簡介：碩士學(xué)位論文磷酸鈣－膠原明膠仿生松質(zhì)骨支架構(gòu)建磷酸鈣－膠原明膠仿生松質(zhì)骨支架構(gòu)建及神經(jīng)遞質(zhì)多肽及神經(jīng)遞質(zhì)多肽SP促進(jìn)成骨轉(zhuǎn)化的研究促進(jìn)成骨轉(zhuǎn)化的研究培養(yǎng)類別全日制學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位一級學(xué)科專業(yè)類口腔醫(yī)學(xué)二級學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（頜面外科）研究方向頜骨缺損修復(fù)指導(dǎo)教師胡開進(jìn)教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位口腔醫(yī)院頜面外科二O一五年五月第四軍醫(yī)大學(xué)THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY分類號R782053UDC61631密級公開吳迪第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮略語表1中文摘要2英文摘要4前言7文獻(xiàn)回顧9正文17實(shí)驗(yàn)一磷酸鈣－膠原明膠仿生松質(zhì)骨支架的構(gòu)建171材料和儀器172方法173結(jié)果194討論21實(shí)驗(yàn)二神經(jīng)遞質(zhì)多肽SP促進(jìn)磷酸鈣－膠原明膠復(fù)合支架成骨轉(zhuǎn)化的研究251材料和儀器252方法263結(jié)果284討論34小結(jié)38參考文獻(xiàn)39個(gè)人簡歷和研究成果45致謝46

簡介：目的通過不同濃度的雙氯芬酸鈉干預(yù)全骨髓貼壁法培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS，BMSCS，觀察雙氯芬酸鈉對體外培養(yǎng)的SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖、凋亡及成骨分化的影響。方法應(yīng)用全骨髓貼壁法進(jìn)行原代培養(yǎng)，并通過表面抗原和成骨、成脂分化能力鑒定其為BMSCS，并計(jì)算其細(xì)胞倍增時(shí)間。采用不同濃度的雙氯芬酸鈉64MGL，32MGL，16MGL，08MGL，04MGL干預(yù)BMSCS，通過MTS法檢測雙氯芬酸鈉對BMSCS增殖的影響通過ANNEXINⅤFITC法檢測雙氯芬酸鈉對BMSCS凋亡的影響。不同濃度的雙氯芬酸鈉干預(yù)BMSCS，ANNEXINⅤPI雙染法檢測雙氯芬酸鈉對BMSCS細(xì)胞周期的影響。不同濃度的雙氯芬酸鈉進(jìn)行干預(yù)誘導(dǎo)BMSCS成骨分化，21天后茜素紅染色，觀察鈣結(jié)節(jié)形成情況。成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)BMCSS，64MGL的雙氯芬酸鈉干預(yù)，分別在第3天、7天以及14天進(jìn)行ALP染色，并提取總RNA采用RTPCR法檢測成骨相關(guān)基因ALP、OCN和ΒACTIN的表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用SPSS200軟件進(jìn)行分析，各試驗(yàn)組資料統(tǒng)計(jì)量均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差X±S表示，多樣本均值之間比較采用方差分析，兩兩比較應(yīng)DUNTT檢驗(yàn)，P＜005表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果細(xì)胞倍增時(shí)間約為28小時(shí)。雙氯芬酸鈉藥物干預(yù)細(xì)胞相對增值率較對照組明顯下降，細(xì)胞的生長抑制率明顯升高，各組細(xì)胞數(shù)量減少，形態(tài)改變（胞漿集中，核較明顯，失去典型的梭型，部分細(xì)胞發(fā)生凋亡，核固縮），上述改變與藥物的濃度呈相關(guān)性。PI染色流式檢測結(jié)果顯示絕大部分的細(xì)胞停滯在G1G0期，隨著藥物濃度的升高，進(jìn)入分裂期的細(xì)胞也隨之明顯減少。茜素紅染色發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，隨著雙氯芬酸鈉濃度的上升，鈣結(jié)節(jié)的數(shù)量呈減少的趨勢，64MGL組茜素紅染色幾乎沒有鈣結(jié)節(jié)形成。ALP染色結(jié)果顯示與對照組相比實(shí)驗(yàn)組的ALP的表達(dá)明顯減少。PCR結(jié)果顯示在成骨分化誘導(dǎo)的第3天實(shí)驗(yàn)組以及對照組ALPMRNA、OCNMRNA表達(dá)均較低在誘導(dǎo)成骨分化第7天，實(shí)驗(yàn)組與對照組ALPMRNA表達(dá)均明顯升高，實(shí)驗(yàn)組ALPMRNA表達(dá)升高趨勢較弱，OCNMRNA表達(dá)下降明顯，對照組OCNMRNA表達(dá)與第3天相比基本無差異成骨分化第14天，對照組ALPMRNA表達(dá)量出現(xiàn)明顯下降，實(shí)驗(yàn)組ALPMRNA表達(dá)與第7天相比無明顯差異，實(shí)驗(yàn)組OCNMRNA表達(dá)基本無變化。結(jié)論1、雙氯芬酸鈉能夠明顯抑制大鼠BMSCS增殖，并且顯著促進(jìn)了大鼠BMSCS的凋亡，并呈濃度依賴性。2、雙氯芬酸鈉對BMSCS的成骨分化能力有明顯抑制作用，并能夠抑制成骨相關(guān)基因表達(dá)，同樣呈濃度依賴性。提示雙氯芬酸鈉不僅在成骨細(xì)胞階段影響骨形成，而且早在BMSCS階段就已經(jīng)發(fā)揮其影響，雙氯芬酸鈉對骨折愈合不利影響可能此相關(guān)。

簡介：GNE肌病，舊稱遺傳性包涵體肌病HEREDITARYINCLUSIONBODYMYOPATHYHIBM、DMRV（DISTALMYOPATHYWITHRIMMEDVACUOLES，伴鑲邊空泡的遠(yuǎn)端肌?。┗騈ONAKA肌病，是一種罕見的常染色體隱性遺傳的遠(yuǎn)端肌病。GNE基因包含12個(gè)外顯子，編碼催化唾液酸合成的限速酶。GNE肌病臨床上主要2040歲起病，大多數(shù)病人在起病后1020年喪失獨(dú)自行走能力。起病表現(xiàn)為小腿前群肌無力和萎縮，因足背屈無力導(dǎo)致足下垂和步態(tài)異常。病情呈緩慢進(jìn)展，至疾病后期，下肢近端、上肢及中軸肌肉亦可受累。整個(gè)病程中股四頭肌始終相對回避。血清肌酸激酶CREATINEKINASE，CK水平正常范圍或輕至中度升高。肌電圖呈肌源性損害。肌肉病理特點(diǎn)是肌纖維萎縮和在萎縮的肌纖維中出現(xiàn)鑲邊空泡，可見肌間質(zhì)增生。肌纖維變性、壞死、再生少見，無明顯炎性細(xì)胞浸潤。電鏡下可見肌細(xì)胞胞漿和肌細(xì)胞核內(nèi)直徑810NM的管絲樣包涵體。目前GNE肌病報(bào)道最多的國家是日本和中東猶太人。國內(nèi)共報(bào)道GNE肌病患者53例，其中49例來自中國北方的北京和山東，4例來自臺灣。而中國南方尚未有大樣本量的報(bào)道。本研究選取中國南方的DMRV患者進(jìn)行GNE基因分析，回顧總結(jié)基因確診患者的臨床、病理和肌肉MRI資料，并分析基因型和臨床表型的關(guān)系，以期了解中國南方GNE肌病患者的特點(diǎn)，比較與中國北方患者之間的不同，并進(jìn)一步擴(kuò)大中國人群GNE肌病樣本量，探討與日本、中東地區(qū)之間的差異。本研究分為兩個(gè)部分第一部分中國南方地區(qū)GNE肌病患者基因突變分析。目的了解中國南方地區(qū)GNE基因突變的特點(diǎn)，與北方地區(qū)相比較。并進(jìn)一步探討與日本、中東地區(qū)之間GNE基因突變的差異。方法選取復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科神經(jīng)肌病組2005年2月至2014年3月收治的臨床病理特點(diǎn)符合入選標(biāo)準(zhǔn)的無血緣關(guān)系的散發(fā)病例共30例，入選標(biāo)準(zhǔn)如下青少年晚期或成年期起病的下肢遠(yuǎn)端肌無力和肌萎縮，以小腿前群受累為主；隨疾病進(jìn)展，股四頭肌相對回避；CK水平正?；蜉p至中度升高；肌電圖呈肌源性損害；肌肉病理需排除炎性肌病、肌營養(yǎng)不良、代謝性肌病等肌肉疾病。從入選病人的外周靜脈血白細(xì)胞或肌肉組織中提取基因組DNA，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR方法特異性擴(kuò)增GNE基因的第112號外顯子并進(jìn)行測序，與正常序列進(jìn)行比對分析，明確突變位點(diǎn)，分析是否發(fā)生氨基酸改變。結(jié)果⑴納入的30例患者中，基因診斷明確的GNE肌病患者共24例，其中8例為純合子333％，16例為復(fù)雜雜合子667％。24例患者均為漢族，分別來自中國南方的江西、浙江、安徽、上海和江蘇。其中23例于我院活檢，1例來自門診。⑵共發(fā)現(xiàn)23個(gè)GNE基因突變位點(diǎn)，包括18個(gè)錯(cuò)義突變783％PC13S、PF66V、PI106F、PR162C、PD176V、PY186H、PK245E、PR246W、PR246Q、PK353E、PL508S、PH509Y、PA524V、PF562S、PV572L、PA591V、PA638P、PG652E2個(gè)無義突變87％PY186X、PQ436X2個(gè)缺失突變87％PD515FSX2（C15431544DELGA）、PA600FSX43C1798DELG1個(gè)復(fù)雜雙突變43％PE329FSX43C985DELG987988GA＞TT。分別位于GNE基因的第2、3、4、6、8、9、10、11、12號外顯子。其中已知突變10個(gè)435％，新發(fā)突變13個(gè)565％PF66V、PI106F、PY186H、PY186X、PK245E、PE329FSX43、PK353E、PD515FSX2、PF562S、PA600FSX43、PA591V、PA638P、PG652E。而中國其他報(bào)道中，53例患者共發(fā)現(xiàn)18個(gè)突變位點(diǎn)，與本研究相同的突變位點(diǎn)僅6個(gè)。⑶在23個(gè)突變中，最常見的三個(gè)突變?yōu)镻D176V250％、PR246Q125％和PK353E104％。而中國北方報(bào)道的最常見的三個(gè)突變?yōu)镻L508S19％、PA631V15％和PD176V14％，僅PD176V為同一突變，但突變頻率相差較大。以上特點(diǎn)本研究與中國北方的報(bào)道有一定差別。結(jié)論針對中國南方GNE肌病患者的首個(gè)較大樣本量的研究，首次在中國GNE肌病患者中發(fā)現(xiàn)了缺失突變、復(fù)雜雙突變及位于GNE基因第6號和第8號外顯子的突變。與中國的其他報(bào)道相比，本研究突變位點(diǎn)的分布范圍更加分散，突變形式更加多樣。本研究突變熱點(diǎn)與中國其他報(bào)道也不盡相同。除中國其他研究中納入了家族性患者之外，二者的差別也可能與患者所在的地域不同有關(guān)。第二部分中國南方地區(qū)GNE肌病患者臨床特點(diǎn)及基因型臨床表型關(guān)系分析。目的對基因診斷明確的24例GNE肌病患者的臨床表現(xiàn)、肌肉MRI和病理特點(diǎn)進(jìn)行回顧總結(jié)，并分析基因型與臨床表型的關(guān)系。方法收集24例經(jīng)GNE基因診斷明確的患者的臨床資料、血液生化指標(biāo)、肌電圖等檢查結(jié)果。根據(jù)MERCURI提出的T1WI觀察肌肉脂肪化的評估標(biāo)準(zhǔn)對10例有肌肉MRI資料患者的肌肉MRI進(jìn)行臀部和下肢共18塊肌肉的脂肪化評分?；仡?3例有肌肉病理資料的病理特點(diǎn)，主要分析HE染色和GOMI染色。結(jié)合第一部分，進(jìn)行基因型與臨床表型之間關(guān)系的分析。結(jié)果⑴24例患者中男女比例為1311。發(fā)病年齡1552歲，平均332±88歲（中國其他報(bào)道205±81歲，P＜00001）。病程（起病至就診間隔時(shí)間）117年，平均504±44年。4例有父母近親婚配史167％。17例708％以單肢或雙下肢無力足下垂起病。體格檢查中，抬頭肌受累者（抬頭肌力＜5級）12人500％。下肢肌無力全部為遠(yuǎn)端重于近端，脛前肌重于腓腸肌。所有患者股四頭肌均相對回避100％。24例患者肌酸激酶CK水平1651826UL（正常值38174UL），平均值為4778±3809UL，中位數(shù)為3510UL。所有患者肌電圖均示肌源性損害。⑵GNE肌病患者的肌肉MRI檢查發(fā)現(xiàn)，大腿肌群以后群受累明顯，大腿前群肌肉中，股四頭肌外側(cè)頭、股中間肌、股直肌相對回避，而股四頭肌內(nèi)側(cè)頭輕度受累大腿外側(cè)群的縫匠肌輕度受累大腿后群肌肉整體受累嚴(yán)重，但其中股薄肌相對回避為中度受累小腿前后群肌肉均為中度到重度受累，以脛前肌、比目魚肌和腓腸肌內(nèi)側(cè)頭受累最為嚴(yán)重。⑶23例患者肌肉病理特點(diǎn)符合己報(bào)道的典型特征可見細(xì)胞大小不等炎性細(xì)胞浸潤、變性、壞死和再生均少見，即使出現(xiàn)程度亦較輕可見成簇萎縮肌纖維和脂肪結(jié)締組織增生在15例652％患者中發(fā)現(xiàn)鑲邊空泡。⑷PD176V為本研究中最常見的突變位點(diǎn)，對比發(fā)現(xiàn)攜帶該突變的患者發(fā)病年齡明顯更晚（368±104VS296±52，P00432），抬頭肌力明顯更易受累75％VS25％，P0014，股四頭肌力輕度受累比例更高50％VS25％。由于樣本量的限制，部分?jǐn)?shù)值的比較在統(tǒng)計(jì)學(xué)上并無差異，但是可以看出一定趨勢。而攜帶缺失突變和無義突變的患者在臨床表現(xiàn)上與其他患者相比無明顯差異。結(jié)論由于中國其他報(bào)道大部分來自中國北方，因此一定程度上可代表中國北方GNE肌病患者的特點(diǎn)。中國南方與中國北方的GNE肌病患者相比，發(fā)病年齡明顯更晚。臨床癥狀上與GNE肌病典型表現(xiàn)一致。肌肉病理特點(diǎn)與典型GNE肌病相符。鑲邊空泡的出現(xiàn)并非診斷GNE肌病的必須條件，其出現(xiàn)與否與活檢部位的選擇和疾病的進(jìn)展程度有關(guān)。肌肉MRI檢查是一種對GNE肌病進(jìn)行鑒別診斷的很好的方法，T1WI可觀察肌肉脂肪化程度。含PD176V突變的患者發(fā)病年齡更晚，抬頭肌力更易受累。

簡介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文倍他福林對大鼠子宮平滑肌作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名晏飛申請學(xué)位級別碩士專業(yè)藥理學(xué)指導(dǎo)教師董志傅潔民20090501福林對大鼠血壓和心率的影響。結(jié)果1倍他福林1010_10‘5M和利托君109104M對未孕大鼠離體子宮平滑肌條的自發(fā)性收縮都呈劑量依賴性抑制作用。倍他福林的晶AX和PLC50分別為80324549％和7744012顯著大于利托君的相應(yīng)值風(fēng)。X63634628％，PLC507284007尸005。2倍他福林1010_10石M和利托君10一10‘4M對妊娠大鼠離體子宮平滑肌條的自發(fā)性收縮都呈劑量依賴性抑制作用。倍他福林的互■觚7924007和PLC50100％市H比利托君的PIC506994O21，EM默65484693％更大，PO05。3倍他福林抑制縮宮素和KCL誘發(fā)的子宮收縮抑制的效價(jià)PIC50分別為7694011和7744045比抑制PGF2N誘發(fā)收縮的效價(jià)PIC506774006大P005。4選擇性33AR拮抗劑SR59230A3X108310～M，PA291競爭性拮抗倍他福林對妊娠大鼠自發(fā)性收縮的抑制作用。而PAR拮抗劑美托洛爾3X108_3X10‘7M、P2AR拮抗劑ICI1185513X1083X10。7M則不能拮抗倍他福林的作用。5體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，倍他福林01LAG／KG／MIN10LAG／KG／MIN，持續(xù)靜脈輸注呈劑量依賴性抑制在體大鼠子宮的收縮，其效價(jià)是利托君ED301178LAG／KG／MIN的70倍。相反，正性變時(shí)作用低卻比利托君小PO05。結(jié)論三I

簡介：目的通過分別對體外培養(yǎng)條件下的骨骼肌兩型肌纖維細(xì)胞的標(biāo)志蛋白MHC基因同功型的檢測以探索適合骨骼肌兩型肌纖維細(xì)胞的培養(yǎng)條件為進(jìn)一步研究兩型肌纖維細(xì)胞的區(qū)別及轉(zhuǎn)化機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法實(shí)驗(yàn)以18只家兔作為研究對象不拘雌雄46周體重5001000G每項(xiàng)指標(biāo)檢測各用3只。動物分四組Ⅰ型和Ⅱ型骨骼肌組織組Ⅰ型和Ⅱ型骨骼肌消化細(xì)胞組Ⅰ型和Ⅱ型骨骼肌細(xì)胞常氧1、3、7天型和Ⅰ型和Ⅱ型骨骼肌細(xì)胞低氧3％O2培養(yǎng)組。取家兔后肢右側(cè)半膜肌的固有半膜肌亞部和副半膜肌背側(cè)亞部采用胰蛋白酶一步消化法用含15胎牛血清的高糖DMEM作為細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行常氧和低氧培養(yǎng)兩型肌纖維培養(yǎng)細(xì)胞分別在培養(yǎng)1天、3天、7天取材進(jìn)行觀察。最后用常氧及低氧培養(yǎng)3天的兩型骨骼肌細(xì)胞做反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)RTPCR鑒定和灰度值測定作對照以分析骨骼肌兩型肌纖維細(xì)胞MRNA標(biāo)志蛋白MHC的表達(dá)變化。結(jié)果1骨骼肌組織檢測結(jié)果固有半膜肌表達(dá)MHCⅠ及少量的MHCⅡ型副半膜肌表達(dá)MHCⅡAMHCⅡB型。2消化后未經(jīng)培養(yǎng)的細(xì)胞檢測結(jié)果固有半膜肌細(xì)胞表達(dá)MHCⅠ型、MHCⅡA和MHCⅡB型副半膜肌表達(dá)MHCⅡA、MHCⅡB型。3培養(yǎng)細(xì)胞檢測結(jié)果在常氧培養(yǎng)組固有半膜肌表達(dá)MHCⅡA、MHCⅡB不表達(dá)MHCⅠ型副半膜肌表達(dá)MHCⅡAMHCⅡB型不表達(dá)MHCⅠ型。在低氧培養(yǎng)組兩型骨骼肌細(xì)胞均表達(dá)為MHCⅡAMHCⅡB不表達(dá)MHCⅠ型。4我們選取骨骼肌組織組、培養(yǎng)后第3天的常氧培養(yǎng)組和低氧培養(yǎng)組進(jìn)行單因素方差分析統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示Ⅰ型肌纖維細(xì)胞在常氧及低氧條件的MHCⅠ型基因表達(dá)與組織相比較存在明顯差異P005。低氧組與常氧組相比MHCⅠ、MHCⅡA較高而MHCⅡB較低。Ⅱ型肌纖維細(xì)胞在常氧及低氧條件的基因MHCⅠ、MHCⅡA、MHCⅡB和MHCⅡX型表達(dá)與組織相比較無明顯差異P005。低氧組與常氧組比較MHCⅠ、MHCⅡB較高M(jìn)HCⅡA較低。結(jié)論1含15胎牛血清高糖DMEM適合骨骼肌細(xì)胞生長。2骨骼肌兩型肌纖維在上述培養(yǎng)條件下均有由Ⅰ型纖維向Ⅱ型纖維轉(zhuǎn)化的趨勢。3低氧培養(yǎng)條件有促進(jìn)Ⅰ型纖維向Ⅱ型纖維轉(zhuǎn)化的作用。

簡介：液泡ATP酶是一個(gè)由至少14個(gè)蛋白亞單位組成的蛋白復(fù)合體負(fù)責(zé)生物體內(nèi)氫離子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)在生物體內(nèi)發(fā)揮重要而多樣的生理功能。在破骨細(xì)胞吸收骨質(zhì)過程中液泡ATP酶大量聚集到破骨細(xì)胞極化的皺褶緣上通過大量氫離子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)將骨吸收腔內(nèi)的PH值下調(diào)至約45左右開始溶解礦化的無機(jī)礦物質(zhì)與此同時(shí)該酸性環(huán)境還能激活基質(zhì)蛋白降解酶降解骨膠原等有機(jī)礦物質(zhì)實(shí)現(xiàn)破骨細(xì)胞骨吸收功能。遺傳學(xué)研究已經(jīng)證實(shí)液泡ATP酶A3亞單位發(fā)生突變是導(dǎo)致50％骨質(zhì)硬化癥的分子基礎(chǔ)。因此液泡ATP酶在破骨細(xì)胞骨吸收中發(fā)揮重要功能。本研究分主要分兩部分展開首先我們發(fā)現(xiàn)了液泡ATP酶輔助性亞單位AC45在破骨細(xì)胞中通過調(diào)節(jié)液泡ATP酶VO結(jié)構(gòu)域的穩(wěn)定性發(fā)揮功能闡明了AC45在破骨細(xì)胞骨吸收過程中的分子生物學(xué)機(jī)制其次我們研發(fā)靶向抑制液泡ATP酶的新型化學(xué)物SALIPHE證實(shí)了該化合物能有效抑制破骨細(xì)胞液泡ATP酶介導(dǎo)的骨吸收進(jìn)而有效防治磨損顆粒導(dǎo)致的骨溶解為臨床治療破骨細(xì)胞相關(guān)疾病提供了新的治療方法。在本研究中我們首先通過生物共振能量發(fā)光轉(zhuǎn)移法發(fā)現(xiàn)液泡ATP酶V0結(jié)構(gòu)域輔助性亞單位AC45與A3和C亞單位之間具有強(qiáng)烈的蛋白蛋白作用提示AC45在液泡ATP酶氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)過程中可能發(fā)揮重要作用。在此基礎(chǔ)上我們深入研究發(fā)現(xiàn)液泡ATP酶AC45亞單位在破骨細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)并在破骨細(xì)胞骨吸收過程中通過囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)集中到皺褶緣表面。我們進(jìn)一步采用基因沉默方法發(fā)現(xiàn)AC45對破骨細(xì)胞的骨吸收功能具有決定性作用AC45基因沉默后液泡ATP酶所介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)酸化功能障礙導(dǎo)致骨吸收受限。研究中我們意外地發(fā)現(xiàn)AC45對破骨細(xì)胞的縫合區(qū)形成、破骨細(xì)胞的分化和破骨細(xì)胞的融合具有重要的功能表明AC45在破骨細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮多樣的生物學(xué)功能。為了進(jìn)一步研究液泡ATP酶在生物體內(nèi)的作用我們試圖構(gòu)建破骨細(xì)胞特異性的AC45基因敲除小鼠。然而在AC45基因中插入新霉素位點(diǎn)影響了AC45基因的表達(dá)導(dǎo)致AC45全身性基因敲除小鼠表現(xiàn)為胚胎致死。進(jìn)一步采用體外和體內(nèi)蛋白表達(dá)和蛋白相互作用研究手段我們發(fā)現(xiàn)在有效沉默AC45基因表達(dá)后液泡ATP酶V0結(jié)構(gòu)域其他各個(gè)亞單位之間的相互作用減弱液泡ATP酶V0結(jié)構(gòu)域穩(wěn)定性下降各個(gè)蛋白亞單位降解加快最終導(dǎo)致破骨細(xì)胞功能下降體外和小鼠胚胎致死體內(nèi)。我們的研究闡明了AC45在穩(wěn)定液泡ATP酶V0結(jié)構(gòu)域中的重要作用。在深入分析液泡ATP酶在生物體內(nèi)的分子作用機(jī)制基礎(chǔ)上我們研究了新型液泡ATP酶抑制劑SALIPHE在治療破骨細(xì)胞相關(guān)的骨溶解疾病中的作用。我們通過體外研究證實(shí)了液泡ATP酶抑制劑SALIPHE能有效抑制破骨細(xì)胞的骨吸收功能其作用機(jī)制為液泡ATP酶抑制劑抑制細(xì)胞內(nèi)酸化和破骨細(xì)胞縫合區(qū)形成。我們還發(fā)現(xiàn)液泡ATP酶抑制劑通過阻RANKL介導(dǎo)的NFKB和NFATC1信號通路抑制了破骨細(xì)胞的分化和融合。與大量的體外分子機(jī)制研究相一致我們的體內(nèi)動物模型研究證實(shí)了液泡ATP酶抑制劑能有效抑制磨損顆粒介導(dǎo)的骨溶解?？傊狙芯可钊敕治隽艘号軦TP酶在破骨細(xì)胞中的分子機(jī)制并發(fā)現(xiàn)能靶向作用于該蛋白復(fù)合體的新型液泡ATP酶抑制劑為臨床治療破骨細(xì)胞相關(guān)疾病提供了一個(gè)新方向。

簡介：點(diǎn)擊查看更多外源性磷酸肌酸(護(hù)心通)對開心手術(shù)病人的心肌保護(hù)作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的測定SARS后骨壞死患者高凝和低纖溶傾向的指標(biāo)變化和相關(guān)基因探討SARS后骨壞死的病因?qū)W以便用于非創(chuàng)傷性骨壞死的早期診斷和易感人群的篩選方法取61例SARS后骨壞死患者抽取空腹肘靜脈血另取健康人群52名為對照應(yīng)用凝血儀和酶標(biāo)儀酶聯(lián)免疫吸附ELISA、免疫比濁等方法測定凝血、纖溶指標(biāo)活化部分凝血活酶時(shí)間APTT、蛋白CPC、活化蛋白C抵抗APCR、抗凝血酶ⅢATⅢ、纖溶酶原激活抑制物PAI、纖溶酶原PLG、血管假性血友病因子VWF、D二聚體定量DD、纖維蛋白原定量測定FIB、血清脂蛋白ALPA、載脂蛋白BAPOB、血漿同型半胱氨酸HCY抗心磷脂抗體ACL的IGA、IGG和IGM并提取全血基因組DNA應(yīng)用PCR測定因子VLEIDEN突變、凝血酶原G20210A突變應(yīng)用PCR固相寡核苷酸連接分析SPOLA法測定PAI1基因4G5G多態(tài)性目的探討納米晶膠原基骨和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在股骨頭壞死缺損修復(fù)的效果利用納米材料和組織工程技術(shù)探索納米晶膠原基骨和間充質(zhì)干細(xì)胞保存股骨頭治療的應(yīng)用前景方法應(yīng)用新西蘭白兔建立雙側(cè)股骨頭內(nèi)骨缺損模型并分為3組A組為制作缺損而不填充任何材料B組為單純填充納米晶膠原基骨C組填充納米晶膠原基骨和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的復(fù)合材料對植入后4周、8周、12周的股骨頭行影像學(xué)中X線攝片、高分辨三維CT觀察和同步輻射相對襯度硬X線成像觀察以及病理學(xué)的HE染色、改良GOLDER三染檢查和電鏡觀察通過形態(tài)組織學(xué)和影像學(xué)觀察納米晶膠原基骨和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對組織的修復(fù)作用以及降解替代過程

簡介：目的1建立理想的大鼠骨質(zhì)疏松實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，為研究中西藥物干預(yù)對骨質(zhì)疏松大鼠骨生物力學(xué)特性、骨密度及羥脯氨酸含量變化的影響提供有效地途徑，同時(shí)為利用骨密度儀進(jìn)行骨量測定提供良好的平臺。2通過采用骨密度儀對骨骼礦物質(zhì)含量的測定，分析骨質(zhì)疏松骨量丟失的情況，證實(shí)造模是否成功。造模成功后，對各組大鼠進(jìn)行3個(gè)月藥物干預(yù)，然后測定股骨和腰椎的生物力學(xué)特性、骨密度、腰椎羥脯氨酸含量變化。綜合分析上述結(jié)果，探討骨的生物力學(xué)與骨密度及羥脯氨酸含量是否存在相關(guān)關(guān)系，中西藥物治療骨質(zhì)疏松癥的療效及作用機(jī)制，為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的治療藥物的選擇提供理論基礎(chǔ)。方法1模型制備3月齡未交配雌性WISTAR級別大鼠60只（南方醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供），按體重隨機(jī)分為6組分別為正常對照組（SHAM）、去卵巢手術(shù)組（OVX）、鮭魚降鈣素干預(yù)組（C）、替勃龍片干預(yù)組（T）、替勃龍片和鮭魚降鈣素聯(lián)用干預(yù)組（CT）及仙靈骨葆膠囊干預(yù)組（XL），每組10只。在2戊巴比妥鈉（50MGKG1）腹腔注射麻醉下，采取腰背部正中切口切除大鼠雙側(cè)卵巢，SHAM組只切除與卵巢等量的脂肪組織。術(shù)后3天給予16萬U100G肌注青霉素預(yù)防感染。對各組大鼠的觀測觀察造模期間大鼠的飲食、飲水、活動、精神狀態(tài)等情況，并記錄體重變化。2藥物干預(yù)方案術(shù)后自由喂養(yǎng)3個(gè)月，對正常對照組和去卵巢組進(jìn)行骨密度測定，確保大鼠造模成功后，按每2周記錄的大鼠體重，經(jīng)人鼠藥量換算后準(zhǔn)確給預(yù)藥物干預(yù)。藥物用量用法如下密鈣息注射液，大鼠451UKG1D1，肌肉注射；替勃龍片009片KG1D1，仙靈骨葆膠囊054粒KG1D1，上兩藥研碎稀釋灌胃。3指標(biāo)檢測造模結(jié)束時(shí)空白對照組與模型對照組骨密度的檢測；藥物干預(yù)3個(gè)月后，過量麻醉處死大鼠，取L5腰椎及股骨標(biāo)本，測定各組大鼠股骨和腰椎的骨密度，大鼠股骨三點(diǎn)彎曲和L5腰椎壓縮力學(xué)試驗(yàn)及L5腰椎羥脯氨酸含量的測定。4統(tǒng)計(jì)方法所有數(shù)據(jù)使用SPSS130軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差（X±S）表示。大鼠體重變化趨勢采用重復(fù)測量方差分析；造模結(jié)束時(shí)兩組均數(shù)之間比較采用T檢驗(yàn)；藥物干預(yù)3個(gè)月后，多組均數(shù)間比較，滿足方差齊性，采用方差分析多重比較LSD法；不滿足方差齊性，采用WELCH檢驗(yàn)多重比較用TAMBANEST2法；L5椎體最大載荷與HPY含量進(jìn)行相關(guān)性分析；檢驗(yàn)水準(zhǔn)為P005）。說明上述藥物（鮭魚降鈣素除外）干預(yù)對大鼠右側(cè)股骨BMD均能明顯起到抑制骨丟失的效果，但改善的程度明顯沒有達(dá)到正常的水平。22腰椎BMD的組間比較。與OVX組相比較，除C組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0557），其余各組均有顯著性差異（P005），但是CT組干預(yù)效果明顯優(yōu)于T組和XL組（P005），但此三組與C組之間有顯著性意義。說明替勃龍片、替勃龍與鮭魚降鈣素聯(lián)用及仙靈骨葆膠囊對改善骨質(zhì)疏松大鼠腰椎的生物力學(xué)強(qiáng)度的效果較鮭魚降鈣素好，三者所起作用大致相當(dāng)。24L5腰椎最大載荷的組間比較。與OVX組相比，各組均有顯著性意義（P005），CT組與三者的比較有顯著性意義（P005）。說明鮭魚降鈣素、替勃龍片及仙靈骨葆膠囊對骨質(zhì)疏松大鼠腰椎生物力學(xué)強(qiáng)度有明顯的改善作用，而鮭魚降鈣素與替勃龍片聯(lián)用效果更好。3L5腰椎羥脯氨酸含量的測定結(jié)果羥脯氨酸含量與腰椎最大載荷不符合正態(tài)分布，應(yīng)用SPEARMAN相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析，相關(guān)系數(shù)R0964，P001。結(jié)果羥脯氨酸含量與腰椎最大載荷呈高度直線相關(guān)性。結(jié)論1雙側(cè)卵巢切除術(shù)是原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥比較理想的造模方法。本實(shí)驗(yàn)所建立的模型，成功的模擬了由于絕經(jīng)后雌激素分泌下降對骨質(zhì)造成的不良影響，最終造成骨質(zhì)疏松的主要機(jī)理效應(yīng)，為研究藥物干預(yù)對骨質(zhì)疏松癥骨骼生物力學(xué)特性的影響提供了較好的動物模型。2卵巢切除所導(dǎo)致骨質(zhì)疏松，不僅導(dǎo)致骨密度下降，而且膠原含量減少和質(zhì)量下降。骨膠原含量下降與骨生物力學(xué)強(qiáng)度降低有明顯的相關(guān)關(guān)系，骨質(zhì)疏松性骨折與膠原含量下降有關(guān)。替勃龍片、仙靈骨葆膠囊及降鈣素能增加骨膠原含量，為骨礦化提供框架核心。3降鈣素雖然不能有效增加骨密度，但顯著提高骨質(zhì)量。4仙靈骨葆膠囊能有提高骨密度及骨的生物力學(xué)的作用，是一個(gè)值得推廣的藥物。5替勃龍片、仙靈骨葆膠囊及降鈣素均能明顯改善骨質(zhì)疏松大鼠的生物力學(xué)性能，從而降低骨質(zhì)疏松性骨折的風(fēng)險(xiǎn)，而以降鈣素與替勃龍片聯(lián)用效果更好。

簡介：目的模擬髖臼重建打壓植骨過程比較兩種大小植骨顆粒710MM顆粒骨與骨泥約2MM的力學(xué)性能分析其對植骨后假體穩(wěn)定性的影響。方法制作兩種冷凍新鮮松質(zhì)骨顆粒分別置入打壓裝置中于第3、5、10、20、30、40、50次打壓后測量高度、彈性模量第50次打壓后測量屈服強(qiáng)度及大量擠出強(qiáng)度第5、10、30、50次打壓后測量骨密度。結(jié)果710MM顆粒骨高度、彈性模量及大量擠出強(qiáng)度等方性能優(yōu)于骨泥屈服強(qiáng)度與骨泥無明顯差別。710MM顆粒骨的骨密度打壓早期低于骨泥隨著打壓次數(shù)的增加其值迅速增加表現(xiàn)出更高的致密性。結(jié)論710MM顆粒骨在體外實(shí)驗(yàn)中的主要力學(xué)指標(biāo)優(yōu)于骨泥這與SLOOFF等人提出的髖臼重建中使用大植骨顆粒的觀點(diǎn)相符。良好的力學(xué)性能可提供較高的初始穩(wěn)定性促進(jìn)假體周圍骨質(zhì)及纖維組織的長入有利于假體的長期穩(wěn)定。

簡介：目的研究異氟烷ISOFLURANEISO肌肉松弛MUSCLERELAXATION作用的主要部位及其與NMDA和GABAA受體的關(guān)系。方法采用一種可以進(jìn)行在體肌力測定的新型儀器YLS13A大小鼠抓力儀，測定小鼠的抓力數(shù)值大小可反映動物肌肉的收縮強(qiáng)度，用來研究藥物的肌松作用。觀察、比較小鼠側(cè)腦室注射INTRACEREBROVENTRICULARINJECTIONICV、鞘內(nèi)注射INTRATHECALINJECTIONIT不同劑量的異氟烷的肌松作用。觀察、比較小鼠腹腔注射（INTRAPERITONEALINJECTIONIP）異氟烷2MIN后再鞘內(nèi)或側(cè)腦室注射不同劑量的NMDA或荷包牡丹堿BICUCULLINE，BIC對異氟烷肌松作用的影響。結(jié)果1鞘內(nèi)注射異氟烷002ΜLG1、004ΜLG1和008ΜLG1后各時(shí)間點(diǎn)小鼠抓力與ACSF組和基礎(chǔ)抓力相比均減小P＜005或P＜001；且異氟烷劑量越大，小鼠抓力減小越明顯，R0793（5MIN時(shí)，P＜001）。側(cè)腦室注射異氟烷002ΜLG1、004ΜLG1和008ΜLG1后，小鼠各時(shí)間點(diǎn)抓力與ACSF組、基礎(chǔ)抓力相比無明顯變化（P＞005）。2鞘內(nèi)注射5NGNMDA在腹腔注射異氟烷后各時(shí)間點(diǎn)與ACSF組抓力相比無明顯變化（P＞005）。鞘內(nèi)注射10NGNMDA在腹腔注射異氟烷后5MIN、10MIN小鼠抓力與ACSF組相比增大（P＜001）。鞘內(nèi)注射20NGNMDA在腹腔注射異氟烷后5MIN、10MIN、15MIN、30MIN小鼠抓力與ACSF組相比增大（P＜001），但仍低于小鼠基礎(chǔ)抓力。側(cè)腦室注射5NG、10NG和20NG的NMDA后各時(shí)間點(diǎn)的小鼠抓力與ACSF組相比均無明顯變化（P＞005）。鞘內(nèi)注射005ΜGBIC在腹腔注射ISO后10MIN、15MIN小鼠抓力與ACSF組相比增大（P＜001）。鞘內(nèi)注射01ΜGBIC在腹腔注射ISO后5MIN、10MIN、15MIN小鼠抓力與ACSF組相比增大（P＜001）。鞘內(nèi)注射02ΜGBIC在腹腔注射ISO后5MIN、10MIN、15MIN、30MIN小鼠抓力與ACSF組相比增大（P＜001），但仍低于小鼠基礎(chǔ)抓力。側(cè)腦室注射005ΜG、01ΜGBIC在各時(shí)間點(diǎn)的小鼠抓力與ACSF組相比無明顯變化（P＞005）。側(cè)腦室注射02ΜGBIC在腹腔注射ISO后10MIN、15MIN小鼠抓力與ACSF組相比增大（P＜005或P＜001），但仍低于小鼠基礎(chǔ)抓力。結(jié)論異氟烷主要作用于脊髓產(chǎn)生肌松作用，脊髓內(nèi)NMDA及GABAA受體可能是異氟烷產(chǎn)生肌松作用的靶點(diǎn)。腦內(nèi)GABAA受體對異氟烷肌松作用有一定的調(diào)節(jié)作用。

簡介：目的急性關(guān)節(jié)骨軟骨缺損臨床上常見，關(guān)節(jié)軟骨的自我修復(fù)能力有限，一旦破壞無法得到滿意的修復(fù)，治療缺乏有效手段，容易導(dǎo)致創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎和功能障礙，嚴(yán)重影響了人們的生活質(zhì)量，同時(shí)給社會和家庭造成了極大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。目前被認(rèn)為急性骨軟骨缺損的有前途的治療方法是自體骨軟骨移植以及組織工程方法修復(fù)。本課題應(yīng)用自體骨軟骨柱移植骨軟骨鑲嵌成形術(shù)和組織工程方法進(jìn)行急性骨軟骨缺損的聯(lián)合治療，通過對骨軟骨修復(fù)過程的觀察，以期尋找一種適合臨床應(yīng)用的急性關(guān)節(jié)骨軟骨缺損的修復(fù)方法。結(jié)論1股骨內(nèi)髁深度3MM，直徑5MM以上的急性缺損可以滿足實(shí)驗(yàn)的要求。2關(guān)節(jié)面的不平整對修復(fù)會有影響，小距離的臺階樣不平整不超過一個(gè)軟骨高度可以自身修復(fù)。3骨軟骨鑲嵌成形術(shù)聯(lián)合組織工程方法的治療方法可以解決單純骨軟骨鑲嵌成形術(shù)的殘留缺損愈合不良以及軟骨間整合不良的問題。4骨軟骨鑲嵌成形術(shù)聯(lián)合組織工程的方法可以有效的修復(fù)大面積骨軟骨缺損。隨著自體骨軟骨移植覆蓋缺損面積的減少，骨軟骨鑲嵌成形術(shù)聯(lián)合組織工程方法的修復(fù)優(yōu)越性可以得到更好的體現(xiàn)。自體骨軟骨移植的修復(fù)面積在三分之一以上3333％組，剩余的缺損由組織工程方法修復(fù)，仍可以獲得較為滿意的修復(fù)。但是更大面積的缺損由組織工程方法修復(fù)的效果差。

簡介：鈣是人體健康和長壽的不可缺少的重要金屬元素在人體中約占總體重的15％～20％它在人體神經(jīng)、肌肉應(yīng)激、神經(jīng)沖動傳導(dǎo)、心臟節(jié)律維持、血液凝固、細(xì)胞粘著等生理過程中發(fā)揮著極其重要的作用。因此補(bǔ)鈣食品的研制具有十分重要的意義。骨骼在動物體中約占體重的20％～30％是一種營養(yǎng)價(jià)值非常高的肉類加工副產(chǎn)物含有大量的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、礦物質(zhì)等營養(yǎng)成分特別是含鈣豐富。動物骨骼中的鈣是以羥磷灰石晶體CA10PO46OH2和無定型磷酸氫鈣CAHPO4的形式存在。羥磷灰石晶體CA10PO46OH2和無定型磷酸氫鈣CAHPO4被大量的膠原纖維緊密包裹形成致密的組織。人體要以動物骨頭為鈣源就必須將這種致密的組織破壞。微生物在生長繁殖過程中不斷進(jìn)行著能量和物質(zhì)的交換。金屬離子既是其生長所需的生長因子也可能是生長干擾因素。盡管單個(gè)菌體吸收的金屬量僅占菌體干物質(zhì)的05％～10％左右但是微生物繁殖量大生長速度快而且可以通過自身代謝的高分子物質(zhì)結(jié)合金屬。利用這種特性工業(yè)上首先在污水處理上出現(xiàn)了利用微生物富集重金屬進(jìn)而在食品領(lǐng)域也出現(xiàn)了利用菌體富集人體所需的離子態(tài)金屬元素。研究表明改變?nèi)玷F、鋅、硒等微量元素的化合態(tài)形式更利于吸收和利用而且食用安全性也提高了。乳酸菌是對人體有益的腸道菌群可以防止和阻礙其他腸道的腐敗菌產(chǎn)生對人體有害的物質(zhì)能刺激巨噬細(xì)胞的吞噬能力提高人體免疫能力和具有降低血脂和膽固醇的功能。此外研究發(fā)現(xiàn)乳酸菌對一些金屬元素如鐵具有一定的富集作用。目前國內(nèi)外將動物骨泥粉加工成食品的研究逐漸增多但成功開發(fā)出保健食品的報(bào)道較少。而利用乳酸菌發(fā)酵骨泥開發(fā)增強(qiáng)骨密度保健食品并對其功能性的研究尚未見報(bào)道。目前國內(nèi)外大多將其用于餐飲業(yè)和大量用于飼料工業(yè)或工業(yè)燃料不能有效地利用好骨泥粉這一寶貴資源造成大量蛋白質(zhì)及鈣磷營養(yǎng)物質(zhì)的浪費(fèi)。本論文系統(tǒng)地研究了以動物骨骼為主要原料應(yīng)用超微粉碎、乳酸菌發(fā)酵、酶處理等技術(shù)相結(jié)合開發(fā)具有增強(qiáng)骨密度功能的新型乳酸菌發(fā)酵骨泥保健食品研究內(nèi)容主要包括三個(gè)方面一、篩選出鈣富集量較高的乳酸菌菌株探討乳酸菌對鈣的富集作用莫定其發(fā)酵骨泥的可行性；二、研究超微粉碎骨泥的加工特性、乳酸菌發(fā)酵骨泥的工藝條件優(yōu)化和發(fā)酵骨泥的保健功能為進(jìn)一步開發(fā)生物態(tài)保健食品提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論依據(jù)；三、以發(fā)酵骨泥為主要原料開發(fā)高鈣保健食品研究其衛(wèi)生學(xué)、穩(wěn)定性、毒理學(xué)和功能試驗(yàn)探明骨泥食品的安全性和功能性。具體研究內(nèi)容和結(jié)果如下1、乳酸菌與鈣的富集作用研究通過研究保加利亞乳桿菌LACTOBACILLUSBULGARIALB、干酪乳桿菌干酪亞種LACTOBACILLUSCASEILC、短乳桿菌LACTOBACILLUSBREVISLB、乳酸乳桿菌LACTOBACILLUSLACTICLL、嗜酸乳桿菌LACTOBACILLUSACIDOPHILUSLA、植物乳桿菌LACTOBACILLUSPLANTARUMLP6種乳酸菌的生長性能、產(chǎn)酸性能以及對鈣的富集能力發(fā)現(xiàn)LC菌株效果相對較好。以LC為實(shí)驗(yàn)菌株研究發(fā)現(xiàn)在含鈣12MGML以氯化鈣為鈣源的MRS培養(yǎng)基中鈣富集量達(dá)101ΜGMG濕菌體。乳酸菌富集鈣的主要時(shí)期是在其細(xì)胞大量增殖的對數(shù)生長期此期間富集鈣的量達(dá)到整個(gè)富集量的78％；高濃度鈣離子12MGML對乳酸菌生長有一定的延遲和抑制作用。鈣離子濃度從1MGML增加到8MGML鈣富集量從098ΜGMG增加到137ΜGMG乳酸菌富集鈣的量隨培養(yǎng)基中鈣離子濃度的增加而增加但增加趨勢逐漸減緩鈣離子濃度為3MGML時(shí)以氯化鈣為鈣源乳酸菌鈣富集量為12ΜGMG濕菌體分別比以碳酸鈣和磷酸鈣為鈣源高03ΜGMG和022ΜGMG乳酸菌在42℃時(shí)培養(yǎng)時(shí)鈣富集量高于37℃；乳酸菌菌體細(xì)胞富集的鈣58％分布在細(xì)胞壁42％分布在細(xì)胞質(zhì)；富集鈣乳酸菌在模擬胃環(huán)境中能逐漸釋放出富集的鈣并顯示出一定的緩釋效應(yīng)。2、超微豬骨泥的加工及理化特性研究通過研究得到選擇2次添加4℃的冰水添水量為“骨水11”鋼磨間隙為“粗磨2圈細(xì)磨1圈”進(jìn)行二次細(xì)粉碎可以使大部分骨粒的大小從一次細(xì)粉碎后的90ΜM減小到55ΜM。超微鮮骨泥中水分含量與牛肉水分含量相近約為75％蛋白質(zhì)含量較高達(dá)123G100G脂肪含量為52％相對較低鈣含量在金屬元素中含量最高達(dá)7835MG100G牛奶含鈣約120MG100G除去水和脂肪鈣含量達(dá)39175MG100G通過對影響骨泥粘度因素的研究發(fā)現(xiàn)不同添水量、溫度、不同添加物、不同PH、高溫高壓處理、酶處理都在不同程度上影響骨泥的粘度。其中高溫高壓處理、酶處理在降低骨泥粘度上有顯著效果。木瓜蛋白酶水解和高溫高壓共同作用使骨泥氨基酸態(tài)氰顯著提高從5265MG100G提高到1234MG100G游離鈣含量增加占總鈣7835MG100G的13％提高了一倍；但對骨泥PH影響相對不大3乳酸菌發(fā)酵超微豬骨泥的工藝及功能研究乳酸菌發(fā)酵超微豬骨泥的最優(yōu)發(fā)酵工藝為添加003％的木瓜蛋白酶在65℃下保溫1H并冷卻去脂肪添加5％的碳源葡萄糖蔗糖3715％超微粉碎西紅柿泥滅菌后接種乳酸乳桿菌與植物乳桿菌11雙菌株發(fā)酵接種量為4％在37℃振蕩培養(yǎng)20H后42℃下再靜止發(fā)酵16H。通過乳酸菌發(fā)酵木瓜蛋白酶水解過的超微骨泥氨基酸態(tài)氮先降低后期略有提高發(fā)酵前1234MG100G發(fā)酵32H5867MG100G發(fā)酵48H668MG100G。顯微鏡觀察鮮骨泥和發(fā)酵骨泥粒度變化發(fā)現(xiàn)骨泥發(fā)酵后粒度明顯減小。通過045ΜM微孔濾膜過濾和LSA10吸附樹脂分析乳酸菌發(fā)酵超微骨泥前后鈣初級形態(tài)變化發(fā)現(xiàn)乳酸菌發(fā)酵有利于可溶性鈣顯著提高?？扇苄遭}從126MG100G提高到1388MG100G鈣溶出率達(dá)176％；其中有機(jī)態(tài)鈣含量從56MG100G提高1131MG100G占可溶性鈣的815％。通過對WISTAR雄性大鼠飼喂未發(fā)酵鮮骨泥和發(fā)酵超微骨泥結(jié)果顯示發(fā)酵超微骨泥在增強(qiáng)大鼠股骨密度功能上顯著高于未發(fā)酵鮮骨泥P4生物骨鈣膠囊保健食品研究利用乳酸菌發(fā)酵骨泥為主要原料采用噴霧造粒技術(shù)加工生物骨鈣膠囊保健食品確定了加工工藝及配方。28KG發(fā)酵骨泥中添加06MG維生素D3溶解后作為噴霧液母核為14KG食品級碳酸鈣和60G酪蛋白磷酸肽混合物。母核置流化床內(nèi)預(yù)先流化干燥30MIN后進(jìn)行噴霧造粒。噴霧造粒進(jìn)風(fēng)溫度和進(jìn)料頻率分別選擇80℃和60HZ。膠囊充填參數(shù)選擇06MPA充填量為025G粒。膠囊單瓶裝量為100粒瓶。裝瓶速度為50瓶MIN封口溫度為180℃。生物骨鈣膠囊保健食品中發(fā)酵骨泥干物質(zhì)含量為30％以上其中15％以上為骨蛋白包括氨基酸和多肽鈣含量約280MGG其中含來源于發(fā)酵骨泥的高活性鈣約12MGG；維生素D3含量約為3ΜGG酪蛋白磷酸肽含量約為30MGG。推薦每人每日3次每次23粒。5生物骨鈣膠囊保健食品衛(wèi)生學(xué)及穩(wěn)定性試驗(yàn)研究生物骨鈣膠囊經(jīng)衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)鈣含量達(dá)275G100G維生素D含量為29ΜGG產(chǎn)品中蛋白質(zhì)含量較高達(dá)17％砷6生物骨鈣膠囊保健食品毒理學(xué)試驗(yàn)研究生物骨鈣膠囊做毒理學(xué)試驗(yàn)包括急性毒理學(xué)試驗(yàn)、三項(xiàng)致突變試驗(yàn)AMES試驗(yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)、小鼠精子畸形試驗(yàn)和30天喂養(yǎng)試驗(yàn)。結(jié)果顯示生物骨鈣膠囊對兩種性別的大、小鼠的MTD均大于15000MGKGBW說明該產(chǎn)品屬無毒物；三項(xiàng)致突變試驗(yàn)結(jié)果陰性；大鼠30天喂養(yǎng)試驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)均未見異常。7生物骨鈣膠囊保健食品功能試驗(yàn)研究生物骨鈣膠囊增強(qiáng)骨密度的功能試驗(yàn)研究結(jié)果得到生物骨鈣膠囊對大鼠體重沒有顯著影響P005。給予375MGKGBW、1125MGKGBW的生物骨鈣膠囊可使大鼠的股骨鈣含量、股骨密度顯著高于低鈣對照組和等劑量的碳酸鈣對照組P005。根據(jù)衛(wèi)生部保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范2003版中對增加骨密度功能實(shí)驗(yàn)的判定方法判定生物骨鈣膠囊有增加骨密度功能的作用

簡介：目的探討健康成年女性飲茶習(xí)慣對骨密度、骨質(zhì)疏松及低骨量的影響，并初步探討其飲茶習(xí)慣與骨折風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。方法整理1997年01月2001年3月期間長沙馬王堆等社區(qū)2248名2881歲健康漢族成年婦女骨密度資料，通過已有聯(lián)系方式再次與之取得聯(lián)系，進(jìn)行回顧性問卷調(diào)查。運(yùn)用單因素方差分析比較不同飲茶習(xí)慣組骨密度均數(shù)的差異性；計(jì)算不同飲茶習(xí)慣組間優(yōu)勢比（值）及95％置信區(qū)間，并進(jìn)一步運(yùn)用卡方檢驗(yàn)驗(yàn)證不同組間骨質(zhì)疏松、低骨量及骨折患病率差異的顯著性。結(jié)果飲茶組女性腰椎、股骨及前臂骨密度較總體人群及不飲茶組均降低（P005，P00000046），且大量飲茶組較中量組骨密度降低（P值均小于005）。飲茶組骨質(zhì)疏松發(fā)病率較總體人群、不飲茶組分別升高143倍（95％CI062，224），236倍（95％CI164，309）；飲茶組低骨量發(fā)病率較總體人群、不飲茶組分別升高212倍（95％CI164，261）、280倍（95％CI231，334）。飲茶組骨折發(fā)病率較總體人群及不飲茶組均升高140倍（95％CI080，224）、232倍（95％CI116，348）。且隨飲茶量增高骨質(zhì)疏松、低骨量及骨折發(fā)病率均有增高的趨勢（P值均小于005）。飲茶組與總體人群間、飲茶組與及不飲茶組間骨質(zhì)疏松、低骨量及骨折患病率間差異均有顯著性（P值均小于005）。結(jié)論女性飲茶者腰椎、股骨及前臂等部位骨密度較不飲茶者顯著降低，且隨飲茶量的增加骨密度下降有一定線性趨勢。女性飲茶者腰椎、股骨及前臂等部位骨質(zhì)疏松、低骨量及骨折患病率較不飲茶者顯著升高，且隨飲茶量的增加患病率升高。

簡介：該文以硫酸鈣為基材對其結(jié)構(gòu)及性能進(jìn)行了研究采用制孔劑法制備組織工程用硫酸鈣多孔支架材料并利用生物無機(jī)材料或聚合物材料與之復(fù)合構(gòu)成復(fù)合骨修復(fù)材料以達(dá)到性能優(yōu)化和吸收速度調(diào)控之目的1半水石膏及其水化物二水石膏結(jié)構(gòu)及性能研究2探討了由Α半水石膏制備硫酸鈣骨修復(fù)材料的成型技術(shù)并對修復(fù)材料在模擬條件下的吸收速度及其影響因素進(jìn)行了研究3采用制孔劑法構(gòu)制出了SCCS、GLCS系列多孔支架材料并對二者的結(jié)構(gòu)及特性進(jìn)行了研究4利用生物無機(jī)材料TCP或HA與硫酸鈣復(fù)合制備出CSTCP和CSHA復(fù)合材料以調(diào)控硫酸鈣吸收速度5構(gòu)制了由生物相容性明膠、聚乳酸與硫酸鈣組成的復(fù)合材料并對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究