FoxO1-shRNA干擾質粒對水通道蛋白9在正常人肝細胞中表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察FoxO1基因沉默對水通道蛋白9(AQP9)在正常人肝細胞L-02中表達的影響。
　　 方法:將4條特異性干擾質粒FoxO1-shRANA1～4經脂質體法瞬時轉染L-02細胞,熒光顯微鏡下觀察轉染效率,篩選沉默效率最佳的一條質粒載體轉染肝細胞,經RT-PCR法檢測其對AQP9基因表達的影響;細胞免疫熒光、Western blot法檢測其對AQP9蛋白表達的影響;并在轉染后不同時間點收集細胞,實時熒光定量PCR檢測轉染后

2、FOXO1抑制AQP9轉錄表達的時間譜。
　　 結果:4條特異性干擾質粒FoxO1-shRNA1～4均有不同程度的沉默效果,其中以FoxO1-shRNA2沉默效果最佳,與對照組相比,AQP9在L-02細胞中的mRNA及蛋白水平的表達水平下降差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);定量PCR檢測顯示,AQP9的表達隨轉染時間的延長而降低,在轉染后60 h達抑制峰值,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結論:FoxO1基因沉

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