不同熱缺血時間對大鼠心臟死亡中度脂肪肝肝移植影響的實驗研究.pdf

1、目的：
　　1、建立穩(wěn)定可靠、重復(fù)性好、經(jīng)濟的大鼠中度非酒精性脂肪肝模型。
　　2、建立操作穩(wěn)定可靠、重復(fù)性好的大鼠DC D脂肪肝肝移植動物模型。
　　3、探討不同熱缺血時間（0min、10min、20min）對大鼠DCD中度脂肪肝供肝肝移植術(shù)后生存率、移植肝功能及肝臟組織病理的影響。
　　方法：
　　實驗一大鼠中度非酒精性脂肪肝模型的建立和觀察：
　　1.1動物分組：將20只大鼠隨機分成高脂飲食組和

2、普通飲食組，每組10只，高脂飲食喂高脂飼料，普通飲食組喂普通飼料。
　　1.2中度非酒精性脂肪肝模型：使用高脂飼料（配方為：88％基礎(chǔ)飼料、10%豬油、2%膽固醇）喂養(yǎng)6周。
　　1.3觀察：6周后比較兩組大鼠體重、肝臟濕重、肝指數(shù)、肝功能，行肝臟病理檢查，觀察脂肪肝程度。
　　實驗二大鼠D CD脂肪肝肝移植模型的建立和觀察：
　　2.1DCD供肝模型：采用開胸誘導(dǎo)心臟死亡，以心臟停跳作為熱缺血時間的開始；股動脈

3、插管監(jiān)測DC D造模過程動脈血壓變化。
　　2.2原位肝移植模型：參照Kamada的雙袖套法。
　　2.3觀察：DCD造模過程中動脈血壓、開胸到心臟死亡的時間；完成DCD脂肪肝大鼠肝移植10例，熱缺血時間5min，計算造模成功率。
　　實驗三大鼠D CD中度脂肪肝肝移植安全的熱缺血時限研究：
　　3.1動物分組：按熱缺血時間不同分為WIT0、WIT10、WIT20組，每組實施DCD脂肪肝肝移植51例。
　　

4、3.2觀察：各組術(shù)后1d，3d，5d，7d，14d隨機處死6只大鼠，比較肝功能、肝臟病理及30d生存率。
　　統(tǒng)計學(xué)處理
　　應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析，計量資料采用均數(shù)±標準差(x±s)表示。統(tǒng)計方法采用兩樣本t檢驗、單因素方差分析+LSD法、析因方差分析、重復(fù)測量方差分析，采用Kaplan-Meier法分析術(shù)后生存率，組間生存率比較采用log-rank檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：

5、　　實驗一大鼠中度非酒精性脂肪肝模型的建立和觀察：
　　1.1高脂飲食組AST和ALT稍高于普通飲食組（P＜0.05），TG較普通飲食組顯著升高（P＜0.05）。
　　1.2高脂飲食組大鼠體重、肝濕重、肝指數(shù)均高于普通飲食組（P＜0.05）。
　　1.3高脂飼料喂養(yǎng)6周成功復(fù)制大鼠中度非酒精性脂肪肝模型，復(fù)制成功率100%。
　　實驗二大鼠D CD脂肪肝肝移植模型的建立和觀察：
　　2.1動脈血壓變化：開胸

6、后1min內(nèi)，由于窒息致供體大鼠出現(xiàn)一過性動脈收縮壓升高，此期間收縮壓由(94.70±6.45)mmHg升高至(108.70±7.42)mmHg(P＜0.05)，之后迅速下降，直至心臟停搏時為0mmHg。
　　2.2開胸誘導(dǎo)心臟停搏時間：開胸后8.6±2.1min即可誘導(dǎo)大鼠心臟停搏。
　　2.3大鼠肝移植造模情況：共完成10例大鼠DCD脂肪肝肝移植，1只大鼠在術(shù)后3h死于肝上下腔靜脈吻合口出血，造模成功率90%（9/10）

7、。
　　實驗三大鼠D CD中度脂肪肝肝移植安全的熱缺血時限研究：
　　3.1WIT0組和WIT10組30d生存率比較無差異（P＞0.05），WIT20組15只大鼠在術(shù)后2d內(nèi)因移植物無功能全部死亡，生存率明顯低于WIT0組、WIT10組（P＜0.05）。
　　3.2血液指標分析：WIT10組術(shù)后5個時間點血清AST和ALT均高于WIT0組（P＜0.05），TBIL、ALB，PT各時間點WIT10組和WIT0組比較無差異

8、（P＞0.05）；WIT20組術(shù)后1dAST、ALT、TBIL、PT明顯高于WIT0組和WIT10組（P＜0.05），ALB水平明顯低于WIT0組和WIT10組（P＜0.05）。
　　3.3HE病理結(jié)果：熱缺血時間越長肝臟病理損害越嚴重，熱缺血時間在10min以內(nèi)，肝臟病理損害是可逆的，但熱缺血時間超過20min，移植肝出現(xiàn)大片壞死等不可逆病理損害。
　　結(jié)論：
　　1、采用高脂飲食誘導(dǎo)大鼠非酒精性脂肪肝模型經(jīng)濟、簡單