；在移植新分離和培養(yǎng)擴(kuò)增CD34CDL33細(xì)胞的小鼠骨髓中都檢測(cè)到CD45細(xì)胞和ALU基因的存在。本研究結(jié)果表明CD34CDL33細(xì)胞具有比CD34CDL33細(xì)胞更原始的特性，擴(kuò)增后的CD34CDL33細(xì)胞同樣具有植入SCID小鼠骨髓造血重建的能力。2臍血CDL33細(xì)胞誘9分化樹(shù)突狀細(xì)胞的研究。本實(shí)驗(yàn)就CDL33細(xì)胞和CD34細(xì)胞擴(kuò)增誘導(dǎo)DC的能力進(jìn)行比較，并對(duì)CD40分子激發(fā)對(duì)誘導(dǎo)DC作用進(jìn)行研究。從臍血中分離獲得CD34CDL33和CD34CDL33細(xì)胞，新分離和擴(kuò)增后細(xì)胞加不同組合的細(xì)胞因子，根據(jù)細(xì)胞因子組合和加入細(xì)胞的不同分組A組CD34CDL33細(xì)胞GMCSFIL415天TNFQ69天B組CD34CDL33細(xì)胞GMCSFIL415天TNFQ69天；C組擴(kuò)增7天后CDL33細(xì)胞GMCSFIL4卜5天TNFΑ69天；D組CD34CDL33細(xì)胞ICD40功能性單抗5C11。對(duì)DCS形態(tài)學(xué)進(jìn)行觀察和細(xì)胞表型分析以及擴(kuò)增效率比較，并進(jìn)行DC與T細(xì)胞體外混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示除B組外，其余各組細(xì)胞數(shù)量均得到有效擴(kuò)增。以C組擴(kuò)增效果最為明顯，A、D組則基本相同；對(duì)于細(xì)胞因子條件相同的A、B組來(lái)說(shuō)，CD34CDL33細(xì)胞擴(kuò)增數(shù)量是CD34CDL33細(xì)胞的303倍；各組誘導(dǎo)的細(xì)胞均表達(dá)CDLΑ、CD83、CD86和HLADR，但A組細(xì)胞表達(dá)上述分子陽(yáng)性率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于B組；C組細(xì)胞表達(dá)DC相關(guān)分子略少于A組但無(wú)顯著性差異，D組細(xì)胞基本與C組相當(dāng)，但D組細(xì)胞的CDLQ表達(dá)率顯著低于A、C兩組；MLR結(jié)果表明，各組均具有激發(fā)同種異體T細(xì)胞增殖的功能。A、C、D組間無(wú)顯著差異，但均高于B組，其中A組是B組的376倍。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，具有產(chǎn)生功能性DC的前體細(xì)胞主要存在于CDL33細(xì)胞群，同時(shí)通過(guò)擴(kuò)增和誘導(dǎo)兩步法可以獲得大量功能性DC，這表明可采用CDL33細(xì)胞來(lái)研究DC的分化和發(fā)育的生物學(xué)特性；實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明，CD40分子激發(fā)可有效地促進(jìn)CDL33細(xì)胞源DC體外擴(kuò)增和分化，這為體外誘導(dǎo)DC提供了一條新的途徑。3人胎盤(pán)來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)CDL33細(xì)胞體外擴(kuò)增的支持作用。本研究采用胎盤(pán)來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞HUMANPLACTENTADERIVEDMESENCHYMALLIKESTEMCELLS，HPMSC觀察其對(duì)CDL33HSPC的擴(kuò)增作用。由胎盤(pán)分離培養(yǎng)得到的間充質(zhì)樣細(xì)胞具有BMSCS相似的形態(tài)和細(xì)胞表面標(biāo)志細(xì)胞形態(tài)呈類(lèi)似成纖維細(xì)胞，免疫熒光標(biāo)記和流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示該群細(xì)胞表達(dá)CD29、CD44和CDL05SH2分子，但不表達(dá)CDLLB、CD34、CD45、CDL9、CDL06、HLADR、VVF、CDLL7、FASLCD40、CD40L等。對(duì)HPMSCS分泌細(xì)胞因子進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，HPMSC分泌SCF、IL6和TNFTT以及分泌大量的SDF1Α，但不產(chǎn)生IL3和GMCSF。CDL33細(xì)胞與HPMSCS共培養(yǎng)后，HPMSCS能有效擴(kuò)增CDL33細(xì)胞；并且不同擴(kuò)增時(shí)間細(xì)胞表面粘附分子沒(méi)有顯著性變化。結(jié)果表明胎盤(pán)來(lái)源的HPMSC可在體外有效擴(kuò)增HSPC。一方面大大提高了HSPC擴(kuò)增的數(shù)量和質(zhì)量，另一方面在HSPC歸巢和抑制免疫排斥方面的作用將大大提高移植的成功率。這也表明移植時(shí)同時(shí)采用同一個(gè)體的胎盤(pán)源MSC和臍血CDL33細(xì)胞完全有可行性，這為臍血干細(xì)胞移植開(kāi)拓了新的途徑，具有重要的使用價(jià)值。41001332分子的克隆及其轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的構(gòu)建研究表明CDL33可能是較CD34更為有價(jià)值的HSPC表面標(biāo)志，隨著研究的進(jìn)展，CDL33將在多個(gè)方面顯示更重要的價(jià)值。本研究旨在克隆人CDL332全長(zhǎng)基因，構(gòu)建其轉(zhuǎn)基因細(xì)胞，為制備抗人CDL332單克隆抗體和研究CDL332的生物學(xué)功能打下基礎(chǔ)。根據(jù)CDL332基因GENEBANKAF507034序列，以骨髓CDNA文庫(kù)為模板，在分段克隆的基礎(chǔ)上采用人工延伸等手段獲得人CDL332基因，裝入PMDL8TVECT載體，轉(zhuǎn)化感受態(tài)DH5A大腸桿菌。重組質(zhì)粒TCDL332經(jīng)測(cè)序正確。重組質(zhì)粒TCDL332經(jīng)PCR擴(kuò)增CDL332全長(zhǎng)基因并引入PSTI和BAMHI酶切位點(diǎn)，裝入逆轉(zhuǎn)錄表達(dá)載體PGEZTERM，轉(zhuǎn)化感受態(tài)DH5CT大腸桿菌，重組質(zhì)粒PGEZCDL332經(jīng)測(cè)序正確。PGEZCDL332、輔助病毒載體PHIT456和PHIT60混合后，脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染包裝細(xì)胞293T細(xì)胞，獲得具有感染能力的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒。將含有完整CDL332重組逆轉(zhuǎn)錄病毒的293T細(xì)胞上清混合WEHI細(xì)胞上清，感染L929細(xì)胞并進(jìn)行培養(yǎng)，并用不同濃度的ZEOCINE加壓篩選獲得抗性轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的基礎(chǔ)上，采用免疫熒光標(biāo)記和流式細(xì)胞儀分析，獲得穩(wěn)定表達(dá)CDL332分子的LCDL332轉(zhuǎn)基因細(xì)胞。本研究利用高質(zhì)量的CDNA基因文庫(kù)提供的高質(zhì)量模板，采用分段克隆的方法，成功克隆CDL332全長(zhǎng)基因并構(gòu)建轉(zhuǎn)基因細(xì)胞，為制備抗人CDL332單克隆抗體和進(jìn)一步研究CDL33的生物學(xué)功能奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。42CDL332單克隆抗體的研制以L929CDL33細(xì)胞作為免疫原，免疫BALB／C小鼠。采用B淋巴瘤雜交瘤技術(shù)，將免疫BALB／C小鼠的脾臟細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞SP2／0進(jìn)行融合，經(jīng)HAT篩選，以L929CDL33篩選抗原，經(jīng)多次亞克隆化及反復(fù)篩選，在融合的10塊96孔板中，最終得到1株持續(xù)分泌抗人CDL332單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株1F8。將雜交瘤細(xì)胞注入降植烷PRISTANE預(yù)致敏的BALB／C小鼠，誘生腹水?？焖俣ㄐ栽嚰垪l分析法結(jié)果顯示1F8IG類(lèi)別為IGGL。以WERIRB1為競(jìng)爭(zhēng)靶細(xì)胞，采用競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)分析1F8識(shí)別的抗原位點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明1F8與商品化單抗293C3識(shí)別完全不同的位點(diǎn)。選擇多個(gè)細(xì)胞株DAUDI、RAJI、HL60、WERIRB1、Y79，利用單抗1F8，經(jīng)間接免疫熒光標(biāo)記分析，檢測(cè)結(jié)果顯示DAUDI、RAJI、HL60細(xì)胞表面均未檢測(cè)到CDL33分子表達(dá)，而WERIRB1、Y79表面則檢測(cè)到CDL33高水平表達(dá)。由此表明所研制單抗1F8為特異性抗人CDL33單克隆抗體。

簡(jiǎn)介：上海第二醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文腫瘤相關(guān)抗原OVA66的細(xì)胞生物學(xué)功能研究姓名李美星申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)免疫學(xué)指導(dǎo)教師周光炎葛海良20050501學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明Y759884本人所呈交的學(xué)位論文是我在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含其他個(gè)人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。對(duì)本文的研究做出重耍貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中作了明確說(shuō)明并表示謝意。作者簽名蕘羔顯日期2望￡17學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解上海第二醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文蒔規(guī)定，學(xué)技有權(quán)保留學(xué)位論文并向國(guó)家主管部門(mén)或其指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版幫紙質(zhì)版。有權(quán)將學(xué)位論文用于非贏利目的的少量復(fù)制并允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書(shū)館被查閱。有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索。有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題錄摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后學(xué)位論文作者簽名駕笑吊日期2生?；?7隰刮≥P曠

簡(jiǎn)介：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文應(yīng)用消減雜交技術(shù)研究非小細(xì)胞肺癌基因表達(dá)譜的變化和TIG2基因生物學(xué)功能的研究姓名王紹成申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師趙雨杰20050501J亟匣應(yīng)用消減雜交技術(shù)研究非小細(xì)胞肺癌基因表達(dá)譜的變化和7ⅡG2基因生物學(xué)功能的研究隨著人類(lèi)基因組測(cè)序的逐步完成，功能基因組的研究成為今后的主要研究方向之一。我們采用消減雜交技術(shù)SUBTRAETIVEHYBRIDIZATION篩選與肺癌發(fā)生、發(fā)展相關(guān)的功能基因，通過(guò)臨床病人肺癌組織與其癌旁正常組織基因表達(dá)譜的變化，構(gòu)建差異表達(dá)的CDNA文庫(kù)，經(jīng)測(cè)序和RTPCR驗(yàn)證，篩選出與肺癌有重要貢獻(xiàn)的一組基因。我們從中選擇ⅡG2TAZAROTENEINDUCEDGENE2基因深入研究其對(duì)肺癌發(fā)生、發(fā)展的作用。經(jīng)RTPCR，我們發(fā)現(xiàn)TIG2MRNA在肺癌細(xì)胞中低表達(dá)或沉默，而在正常肺細(xì)胞呈程序性中表達(dá)。從正常肺細(xì)胞WI一38中克隆TIG2CDNA，通過(guò)體外構(gòu)建哺乳動(dòng)物表達(dá)重組質(zhì)粒PFLAGCMV／TIG2；PCINEO／ⅡG2，然后分別轉(zhuǎn)染肺癌細(xì)胞A2，LH7，免疫熒光揭示TIG2編碼蛋白主要定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，且分泌出去。培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞A2，LH7，BEL經(jīng)維甲酸不同濃度處理，發(fā)現(xiàn)11G2基因仍表達(dá)沉默，因此，肺癌細(xì)胞32，LH7，BEL是維甲酸無(wú)應(yīng)答細(xì)胞；然后經(jīng)去甲基化試劑5一A齟一CDR處理后，發(fā)現(xiàn)TIG2基因獲得重新表達(dá)，因此，推斷TIG2基因在肺癌細(xì)胞中表達(dá)沉默與DNA甲基化有關(guān)，經(jīng)CPG島軟件預(yù)測(cè)，發(fā)現(xiàn)弧G2基因調(diào)控區(qū)存在CPG島，文獻(xiàn)報(bào)道，在肺癌細(xì)胞中，維甲酸受體BRAR8常出現(xiàn)甲基化，抑制其表達(dá)，所以，NG2基因的表達(dá)沉默可能與RARB和／或ⅡG2甲基化有關(guān)。對(duì)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染’NG2CDNA的肺癌細(xì)胞株LH7一TIG2功能變化作深入研究，流式細(xì)胞儀分析其細(xì)胞周期，與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染相應(yīng)空載質(zhì)粒肺癌細(xì)胞株LH7一MOCK比較，發(fā)現(xiàn)G。期細(xì)胞數(shù)明顯增加25％_49％，G2／M期明顯下降1818％鶇00％；LH7一’NG2細(xì)胞增殖和侵襲能力明顯減弱等。同時(shí)，田G2基因的表達(dá)使ERK2P42活性降低或消失。綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果初步1

簡(jiǎn)介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文人乳腺癌腫瘤干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性之初探姓名莫敖申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)外科學(xué)（普通外科）指導(dǎo)教師吳誠(chéng)義20070401重慶醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究X作及取得的研究成果．據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得重慶醫(yī)科大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料，與我同．32作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意．申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任．學(xué)位論文作者簽名起啡碑坪學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解重慶醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期閶論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬壁慶醫(yī)科大學(xué)．本人保證畢韭高校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為重慶醫(yī)科大學(xué)．學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱．學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外。可以采用影印，縮印或其他手段保存論文．論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期

簡(jiǎn)介：第一部分PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣復(fù)合材料構(gòu)建及其體外生物相容性目的PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣構(gòu)建復(fù)合材料，并評(píng)價(jià)其體外生物相容性。方法（1）合成功能團(tuán)為丙烯酰基的枝化狀PEG，同時(shí)在去細(xì)胞瓣上引入巰基，通過(guò)丙烯?；c巰基發(fā)生邁克爾加成反應(yīng)，構(gòu)建PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣復(fù)合材料。（2）生物力學(xué)測(cè)試評(píng)價(jià)PEG交聯(lián)對(duì)去細(xì)胞瓣機(jī)械性能的影響；CCK8法檢測(cè)復(fù)合材料浸提液對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖率影響，以評(píng)價(jià)其生物相容性。結(jié)果復(fù)合材料構(gòu)建條件溫和、效果確切；復(fù)合材料抗拉強(qiáng)度明顯高于去細(xì)胞瓣，且與天然瓣膜抗拉強(qiáng)度相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。復(fù)合材料與去細(xì)胞瓣毒性評(píng)級(jí)均為0級(jí)，與陰性對(duì)照組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞在含復(fù)合材料浸提液的培養(yǎng)液中形態(tài)良好，增殖旺盛。結(jié)論P(yáng)EG交聯(lián)去細(xì)胞瓣的方法能夠構(gòu)建與天然瓣膜相似抗拉強(qiáng)度且無(wú)細(xì)胞毒性的復(fù)合材料。第二部分PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣多信號(hào)復(fù)合材料構(gòu)建第一節(jié)構(gòu)建RGD復(fù)合材料目的評(píng)價(jià)PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣復(fù)合材料結(jié)合粘附肽（精甘天冬氨酸RGD肽）的可行性和有效性。方法復(fù)合材料與1ML不同濃度（15MGML，1MGML，05MGML，025MGML）GRGDSPC肽溶液在37℃反應(yīng)，在不同時(shí)間點(diǎn)（1H，2H，4H），用分光光度法檢測(cè)復(fù)合材料結(jié)合GRGDSPC肽質(zhì)量，并行免疫熒光定性檢測(cè)，去細(xì)胞瓣作為陰性對(duì)照。結(jié)果GRGDSPC肽能有效地結(jié)合于復(fù)合材料，且一片復(fù)合材料與1MLGRGDSPC肽（1MGML）在37℃條件下反應(yīng)2H，結(jié)合GRGDSPC肽質(zhì)量最大為（079±001）MG。結(jié)論P(yáng)EG交聯(lián)去細(xì)胞瓣復(fù)合材料，能夠在體外有效地結(jié)合RGD肽，構(gòu)建RGD復(fù)合材料。第二節(jié)構(gòu)建VEGF復(fù)合材料目的評(píng)價(jià)PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣復(fù)合材料結(jié)合血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）的可行性和有效性。方法復(fù)合材料與1ML不同濃度（500PGML，1000PGML，2000PGML）VEGF溶液在37℃反應(yīng)，在不同時(shí)間點(diǎn)（1H，2H，4H，12H），用ELISA法檢測(cè)復(fù)合材料結(jié)合VEGF質(zhì)量，并行免疫熒光檢測(cè)，去細(xì)胞瓣作為陰性對(duì)照。結(jié)果VEGF能有效地結(jié)合于復(fù)合材料，且一片復(fù)合材料與1MLVEGF（1000PGML）在37℃反應(yīng)4H，其結(jié)合VEGF質(zhì)量最大為（89687±327）PG。結(jié)論P(yáng)EG交聯(lián)去細(xì)胞瓣復(fù)合材料，能夠在體外有效地結(jié)合VEGF，構(gòu)建VEGF復(fù)合材料。第三節(jié)構(gòu)建PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣多信號(hào)復(fù)合材料目的評(píng)價(jià)PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣復(fù)合材料同時(shí)結(jié)合RGD肽和VEGF的可行性和有效性。方法復(fù)合材料與1ML反應(yīng)液（包含1MGMLGRGDSPC肽和1000PGMLVEGF）在37℃反應(yīng)4H，對(duì)反應(yīng)后復(fù)合材料行免疫熒光檢測(cè)，去細(xì)胞瓣作為陰性對(duì)照。結(jié)果GRGDSPC肽和VEGF能同時(shí)有效地結(jié)合于復(fù)合材料。結(jié)論P(yáng)EG交聯(lián)去細(xì)胞瓣復(fù)合材料，能夠在體外有效地結(jié)合RGD肽和VEGF，構(gòu)建PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣多信號(hào)（RGD、VEGF）復(fù)合材料。第三部分PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣多信號(hào)復(fù)合材料生物學(xué)性能研究第一節(jié)內(nèi)皮祖細(xì)胞分離、培養(yǎng)與鑒定目的分離、培養(yǎng)、鑒定臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞，為其作為組織工程種子細(xì)胞提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法密度梯度離心法分離新鮮臍血中單個(gè)核細(xì)胞，在含堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子培養(yǎng)液中培養(yǎng)，通過(guò)形態(tài)學(xué)、免疫熒光和流式細(xì)胞儀等對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行鑒定；并與臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行增殖和遷移能力比較。結(jié)果隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，貼壁細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變，從小圓變成梭形，逐漸形成特征性克隆和典型成熟內(nèi)皮細(xì)胞鵝卵石樣形態(tài)；體外培養(yǎng)7天后，90％以上貼壁細(xì)胞呈DILACLDL和FITCUEAI雙染陽(yáng)性；貼壁細(xì)胞流式細(xì)胞儀分析顯示培養(yǎng)7D的細(xì)胞VEGFR2、CD34和CD133表達(dá)分別占7735±486％、5242±664％和1936±214％，培養(yǎng)28天的細(xì)胞VEGFR2和CD34表達(dá)分別占8106±731％和762±314％，而未檢測(cè)到CD133表達(dá)；人內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖和遷移能力明顯高于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。結(jié)論用密度梯度離心法和貼壁篩選法，可成功分離出臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞，該方法簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、可行；且內(nèi)皮祖細(xì)胞可向內(nèi)皮細(xì)胞分化，增殖和遷移能力強(qiáng)，有望成為理想種子細(xì)胞。第二節(jié)PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣多信號(hào)復(fù)合材料生物學(xué)性能測(cè)定目的研究PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣多信號(hào)（RGD、VEGF）復(fù)合材料對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞粘附和增殖的影響，為進(jìn)一步構(gòu)建TEHV提供依據(jù)。方法A組去細(xì)胞瓣，B組PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣復(fù)合材料，C組VEGF復(fù)合材料，D組為RGD復(fù)合材料，E組PEG交聯(lián)去細(xì)胞瓣多信號(hào)（RGD、VEGF）復(fù)合材料。然后在各組材料上種植EPCS，分別在種植后2H、4H、8H用細(xì)胞計(jì)數(shù)和3HTDR摻入法檢測(cè)各組材料上細(xì)胞數(shù)和每分鐘脈沖數(shù)，反映EPCS在各組材料上粘附性；分別在種植后2D、4D、8D，用細(xì)胞計(jì)數(shù)和3HTDR摻入法檢測(cè)各組瓣膜支架上細(xì)胞數(shù)和每分鐘脈沖數(shù)，反映各組材料上EPCS增殖情況。在種植8D時(shí)，取各組瓣膜支架行蘇木素伊紅染色和掃描電鏡，以檢測(cè)EPCS在各組材料上生長(zhǎng)情況，并取E組支架材料上細(xì)胞行RTPCR檢測(cè)TPA和ENOS的表達(dá)，以評(píng)價(jià)新內(nèi)皮抗血栓形成功能。結(jié)果（1）種植后2H、4H、8H時(shí)各組細(xì)胞數(shù)和每分鐘脈沖數(shù)為D組＞E組＞C組＞A組＞B組，其中A組與B組之間各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞005）8H時(shí)D組與E組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞005），其余時(shí)間點(diǎn)各組之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）。（2）種植2D、4D、8D時(shí)各組細(xì)胞數(shù)和每分鐘脈沖數(shù)為A組均大于B組（P＞005），C組、D組和E組均大于同一時(shí)間點(diǎn)A組和B組（P＜005）；種植2D時(shí)，E組＞C組（P＜005），D組＞E組（P＞005）；種植4D時(shí)，E組＞D組（P＜005），D組＞C組（P＜005）；種植8D時(shí)，E組＞D組（P＜005），D組＞C組（P＞005）。（3）蘇木素伊紅染色和掃描電鏡檢測(cè)顯示種植8D后，與其它組相比，E組瓣膜支架上可見(jiàn)一致密融合細(xì)胞層，并且該新內(nèi)皮層細(xì)胞TPA和ENOS表達(dá)與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞相似。結(jié)論P(yáng)EG交聯(lián)去細(xì)胞瓣多信號(hào)（RGD、VEGF）復(fù)合材料上RGD肽和VEGF，能夠協(xié)同促進(jìn)內(nèi)皮祖細(xì)胞在復(fù)合材料上粘附和增殖，有利于TEHV構(gòu)建。

簡(jiǎn)介：目的成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性改變是皮膚衰老、皺紋出現(xiàn)的基礎(chǔ)。衰老成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性改變包括細(xì)胞增殖周期改變，細(xì)胞凋亡率增加，膠原代謝異常，彈性蛋白含量減少等。本研究擬探討黃芪甲苷對(duì)人皺紋、非皺紋皮膚成纖維細(xì)胞、老年皮膚成纖維細(xì)胞的影響。從細(xì)胞水平揭示皮膚衰老的本質(zhì)，為進(jìn)一步探討皮膚衰老機(jī)制和開(kāi)發(fā)抗衰老護(hù)膚品提供新思路方法取相同年齡段面部皮膚皺紋與非皺紋深處的成纖維細(xì)胞；及不同年齡段面部相同部位的皮膚成纖維細(xì)胞，建立單層細(xì)胞培養(yǎng)體系，并將成纖維細(xì)胞分別按部位、年齡分組。選擇生長(zhǎng)狀態(tài)良好的三株皮膚成纖維細(xì)胞1例中年男性非皺紋皮膚39歲，1例中年男性皺紋皮膚47歲，1例老年男性面頰皮膚75歲，分別加入不同濃度的黃芪甲苷，干預(yù)24H，72H，120H后，用四甲基偶氮唑鹽MTT法檢測(cè)三株皮膚成纖維細(xì)胞的增殖活性；用免疫組化法檢測(cè)三株皮膚成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白，Ⅲ型膠原蛋白和彈性蛋白的表達(dá)；用流式細(xì)胞儀檢測(cè)三株皮膚成纖維細(xì)胞的凋亡率。結(jié)果1黃芪甲苷濃度為5ΜGML～20ΜGML時(shí)，可明顯促進(jìn)皺紋和非皺紋皮膚成纖維細(xì)胞的增殖，10ΜGML作用最明顯。2黃芪甲苷濃度為10ΜGML時(shí)，可以促進(jìn)皺紋、非皺紋皮膚成纖維細(xì)胞和老年皮膚成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原表達(dá)，120小時(shí)作用最明顯。3黃芪甲苷濃度為10ΜGL時(shí)，作用120小時(shí)后，皺紋和非皺紋皮膚成纖維細(xì)胞凋亡率均有明顯下降P＜001。結(jié)論黃芪甲苷在一定濃度時(shí)具有改善人皺紋和非皺紋皮膚成纖維細(xì)胞生物學(xué)特性的作用，表明該藥既能預(yù)防皺紋出現(xiàn)，對(duì)已經(jīng)形成的皺紋也有一定的改善作用。本研究為黃芪甲苷運(yùn)用于醫(yī)學(xué)美容界延緩皮膚衰老、預(yù)防皺紋形成提供了細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)室客觀依據(jù)。

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)R7396密級(jí)單位代碼10312學(xué)號(hào)20121580南京醫(yī)科犬掌碩士學(xué)位論文題目E墾Y墜叢里2△透昱盎塑疸細(xì)胞鯉塑盟墓生物堂接連的髭響研究生指導(dǎo)教師學(xué)科專(zhuān)業(yè)學(xué)院名稱(chēng)完成時(shí)間陳志陳仁杰教授耳鼻咽喉科學(xué)南京醫(yī)科大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院二。一五年五月目錄中文摘要L英文摘要4前言7研究一高表達(dá)EB病毒編碼LMP2A基因鼻咽癌細(xì)胞株的構(gòu)建及鑒定前言10材料與方法10結(jié)果20討論23研究二LMP2A誘導(dǎo)鼻咽癌細(xì)胞上皮問(wèn)質(zhì)轉(zhuǎn)化和對(duì)其生物學(xué)特性的影響前。言25材料與方法25結(jié)果32討論38小結(jié)41參考文獻(xiàn)42文獻(xiàn)綜述46參考文獻(xiàn)52附錄縮略語(yǔ)58攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文60致謝6L

簡(jiǎn)介：研究生個(gè)人簡(jiǎn)介姓名紀(jì)建永性別男年齡28歲學(xué)習(xí)及工作經(jīng)歷時(shí)間單位及職務(wù)200907畢業(yè)于泰山醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)，獲醫(yī)學(xué)學(xué)士學(xué)位201009考入徐州醫(yī)學(xué)院攻讀神經(jīng)外科碩士學(xué)位研究生期間臨床、科研成果及獲獎(jiǎng)情況‘時(shí)間一一項(xiàng)目2011年臨床培訓(xùn)12個(gè)月2012年通過(guò)國(guó)家執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格考試，通過(guò)CET62013年研究生期間修滿20學(xué)分，核心期刊發(fā)表文章一篇徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文縮略詞ACR姆BCPBISBSACCK8D1H20D～匝MDMSOFBSFNNBTNCODPA、EPBSPMSFRPMISDSS垠NATEMEDACRYLAMIDE縮略詞表ABBREVIATIONALKALINEPHOSPHATASE5_BROMOMCHLOM3INDOLYLPHOSPHATEBISACRYAMIDEBOVINEELUNLALBUMINCELLCOUNTINGKIT8DOUBLEDISTILLEDWATERDULBECCO’SMODIFIEDEAGLEMEDIADIMETHYLSULFOXIDEFETALBOVINESERUMFIBRONECTINNITROBLUETETRAZOLIUMNITROCELLULOSEOPTICALDENSITYPOLYACRYLAMIDEGELELECTROPHORESISPHOSPHATEBUFFEREDSALINEPHENYLMETHYLSULFONYLFLUORIDEROSWELLPARKMEMORIALINSTITUTESODIUMDODECYLSULFATESMALLINTERFERINGRN_ATETRAMETHYLETHYLENEDIAMINE中文全稱(chēng)丙烯酰胺單體堿性磷酸酶5溴4氯3吲哚磷酸丙烯酰胺雙體牛血清白蛋白細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒雙蒸水DULBECCO改良培養(yǎng)基二甲基亞砜胎牛血清纖維連接蛋白氮蘭四唑硝酸纖維素光密度聚丙烯酰胺凝膠電泳磷酸鹽緩沖液苯甲基磺酰氟洛斯維公園紀(jì)念研究所十二烷基磺酸鈉小干擾RNA四甲基乙二胺

簡(jiǎn)介：蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明』749839本人鄭重聲明所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名送數(shù)日蘇州大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)聲明㈣㈣㈣㈣FFJ『『『『『J10Y173339I‘本人完全了解蘇州大學(xué)關(guān)于收集、保存和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學(xué)。本學(xué)位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致口蘇州大學(xué)有權(quán)向國(guó)家圖書(shū)館、中國(guó)社科院文獻(xiàn)信息情報(bào)中心、中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所含萬(wàn)方數(shù)據(jù)電子出版社、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊光盤(pán)版電子雜志社送交本學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索。涉密論文口本學(xué)位論文屬在年一月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文口論文作者簽名遂，邀日導(dǎo)師簽名日期

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多體外培養(yǎng)人胎肝細(xì)胞與永生化L-02肝細(xì)胞的生物學(xué)性狀比較.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文人參皂甙RG1對(duì)人牙周膜細(xì)胞生物學(xué)活性及大鼠牙周組織相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)的影響姓名楊倩申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師余占海20090601蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文3、人參皂甙RGL對(duì)牙周膜細(xì)胞蛋白含量的影響與對(duì)照組相比人參皂甙RGL001／TMOL／L，O05／ZMOL／L，01／MOL／L組72小時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液中蛋白含量均明顯高于對(duì)照組P005。4、人參皂甙RGL對(duì)牙周膜細(xì)胞√蝴活性的影響與對(duì)照組相比人參皂甙RGL001／TMOLFL，005MOL／L，01／ZMOL／L組72小時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液中ALP活性均明顯高于對(duì)照組尸005。5、人參皂甙RGL對(duì)牙周膜細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的影響人參皂甙RGL001GMOL／L使人牙周膜細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子降低，最后維持在比加藥前低的靜息鈣水平上。6、人參皂甙R91對(duì)細(xì)胞周期的影響FCM檢測(cè)顯示經(jīng)001／TMOL／I人參皂甙RGL作用48H后，牙周膜細(xì)胞G1期細(xì)胞降低P005，S期細(xì)胞升高且細(xì)胞增殖指數(shù)PRI值SG2／M％顯著增高P005。7、大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎動(dòng)物模型的成功建立動(dòng)物采用牙間結(jié)扎加激素注射第4天后便出現(xiàn)了進(jìn)食減少、倦怠少動(dòng)等表現(xiàn)，符合中醫(yī)腎虛的癥狀，并且出現(xiàn)了牙槽骨疏松、牙槽嵴吸收、牙周袋形成等病理性改變。正常組大鼠則無(wú)上述表現(xiàn)。牙周炎組牙周組織中BGP表達(dá)明顯低于正常組，IL6表達(dá)明顯高于正常組P005。8、人參皂甙RGL對(duì)大鼠牙周組織中有關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)的影響從治療第二周起，治療組較牙周炎對(duì)照組牙周組織中的BGP水平明顯升高尸005；治療第三周起，治療組較對(duì)照組牙周組織中的IL6水平顯著降低P005，經(jīng)治療后的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物全身狀況也顯著改善。結(jié)論玻片覆蓋法可顯著提高人牙周膜細(xì)胞原代培養(yǎng)的成功率。人參皂甙RGL在一定濃度范圍內(nèi)能提高牙周膜細(xì)胞的增殖活性、蛋白合成及堿性磷酸酶活性。人參皂甙RGL使牙周膜細(xì)胞G1期細(xì)胞減少，S期細(xì)胞增加，細(xì)胞增殖指數(shù)PRI值SG2／M％增高，促進(jìn)更多的細(xì)胞進(jìn)人增殖狀態(tài)，且人參皂甙RGL可能通過(guò)改變細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子的濃度，達(dá)到其促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用。牙間結(jié)扎加糖皮質(zhì)激素注射的方法可成功地建立近似于人類(lèi)臨床牙周炎的動(dòng)物模型，為下～步研究中藥防治牙周炎提供了很好的實(shí)驗(yàn)基N