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文檔簡介
1、背景和目的:乳腺癌仍然是威脅女性健康和生命的重要因素,尋找新的有效的治療方法和治療藥物是解決這一問題的可行途徑。光動力治療是近年來興起的治療腫瘤的一種新方法。其原理是利用光敏劑能選擇性地富集在腫瘤組織中,在相匹配光源激發(fā)下,發(fā)生一系列光化學(xué)反應(yīng),從而抑制和殺傷腫瘤細(xì)胞。姜黃素作為一種染料和食用色素具有悠久的歷史,目前人們發(fā)現(xiàn)姜黃素不僅是一種廣譜抗癌藥,而具還具有光敏活性,是種潛在的中草藥光敏劑。本實(shí)驗(yàn)以人乳腺癌MCF-7細(xì)胞為研究對象,
2、觀察姜黃素對其的抑制作用,在明確姜黃素抑癌規(guī)律的基礎(chǔ)上,利用實(shí)驗(yàn)研制成功的特異光源進(jìn)一步觀察光敏化姜黃素對乳腺癌MCF-7細(xì)胞抑制作用的增強(qiáng)效果,從而為姜黃素的臨床應(yīng)用提供理論支持,同時探索姜黃素作為一種新型光敏劑的可能性和應(yīng)用前景。 方法: (1)實(shí)驗(yàn)設(shè)8個組,正常對照組和7個實(shí)驗(yàn)組,7個實(shí)驗(yàn)組分別給予5μM、10μM、20μM、30μM、40μM、60μM、80μM的姜黃素處理,采用MTT比色法、電鏡觀察等方法分別進(jìn)
3、行檢測,研究不同濃度姜黃素對人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的抑制作用,明確姜黃素抑癌規(guī)律。 (2)在此基礎(chǔ)上,建立體外光照系統(tǒng),設(shè)正常對照組、單純光照組、單純姜黃素作用組和光動力實(shí)驗(yàn)組,采用MTT比色法和Hoechst 33258染色法進(jìn)行檢測,研究在特定時間內(nèi),光照對一定濃度姜黃素抑癌作用的增強(qiáng)效應(yīng)。 結(jié)果: (1)正常對照組的光密度(Optical density,OD)值為1.243±0.253,各實(shí)驗(yàn)組的OD值依
4、次是1.212±0.224、1.055±0.236、0.711±0.179、0.601±0.108、0.379±0.086、0.342±0.079、0.2424±0.041??梢婋S著姜黃素濃度的增加, OD值逐漸降低;電鏡也觀察到隨著姜黃素濃度的增加細(xì)胞器的改變逐漸明顯,死亡細(xì)胞逐漸增多。 (2)MTT比色法檢測,得到正常對照組的OD值是1.561±0.278;各單純光照組的OD值分別是1.3224±0.195、1.2894±0
5、.126、1.2954±0.113、1.300±0.210、1.1354±0.084、1.260±0.220;單純姜黃素作用組的OD值是1.1794±0.200和0.927±0.200;光動力實(shí)驗(yàn)組OD值分別是0.6654±0.146、0.5974±0.144、0.5974±0.142、0.5364±0.049、0.3704±0.132、0.1314±0.318和0.3434±0.063、0.2864±0.059、0.187±0.022
6、、0.1854±0.060、0.1354±0.021、0.1164±0.014。發(fā)現(xiàn)在有姜黃素存在的前提下,OD值與姜黃素的濃度和光照時間成反比,單獨(dú)光照對細(xì)胞的影響不明顯。Hoechst 33258染色僅光動力實(shí)驗(yàn)組可見明顯細(xì)胞凋亡和壞死,正常對照組、單純光照組、單純姜黃素作用組三組間未見明顯差異。 結(jié)論: 1. 姜黃素能顯著抑制人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖并且隨著姜黃素濃度的增加這種抑制作用也隨之增強(qiáng)。 2.
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