2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、細胞膜(Cell membrane)是細胞內(nèi)外環(huán)境交流的界面,也是細胞與周圍環(huán)境以及細胞與細胞之間進行物質(zhì)交換和信息傳遞的重要通道。細胞膜表面蛋白是細胞膜的重要組成部分,它們參與了細胞的識別和免疫應(yīng)答、信號傳導(dǎo)和調(diào)控、細胞內(nèi)物質(zhì)及能量的傳遞等重要功能,對細胞的生存、生長、分裂和分化都至關(guān)重要。
   細胞膜蛋白質(zhì)組學(xué)是研究細胞膜蛋白質(zhì)組成成分、表達水平以及修飾情況,進而了解細胞信號傳導(dǎo)、細胞與細胞間的相互作用、離子及溶液傳遞規(guī)律

2、等,同時也能為疫苗、病理研究等臨床應(yīng)用領(lǐng)域提供新的理論基礎(chǔ)。細胞膜蛋白質(zhì)在臨床藥物研究和開發(fā)中占整個已知藥物靶標(biāo)的70%,而細胞膜的功能基本上都是由占細胞總蛋白質(zhì)20%~25%的細胞膜蛋白質(zhì)來執(zhí)行的。
   膜蛋白具有疏水性強、相對豐度較低等特點,同時多數(shù)的膜蛋白存在著各種各樣的翻譯后修飾,如糖基化、磷酸化、甲基化等,造成其具有不均一性。因此,分離和鑒定膜蛋白一直是膜蛋白質(zhì)組學(xué)研究的難點。本研究利用生物素標(biāo)記的方法,通過使用一種

3、新型的納米乳膠顆粒材料Latex作為親和素的載體,在活細胞狀態(tài)下,進行標(biāo)記、分離和提純。納米級顆粒的使用,在相同總體積的情況下,較通常使用的微米級或是毫米級顆粒大幅提高了載體的表面積,增加了親和素的結(jié)合量,同時摒棄了長時間超速離心法的費時費力,提高了分離純化效率。我們運用該材料并進行適當(dāng)優(yōu)化后應(yīng)用于腫瘤細胞、人和小鼠胚胎干細胞以及人類精子的細胞膜蛋白質(zhì)組學(xué)研究上,都充分證明其高效性。以腫瘤細胞K562及其耐藥株K562/A02細胞為例,

4、我們運用該方法共檢測到1294和1415種蛋白,其中膜及相關(guān)蛋白分別為645和726種,是目前已有報道中一次性檢測到該細胞膜蛋白最多的方法。與此同時,我們還首次在K562中發(fā)現(xiàn)了8種腫瘤標(biāo)志蛋白以及大量的低豐度、未知的和功能不明確的蛋白,體現(xiàn)了該方法的高靈敏度,且親水、疏水蛋白均可的廣泛適用性,為今后對細胞膜表面蛋白的深入研究提供了良好的技術(shù)平臺和理論基礎(chǔ)。
   慢性髓細胞樣白血病(chronic myeloid leukem

5、ia,CML),是一種起源于骨髓多能造血干細胞的惡性增殖性疾病,年發(fā)病率維持在每10萬人中有1-2例。K562細胞株是人類建立的第一株髓系白血病細胞株,是目前公認(rèn)的最經(jīng)典的白血病研究模型之一,而K562/A02細胞株是用阿霉素(adriamycin,ADM)逐步篩選K562細胞所建立的一株具有典型多藥耐藥特征(multidrug resistance,MDR)細胞株。本文通過蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)技術(shù),對K562及其多藥耐藥株K562/A02細

6、胞質(zhì)膜進行蛋白質(zhì)組學(xué)層面的分離、鑒定及比較。僅K562細胞的膜蛋白中,我們就發(fā)現(xiàn)114個與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān),119個與代謝相關(guān),95個與通道及運輸有關(guān),51個與囊泡運輸有關(guān),23個為粘附和連接蛋白,17個是氧化還原酶類,26個為伴侶分子,19個是與細胞骨架相關(guān),17個與修飾作用有關(guān),27個和蛋白降解有關(guān),以及74個未知功能的膜相關(guān)蛋白,這是目前已知的對該細胞膜蛋白最完整、最全面的一次分類和總結(jié)。我們又經(jīng)過比較蛋白質(zhì)組學(xué)的研究,發(fā)現(xiàn)并驗證了K

7、562/A02特異性的跨膜蛋白201種,也是已有報道中一次性發(fā)現(xiàn)K562/A02特異性跨膜蛋白最多的。這些研究結(jié)果都為尋找新的白血病耐藥相關(guān)蛋白提供了全新的研究方向。
   在對K562及其耐藥株K562/A02細胞膜進行蛋白質(zhì)組學(xué)比較研究的基礎(chǔ)上,我們就K562/A02特異性的膜表面分子--尼古丁型乙酰膽堿受體alpha3(nAChR a3)與該細胞耐藥性之間的關(guān)系進行了深入的研究。我們發(fā)現(xiàn),加入尼古丁后含有alpha3受體的

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