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文檔簡介
1、目的:探討FOXQ1(Forkhead Box Q1,FOXQ1)基因?qū)Υ竽c癌細胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-Mesenchymal transition,EMT)的作用及其可能的機制。
方法:構建針對人類FOXQ1基因的shRNA慢病毒沉默載體,轉(zhuǎn)染大腸癌細胞株SW480細胞,并篩選出沉默效果最好的干擾序列。后續(xù)實驗設干擾組(感染 FOXQ1-sh1序列)、陰性組(感染 NC-shRNA序列)、對照組。顯微鏡觀察
2、三組細胞間形態(tài)學差異;Transwell小室、細胞黏附試驗觀察三組細胞轉(zhuǎn)移能力及黏附能力的差異;qRT-PCR、W estern blot技術檢測E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP2基因和蛋白水平的差異。
結果: FOXQ1-sh1慢病毒載體成功沉默了SW480細胞的FOXQ1的表達。干擾組與陰性組及對照組相比,細胞頂?shù)讟O性及細胞間緊密連接增加;侵襲、遷移的細胞數(shù)目顯著減少(P<0.05);同
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