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1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文小檗堿和藥根堿對(duì)HO誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制姓名:張輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)指導(dǎo)教師:汪華僑20100601中山大學(xué)碩士學(xué)位論文小檗堿和藥根堿對(duì)H202誘導(dǎo)的PCI2細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制3)細(xì)胞MDA含量的測(cè)定;4)羅丹明123(Rhl23)染色/流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位(^n佃);5)Hochest33342染色/HCS篩選儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。第二部分:藥根堿對(duì)H2
2、02誘導(dǎo)的PCI2細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制1)DPPH法測(cè)定藥根堿抗氧化、清除自由基的能力:2)CCK8比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖狀況;3)細(xì)胞LDH釋放、MDA含量、SOD活性的測(cè)定;4)羅丹明123(Rhl23)染色/熒光顯微鏡攝片及流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位(MMP);5)細(xì)胞內(nèi)活性氧(RoS)水平的測(cè)定;6)Westernblot法檢測(cè)Cleavedcaspase一3蛋白、HO—l蛋白的表達(dá)?!窘Y(jié)果】1H202對(duì)PCI2
3、細(xì)胞的損傷1)PCI2細(xì)胞分別與100Imaol、200pmol、300lamol、400pmolH202共培養(yǎng)12h,CCK8法檢測(cè)細(xì)胞活力顯示,在100400lunolI1202范圍內(nèi),細(xì)胞存活率隨藥物濃度增加而逐漸降低,呈劑量依賴性關(guān)系。2)200lamolH202處理PCI2細(xì)胞12h,細(xì)胞LDH釋放增加、MDA含量升高、SOD活性降低。3)200limolH202處理PCI2細(xì)胞12h,細(xì)胞內(nèi)ROS水平明顯增加。4)200lu
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