脂肪變性供肝對(duì)DCD肝移植影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的
　　 肝移植已成為治療急、慢性肝功能衰竭的有效手段,供肝短缺嚴(yán)重制約了肝臟移植手術(shù)的開(kāi)展,拓展邊緣性供肝來(lái)源,成為目前研究的熱點(diǎn)。心死亡供者(donors of cardiac death,DCD)已成為國(guó)際上公認(rèn)的供者三大來(lái)源之一。心死亡供肝因經(jīng)歷較長(zhǎng)的熱缺血時(shí)間,供肝將經(jīng)受更大的損傷。供肝脂肪性變是肝移植手術(shù)的重要危險(xiǎn)因素,術(shù)后PNF和IPF的發(fā)生率較正常供肝高。重度脂肪肝供肝因有較高的IPF及PNF發(fā)生率,一般不予使

2、用。但對(duì)輕中度脂肪變性供肝程度判斷和取舍報(bào)道各異,影響了脂肪肝供肝的合理利用。本實(shí)驗(yàn)針對(duì)供肝脂肪變性以及DCD熱缺血時(shí)間兩個(gè)危險(xiǎn)因素加以研究,初步探討脂肪變性供肝應(yīng)用于DCD肝移植的安全性。
　　 方法
　　 一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
　　 雄性同系成年SD大鼠,體重(250-300)g。根據(jù)供肝脂肪變性程度及熱缺血時(shí)間的不同將大鼠分為6組:S1W15組:輕度脂肪供肝+熱缺血15分鐘;S1W30組:輕度脂肪供肝+熱缺血

3、30分鐘;S2W15組:中度脂肪供肝+熱缺血15分鐘;S2W30組:中度脂肪供肝+熱缺血30分鐘:NW30組:正常供肝+熱缺血30分鐘;N組:對(duì)照組,正常供肝+熱缺血0分鐘。
　　 二、大鼠動(dòng)物模型的建立
　　 1、大鼠脂肪變性模型的建立
　　 高脂高膽固醇喂飼方法誘導(dǎo)大鼠輕、中度脂肪肝模型。即標(biāo)準(zhǔn)飼料82%,豬油10%,膽固醇2%,蔗糖5%,膽酸鈉0.5%,甲基硫氧嘧啶0.5%。分別喂養(yǎng)4W、6W后建立輕、中度

4、大泡性脂肪肝模型。
　　 2、大鼠DCD模型的建立
　　 經(jīng)陰莖背靜脈注人肝素鈉500U,開(kāi)胸血管鉗夾閉心臟基底部致使心臟停搏,造成DCD供肝熱缺血模型。
　　 3、大鼠原位肝移植模型的建立
　　 Kamada二袖套法行大鼠原位肝移植。
　　 三、觀(guān)察指標(biāo)
　　 移植后24h、72hAST、ALT、TB、BUN變化;移植后24h、72h肝臟病理學(xué)檢查;一周存活率觀(guān)察。
　　 四、統(tǒng)

5、計(jì)學(xué)分析
　　 使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,數(shù)據(jù)以均值士標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示,采用方差分析和t檢驗(yàn);生存時(shí)間繪制成Kaplan-Meier曲線(xiàn),比較采用對(duì)數(shù)秩檢驗(yàn)(log-rank),P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)果
　　 移植后72h,S2W30組受體大鼠ALT、AST、TB指標(biāo)與N組相比有顯著性差異(P＜0.05),S1W15組、S2W15組與N組相比各指標(biāo)差異無(wú)顯著性(

6、P＞0.05)。S2W30組各時(shí)點(diǎn)出現(xiàn)大量肝細(xì)胞壞死,肝竇充血,肝竇內(nèi)紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞聚集顯著。S1W15組、S2W15組可見(jiàn)少量壞死肝細(xì)胞,肝充血、粒細(xì)胞浸潤(rùn)較輕。S1W15組、S1W30組、S2W15組、S2W30組、NW30組及N組的7天存活率分別為80%、60%、70%、30%、60%、100%。S2W30組與N組相比有顯著性差異(P＜0.05),S1W15組、S2W15組與N組相比各指標(biāo)差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。