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文檔簡介
1、目的:
觀察JQ1對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖的影響,探討JQ1對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖的調(diào)控作用及其機(jī)制,為臨床治療宮頸癌提供新的治療途徑。
方法:
1.體外培養(yǎng)HeLa細(xì)胞,按每孔細(xì)胞0.5×104個(gè)接種至96孔板,細(xì)胞貼壁100min后,將細(xì)胞分成二甲亞砜(DMSO)對(duì)照組和JQ1處理組(終濃度分別為0.01、0.1、1和10μmol/L),細(xì)胞處理96h,采用MTT比色法檢測(cè)JQ1對(duì)HeLa細(xì)胞增殖的影
2、響;
2.體外培養(yǎng)HeLa細(xì)胞,按每孔細(xì)胞500個(gè)接種至6孔板,細(xì)胞貼壁100min后,將細(xì)胞分成DMSO對(duì)照組和JQ1處理組(終濃度分別為0.01、0.1、1和10μmol/L),細(xì)胞處理12d,計(jì)算細(xì)胞克隆形成數(shù)量變化;
3.體外培養(yǎng)HeLa細(xì)胞,將細(xì)胞分成DMSO對(duì)照組和JQ1處理組(終濃度分別為0.01、0.1、1和10μmol/L),收集細(xì)胞RNA和蛋白,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Westernblot檢測(cè)細(xì)
3、胞中c-Myc表達(dá)變化。
結(jié)果:
1.與DMSO對(duì)照組相比,JQ1抑制了HeLa細(xì)胞的增殖,且成劑量依賴性,0.01、0.1、1和10μmol/L JQ1處理組細(xì)胞增殖分別下降至0.8±0.02、0.71±0.1、0.61±0.01和0.45±0.02,均P<0.05;
2.與DMSO對(duì)照組相比,0.01、0.1、1和10μmol/L JQ1處理組均抑制了HeLa細(xì)胞克隆形成(細(xì)胞克隆形成數(shù)量:276.7±
4、12比156±11、111.7±10、80.3±6、4.3±2,均P<0.05);
3.與DMSO對(duì)照組相比,0.01、0.1、1和10μmol/L JQ1處理組抑制了HeLa細(xì)胞c-Myc mRNA(1.01±0.01倍比0.74±0.02倍、0.63±0.021倍、0.52±0.01倍、0.45±0.02倍,均P<0.05)和蛋白表達(dá)(1.02±0.01倍比0.64±0.15倍、0.53±0.02倍、0.42±0.11倍、
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